全 文 ：　第 1 期　总第 102 期
　2003 年 3 月 　　　　　　　　 云　南　林　业　科　技Yunnan Forestry Science and Techno logy　　　　　　　　　 No.1March.2003　
马来西亚甜龙竹的组织培养繁殖试验
龚力波1　郑思乡2　肖龙骞2　李枝林2
(1.云南省科技厅农村服务中心 , 云南　昆明 650051;2.云南农业大学 , 云南　昆明 650201)
摘要:以马来西亚甜龙竹的当年生枝条作为外植体 , 用 MS 、 1/ 2 MS 、 1/ 3 MS 、 1/4 MS 作为基本培养基 , 并添
加不同种类和浓度的植物激素 , 进行组织培养繁殖试验。结果筛选出了各培养阶段最适宜的培养基配方 , 它们
分别是:(1)初代培养基配方:MS+6-BA 1.00mg/ L+0.01 %PVP+0.1 %Vc (2)丛生芽继代增殖培养基配
方:MS+6-BA 2.00mg/ L+KT 1.50mg/ L+IBA 1.25mg/ L (3)诱导生根培养基配方:1/ 2 MS+NAA 1.00mg/
L+IBA 0.50mg/ L+PP3330.10mg/ L。
关键词:马来西亚甜龙竹;组织培养;繁殖试验
中图分类号:Q 813.1+2;S 795.9　　文献标识码:A　　文章编号:1007-3353 (2003)01-0005-03
　　马来西亚甜龙竹 (Dendrocalamus asper)为丛
生竹 , 一般高 15 ～ 20 m , 胸径10 ～ 15 cm , 茎圆满
通直 , 质地坚韧 , 是良好的建筑材料 , 且竹笋甘甜
味美 , 糖分和谷氨酸含量高 , 开发潜力极大 。竹子
通常靠无性繁殖繁衍 。利用组织培养快速繁育竹类
苗木的方法 , 能够在短期内大量培育优良种苗 , 实
现规模化生产。在国外比较系统地开展竹子组织培
养工作始于 20世纪 80年代 , 只是对 18个属 70个
种进行过实验 , 其中仅 60个种获得成功。我国竹
子组织培养工作开展得较晚 , 于 20世纪 90年代开
始 , 迄今为止 , 只有印度刺竹 (D.arundinacea),
黄竹 (D.membrancus), 麻竹 (D.lati f lorus)和
勃氏甜龙竹 (D.brandisi i)等少数种获得成功[ 1] 。
选择马来西亚甜龙竹这一优良竹种进行组织培养快
速繁殖研究 , 旨在筛选出该竹种适宜的培养基配
方 , 并建立快速无性繁殖技术体系 。
1　试验方法
1.1　外植体的培养
外植体采用马来西亚甜龙竹当年生的枝条。选
取枝芽饱满的枝条 , 先用清水和 2 %～ 5 %的洗洁
精溶液洗去表面泥土和灰尘 , 然后剪取长约 1.5
cm 的带一个芽的茎段 , 在 75 %酒精中浸泡 30 s。
再在 0.1 %升汞溶液中浸泡6 ～ 8 min , 并用无菌水
洗 4 次 , 再分别接种至以下 3 种培养基上培养。
(1)MS+6-BA 1mg/L;(2)MS+6-BA 1mg/L
+0.01 %PVP+0.1 %Vc;(3)MS +6-BA 1mg/
L +GA3 2mg/ L。每个处理重复 3次试验。
1.2　芽的增殖培养
把获得的丛生芽分割接种于以下 11种培养基
中进行增殖培养:基本培养基为 MS , 附加激素及
其浓度分别为 0.80 mg/L 、 1.00 mg/L 、 1.60 mg/L 、
2.00 mg/L 、 2.40 mg/ L 、 3.20 mg/ L 的 6 -BA;
1.00 mg/L 、 1.50 mg/ L 、 2.00 mg/L 、 4.00 mg/L
的 KT ;1.25 mg/L 的 IBA。在每种培养基中均加
蔗糖 30 g/L 和琼脂 7 g/L , 将 pH 值调至 5.8 左
右 , 培养温度为 25℃, 人工光照 12 h , 光照强度 1
000 ～ 1 500LX。每个处理重复 3次试验 。
1.3　生根培养
把丛生芽长成的小植株从芽丛中切离出来转到
以下生根培养基上进行生根培养:基本培养基为
1/2 MS 、 1/3 M S 和 1/4 M S , 附加的激素及其浓
度为 0.50 mg/ L、 0.70 mg/ L、 1.00 mg/ L、 1.50
mg/L 的 NAA 和 0.13 mg/L 、 0.25 mg/L 、 0.38
mg/L 、 0.50 mg/ L 的 IBA 及 0.10 mg/L 、 0.20
mg/L 的 PP333 , 各参试培养基中均加蔗糖 20 g/L
和琼脂 7 g/ L , pH 值调为 5.8 , 从第 5天开始观察
记录生根情况。每个处理重复 3次试验。
