免费文献传递   相关文献

红托竹荪化学成分的分离和鉴定



全 文 :第40卷 第5期 陕西师范大学学报(自然科学版) Vol.40 No.5
 2012年9月 Journal of Shaanxi Normal University(Natural Science Edition) Sep.,2012 
文章编号:1672-4291(2012)05-0101-03
收稿日期:2012-03-01
基金项目:教育部高等学校博士学科点专项科研基金项目(20100202120009);中央高校基本科研业务费专项资金项目
(GK200902042);陕西师范大学优秀预研项目(200902013).
第一作者:杨颖,男,硕士研究生,主要研究方向为食品功能成分开发及利用.E-mail:yy841121@sina.com.cn.
*通信作者:邵红军,男,副教授,博士.E-mail:shaohj@snnu.edu.cn.
红托竹荪化学成分的分离和鉴定
杨 颖1,程俊侠2,王 军1,邵红军1*,段玉锋1
(1陕西师范大学 食品工程与营养科学学院,陕西 西安710062;2陕西省环境监测中心站,陕西 西安710061)
摘 要:利用多种色谱分离技术从红托竹荪子实体中分离纯化了9个化合物,根据理化性质和波
谱学解析,分别鉴定为硬脂酸(1)、亚油酸乙酯(2)、尿嘧啶(3)、麦角-5,22-二烯-3β-醇(4)、5α,8α-过
氧-麦角-6,22-二烯-3β-醇(5)、(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(6)、russulamide(7)、
cerebroside B(8)和cerebroside D(9).这些化合物均系首次从该食用菌中分离得到.
关键词:红托竹荪;子实体;化学成分
中图分类号:TS201.2 文献标志码:A
Isolation and identification of chemical constituents from
fruit bodies of Dictyophora rubrovolvata
YANG Ying1,CHENG Jun-xia2,WANG Jun1,SHAO Hong-jun1*,DUAN Yu-feng1
(1Colege of Food Engineering and Nutritional Science,
Shaanxi Normal University,Xi′an 710062,Shaanxi,China;
2Shaanxi Environmental Monitoring Centre,Xi′an 710061,Shaanxi,China)
Abstract:Nine compounds were isolated from the fruit body of Dictyophora rubrovolvata by
silica gel column chromatography.On the basis of spectroscopic analysis and comparison with the
reported data,they were identified as stearic acid(1),ethyl linoleate(2),uracil(3),ergosta-5,
22-dien-3β-ol(4),5α,8α-epidioxy-ergosta-6,22-dien-3β-ol(5),(22E,24R)-ergosta-7,22-dien-3β,
5α,6β-triol(6),russulamide(7),cerebroside B(8)and cerebroside D(9),respectively.These
compounds were al obtained from this edible mushroom for the first time.
Key words:Dictyophora rubrovolvata;fruit bodies;chemical constituents
    红 托 竹 荪 (Dictyophora rubrovolvata M.
Zang,D.G.Ji &X.X.Liu)隶属担子菌门层菌纲
鬼笔目鬼笔科竹荪属,是我国学者1976年发现的新
种.该菌是食用菌中的上乘佳品,其风味独特、营养
丰富和商品价值高,享有“蘑菇皇后”和“真菌之花”
等美誉.主产于云南玉溪和贵州织金等地区,目前干
品市场售价高达600元/kg.其子实体中含有 VC、
VB1、VB2、烟酸和烟酰胺等多种维生素,游离氨基酸
总量也高达1 800.62mg/100g干重.此外,还含有
极为丰富的矿物元素[1].研究发现红托竹荪多糖是
由半乳糖、葡萄糖、甘露糖和木糖组成[2].赵凯等从
其菌托中分离得到2个组分 DRVP1与 DRVP2,
DRVP1对小鼠S180肉瘤具有一定的抑制作用[3].
为了寻找该属真菌中的生理活性成分,本实验利
用现代色谱方法和波谱技术对红托竹荪中小分子功能
成分进行系统研究,从中分离并鉴定出9种化合物.
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
红托竹荪子实体购自贵州黔粹贸易有限责任公
DOI:10.15983/j.cnki.jsnu.2012.05.020
102  陕西师范大学学报(自然科学版) 第40卷
司;薄层层析硅胶和柱层析硅胶(青岛海洋化工厂);
Sephadex LH—20(Merk).实验所用试剂均为分析
纯.显色条件为254、365nm荧光、10%硫酸乙醇溶
液和硫酸香草醛处理后加热显色及碘蒸气显色.
1.2 仪器与设备
XRC—1型显微熔点仪(四川大学科学仪器
厂),BrukerAM—400核磁共振仪,TMS为内标;
VG Auto Spec—3000质谱仪.
1.3 方法
干燥的红托竹荪子实体466g用95%乙醇提取
得到115.7g浸膏.浸膏以乙酸乙酯-水分配,减压
浓缩回收溶剂,得到乙酸乙酯部分4.4g.乙酸乙酯
部分上硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯梯度洗
脱得6组分,组分Ⅱ(石油醚∶乙酸乙酯50∶1)经
反复硅胶柱层析分离得化合物1(50mg)、2(12
mg).组分Ⅲ(石油醚∶乙酸乙酯15∶1)经硅胶柱
层析、重结晶得化合物4(13mg)和5(20mg),组分
Ⅴ(石油醚∶乙酸乙酯5∶1)经硅胶柱层析、重结晶
得化合物3(7mg)和6(11mg),组分Ⅵ(石油醚∶
乙酸乙酯1∶1和乙酸乙酯)经硅胶柱层析和
Sephadex LH—20得化合物7(25mg)、8和9(共41
mg).
2 结果与分析
采用ESI-MS、1 H-NMR和13 C-NMR等波谱技
术对分离到的化合物结构进行鉴定,结果如下:
化合物1:白色无定型粉末;C18H36O2;EI-MS
m/z(%);284[M]+(58),与标准化合物TLC对照
鉴定该化合物为硬脂酸.
化合物2:淡黄色油状澄清液体;EI-MS m/z
(相对强度,%)308(M+,13),279(4),262(20),
220(38),74 (100);1 H NMR (CDCl3)δH 0.86
(3H,t,6.6),1.22(3H,t,7.2),1.25~1.28
(CH2),1.58(2H,m),2.25(2H,t,7.5),2.74
(2H,m),4.09(2H,q,7.2),5.20~5.40(4H,
m);13C NMR (CDCl3)δC14.1(q),14.2(q),
22.5(t),24.9(t),25.6(t),27.1(t),29.06
(t),29.11(t),29.2(t),29.4(t),29.5(t),
29.7(t),31.5(t),34.3(t),60.1(t),127.9
(d),128.0(d),130.0(d),130.1(d),173.8
(s).以上数据与文献[4]报道一致,鉴定该化合物为
亚油酸乙酯.
化合物3:淡黄色粉末.FAB-MS (neg)111
(100);13C NMR(C5D5N)154.4(s),168.3(s),
102.5(d),144.5(d).上述数据与报道文献值[5]一
致,故鉴定为尿嘧啶.