收稿日期:2002-04-04
　　　第一作者简介:龚力波(1965-), 男 , 云南楚雄人 , 工程师 , 主要从事项目管理及农村服务工作。
DOI :10.16473/j.cnki.xblykx1972.2003.01.002
1.4　炼苗试验
把已生根的小苗取出用自来水洗干净 , 然后用
0.1 %的多菌灵溶液浸泡 2 min 后进行移栽 , 移栽
基质为两组:(1)经蒸汽消毒的河砂;(2)70 %
腐殖土+30 %河砂作苗床。用透明塑料薄膜覆盖
保温 , 遮光网遮光 , 3周后揭开覆盖物 , 让竹苗继
续生长。炼苗期间苗床每天喷水保湿 3次 , 温度保
持在 28℃左右 , 湿度保持在 80 %左右 , 每个处理
重复 3次试验。
2　结果与分析
2.1　初代培养
不同培养基上接种的外植体 , 芽的萌发率都达
到 70 %～ 80 %, 不同培养基间无明显差别。说明
芽的萌发与生长对培养基选择不太严格 , 这可能和
该竹种芽含丰富的营养物质和适量的激素有关;但
是褐化却相当严重 , 造成大量的丛生芽死亡 , 在附
加 0.1 %Vc 和 0.01 %PVP 的培养基上 , 可抑制
褐化。
2.2　芽的增殖
从丛芽中切取的单芽或丛芽接种到培养基上进
行增殖培养 , 第 5天开始观察 , 其结果如表 1 。结
果表明:6-BA 浓度 2.00 mg/L 和 KT 浓度 1.50
mg/L 配比时最适合于芽的分化增殖 , 而加入 1.25
mg/L 的 IBA还能扩大芽的增殖倍数。因此 , 在丛
生芽继代增殖参试的培养基及其配方中 , 最适培养
基及配方是:MS+6-BA2.00 mg/L+KT1.50 mg/
L +IBA1.25 mg/L 。
表 1　不同激素及浓度对马来甜龙竹芽的增殖影响
Tab.1　The effect of different ho rmones and different concentrations on the bud reproduction
处理 6-BA/ mg·L-1
KT
/ mg·L-1
IBA
/ mg·L-1
开始增殖
时间/ d
增殖倍数
第 20 天 第 30天 第 40 天
1 0.80 1.00 9 3.2 5.8 6.3
2 1.60 1.00 8 3.5 6.0 6.5
3 1.60 1.50 7 7.0 10.0 11.0
4 1.60 2.00 8 4.2 6.8 7.2
5 2.00 9 3.8 6.2 7.0
6 2.00 1.50 7 8.5 10.5 12.0
7 2.00 1.50 1.25 6 8.0 12.0 13.0
8 2.40 1.00 8 3.7 5.9 6.9
9 2.40 1.50 6 6.7 9.0 10.0
10 2.40 2.00 9 3.8 6.7 7.3
11 3.20 1.50 8 4.0 7.0 7.5
12 4.00 9 4.5 5.7 6.0
注:增殖倍数=观察日平均芽数/平均投入芽数
表 2　不同激素及浓度对马来甜龙竹生根的影响
Tab.2　The effect of different hormones and different concentrations on rooting of D.asper
处理 基本培养基
NAA浓度
/ mg·L-1
IBA 浓度
/ mg·L-1
PP333
/ mg·L-1
开始生根
(d)
第 20 天生
根率/ %
第 30 天生
根率/ %
1 1/ 4 MS 0.50 16 7.2 12.5
2 1/ 3 MS 0.50 12 20.0 28.7
3 1/ 2 MS 0.50 8 25.0 30.2
4 1/ 2 MS 0.50 0.13 0.10 9 40.2 51.6
5 1/ 2 MS 0.50 0.25 0.10 10 40.7 52.7
6 1/ 2 MS 0.50 0.38 0.10 12 30.0 36.4
7 1/ 2 MS 0.70 0.13 0.10 7 43.2 57.1
8 1/ 2 MS 0.70 0.38 0.10 8 40.0 50.2
9 1/ 2 MS 1.00 0.50 0.10 6 80.7 97.8
10 1/ 2 MS 1.00 0.50 0.20 9 67.2 76.5
11 1/ 2 MS 1.50 0.50 0.10 7 76.5 96.5
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2.3　根的诱导
继代增殖后的苗接种在生根培养基上 , 1周后
开始生根 , 情况如表 2。结果表明 , 在相同激素浓