化合 物 4:无 色 晶 体,m.p.154~156 ℃
(EtOAc);[α]24.5D =65.7°(c=0.37,CHCl3)EI-MS
(70eV)m/z(相对强度,%):398(M+,100),383
(M+-Me,13),380(M+-H2O,10),365(M+-H2O-
Me,9.5),337(M-C3H9O,18),300(61),271(M+-
C9H17-2H,57.5),255(M+-C9H17-H2O,73.5),159
(45),125(C9H17+,30),105(50),91(54),81(70),
69(96),55(100);IR(KBr)ν:3 427,2 948,2 862,
1 665,1 458,1 382,1 048,968cm-1;13 C NMR(100
MHz,CDCl3)δC:37.54(C-1),31.95(C-2),72.04
(C-3),42.58(C-4),141.0(C-5),121.9(C-6),32.16
(C-7),33.34(C-8),50.51(C-9),36.78(C-10),
21.32(C-11),39.96(C-12),42.58(C-13),57.12(C-
14),24.51(C-15),28.68(C-16),56.36(C-17),
12.30(C-18),20.12(C-19),40.26(C-20),21.18(C-
21),136.1(C-22),132.0(C-23),43.06(C-24),
33.34(C-25),19.84(C-26),19.58(C-27),17.80(C-
28);1 H NMR(400Hz,CDCl3):δH3.53(1H,m,H-
3),5.35(1H,d,5.2,H-6),0.69(3H,s,H3-18),
0.83(3H,s,H3-19),1.00(3H,d,6.5,H3-21),
5.71-5.20(2H,m,H-22and H-23),0.84(3H,d,
6.5,H3-26),0.91(3H,d,6.8,H3-27),1.01(3H,
d,6.5,H3-28).以上数据与文献[6]报道吻合,鉴定
该化合物为麦角-5,22-二烯-3β-醇.
化合物5:无色晶体,m.p.182~184 ℃(n-
hexane);[α]D=-34°(c=0.6,CHCl3);IR(KBr)ν:
3 525,3 309,2 957,2 873,1 653,1 459,1 377,
1 046,1 029,985,970,858cm-1;EI-MS(70eV)m/
z(相对强度,%):428(M+,5),410(4),396(100),
363(35),271(7),251(14),152(30),107(22),81
(43),69(63).上述数据与文献值[7]一致,鉴定该化
合物为5α,8α-过氧-麦角-6,22-二烯-3β-醇.
化合物6:无色结晶,EI-MS m/z:430[M+,C28
H46O3],412 [M-H2O]+,394 [M-2H2O]+,379
[M-2H2O-CH3]+,376 [M-3H2O]+,305 [M-C9
H17]+,269[M-2H2O-C9H17]+,251[M-3H2O-C9
H17]+,107,95,81,69;1 H NMR(400Hz,CDCl3):
δH5.30(1H,bd,4.9,H-7),5.21(1H,dd,15.2,
7.04,H-23),5.16(1H,dd,15.2,7.8,H-22),4.06
(1H,m,H-3),3.60(1H,bd,4.9,H-6),0.57(3H,
s,H3-18),1.06 (3H,s,H3-19),1.00 (3H,d,
2.64,H3-21),0.89 (3H,d,6.92,H3-28),0.82
  第5期 杨颖 等:红托竹荪化学成分的分离和鉴定 103 
(3H,d,6.56,H3-26),0.80(3H,d,6.52,H3-27).
上述波谱数据与(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,
5α,6β-三醇{(22E,24R)-ergosta-7,22-dien-3β,5α,
6β-trilol}的文献数据相吻合
[8],鉴定该化合物为
(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇.
化合 物 7:白 色 粉 末;negative FAB m/z
(相对强度,%):682 [M-H]-(45);1 H NMR
(400MHz,CD5D5N):δH4.52(1H,dd,10.6,
4.5,H-1α),4.43(1H,dd,10.6,5.2H-1β),
5.12(1H,m,H-2),4.35(1H,d,6.4,4.0,H-
3),4.28(1H,m,H-4),4.62 (1H,dd,7.6,
4.0,H-2′);13C NMR (100MHz,CD5D5N):δC
62.2(t,C-1),53.2(d,C-2),77.0(d,C-3),
73.2(d,C-4),34.3 (t,C-5),26.6 (s,C-6),
29.5-32.1(t,C-7-C 17),14.2(q,C-18),175.3
(s,C-1′),72.6(d,C-2′),35.7(t,C-3′),25.8
(t,C-4′),29.5~32.1(t,C-5′-C-23′),14.2(q,
C-24′),以上数据与文献值[9]相符,鉴定该化合物
为Russulamide.