度下 , 以 1/2 MS 培养基上的竹苗生根率最高 。
NAA和 IBA 均能诱导生根 , 不同的添加量中以
NAA 1.00mg/L+IBA 0.50mg/ L 的生根效果为好 。
还发现 PP333随加入的量不同对生根的作用有所不
同 , 当加入量为 0.10 mg/L 时有很好的促进生根
作用 , 而当浓度增至 0.20 mg/L 时却对生根起抑
制作用。因此 , 最适合于马来西亚甜龙竹生根的培
养基配方为:1/2 MS +NAA 1.00mg/L + IBA
0.50mg/L +PP3330.10 mg/L。
2.4　植株移栽
由表 3可以看出 , 已生根的小苗移栽后 , 以纯
河砂为基质的成活率较高 , 达 87 %。而以腐殖土
和河砂配制而成的基质的成活率仅 75 %。说明以
河砂作为基质进行炼苗效果较好。
表 3　不同基质的马来西亚甜龙竹组培苗炼苗成活率
Tab.3　Savivo r rate of D.asper seedling tempered in
different medium
基质 炼苗株数
死亡数 /株
10天后 20天后 30 天后
30 天后
成活率
/ %
100%河砂 300 20 35 39 87
70%腐殖土
+30%河砂 300 30 60 75 75
3　讨论
(1)在对外植体进行离体培养时出现严重的褐
化现象 , 主要是多酚类物质氧化所致 , 对组织产生
毒害作用 , 导致植株死亡。试验中曾尝试加入活性
碳来减少褐化现象 , 但同时又降低了培养基中激素
的百分含量 , 对增殖和生根影响很大 。后来采用
PVP 和 Vc 这两种抗氧化剂 , 能够有效地防止褐
化 , 而且对生根和出芽几乎没有影响 。
(2)在诱导生根阶段 , 培养基配方固然重要 ,
但接种时切取小苗的部位也很关键 , 切取部位不
同 , 生根效果亦异 。从继代增殖的小苗中间部位切
取 , 接种后很难生根;而从其基部切取带 1 ～ 2个
芽的小苗接种培养却有相当高的生根率。
(3)生根苗在经过砂培炼苗阶段后 , 还不宜直
接在野外定植 , 此时 , 而应将成活苗移至营养袋进
行 2 ～ 3个月的适应性训练 , 此间注意保持较高的
温度 , 待组培苗长至 60 ～ 70 cm 高时 , 再移栽野
外 , 可保证较高的成活率。
参考文献:
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Tissue Culture Experiment of Dendrocalamus asper
GONG Li-bo1 , ZHENG Si-xiang2 , XIAO Long-qian2 , LI Zhi-lin2
(1.Rural S ervice C enter of The S cienti fic and Tech nological Department of Yunnan Province , Kunming Yunnan 650051 , China;
2.Yunnan Ag ricultural University , Kunming Yunnan 650201 , China)
Abstract:Using the annual shoot as the explant , MS , 1/2 MS , 1/3 MS and 1/4 M S as the minimal medium ,
and adding phytohormone of various concentrations , the propagation experiment of Dendrocalamus asper was
conduced.The favo rable medium preparations for dif ferent culture phases were screened out.They are:1)Pri-
mary culture:MS +6-BA 1.00 mg/L + 0.01 % PVP + 0.1 % Vc;2)Secondary culture of caespitose
bud:MS + 6-BA 2.00 mg/ L + KT 1.50 mg/L + IBA 1.25 mg/L;3)Root ing induction:1/2 MS +
NAA 1.00 mg/L + IBA 0.50 mg/L +PP333 0.10 mg/L.
Key words:Dendrocalamus asper;tissue culture;propagat ion experiment
7　第 1期　　　　　　　　　龚力波等:马来西亚甜龙竹的组织培养繁殖试验