化合物8,9:白色无定型粉末;C41H77NO9
(cerebroside B);C43H81NO9(cerebroside D);1 H
NMR(400 MHz,CD5D5N):δH 4.69(1H,dd,
5.4,10.7,H-1b),4.20(1H,m,H-1a),4.75
(m),4.75(m),5.79(m),5.79(m),2.14(m),
2.14(m),5.25(m),2.00(m),1.37(m),1.25
(br s),0.86(t,6.9),1.61(s),8.36(d,8.7),
4.57(m),1.74(br),2.00(m),1.25(br s),
0.86(t,6.9),4.90(d,7.6),4.03(m),4.20
(m),4.20(m),3.89(m),4.48(br d,11.5Hb),
4.33(dd,5.0,11.8Ha);13C NMR(100MHz,
CD5D5N):δC69.83(t,C-1),54.47(d,C-2),
72.37(d,C-3),131.64(d,C-4),132.22(d,C-
5),32.86(t,C-6),31.93(t,C-7),31.93(t,C-
16),22.73(t,C-17),14.05(q,C-18),15.93(q,
C-19),175.52(s,C-1′),72.21(d,C-2′),35.46
(t,C-3′),29.80~29.4(C-4′-C-13′),28.04(t,C-
14′/16′),22.73(t,C-15′/17′),14.05(q,C-16′/
18′),105.3(d,C-1”),74.87(d,C-2”),78.23(d,
C-3”),71.45(d,C-4”),78.23(d,C-5”),62.55
(t,C-6”).Negative FAB-MS m/z 726 [M-1]-,
754[M-1]-.以上数据与文献值[10]相符,即为
Cerebroside B和Cerebroside D.
3 结 论
本研究从红托竹荪中分离鉴定出9个小分子功
能成分.麦角甾醇(4)不仅是维生素D2合成的前体
物质,而且最新的研究表明其和过氧化麦角甾醇(5)
能抑制环氧合酶活性,具有抗癌和抗炎等活性[11].
化合物8可有效抑制真核生物DNA聚合酶活,具
有抗癌潜力[12].
参考文献:
[1]邵红军,房立真,程俊侠,等.竹荪属真菌功能因子与
生理活性研究进展[J].陕西师范大学学报:自然科学
版,2011,39(5):96-103.
[2]连宾,郁建平.红托竹荪多糖的提取分离及组成研究
[J].食品科学,2004,25(3):40-43.
[3]赵凯,王飞娟,潘薛波,等.红托竹荪菌托多糖的提取
及抗肿瘤活性的初步研究[J].菌物学报,2008,27(2):
289-296.
[4]柴兴云,李飞飞,任宏燕,等.伊桐的化学成分研究
[J].中国中药杂志,2007,32(13):1361-1363.
[5]Staubann R,Zsilavecz M S,Hiermann A,et al.A
complex of 5-hydroxy-pyrrolidin-2-one and pyrimidine-
2,4-dione isolated from Jatropha curcas [J].
Phytochemistry,1999,50(2):337-338.
[6]Yasunori Y,Kaiko A,Hiroyuki O,et al.Sterol
constituents from five edible mushrooms[J].Chemical
&Pharmaceutical Buletin,1998,46(6):944-950.
[7]Ishizuka T,Yaoita Y,Kikuchi M.Sterols from the fruit
bodies of Grifola frondosa [J]. Chemical &
Pharmaceutical Buletin,1997,24(45):1756-1760.
[8]Kavagishi H,Katsumi R,Sazawa T,et al.Cytotoxic
steroids from the mushroom Agaricus blazei[J].
Phytochemistry,1988,27(9):2777-2779.
[9]Gao Jinming,Dong Zejun,Liu Jikai.A new ceramide
from the basidiomycete Russula cyanoxantha [J].
Lipids,2001,36(2):175-180.
[10]高锦明.云南高等真菌中鞘脂类生物活性成分研究
[D].昆明:中国科学院昆明植物研究所,2001.
[11]García-Lafuente A,Moro C,Vilares A,et al.
Mushrooms as a source of anti-inflammatory agents
[J].Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry,
2010,9(2):125-141.
[12]Ferreira I C,Vaz J A,Vasconcelos M H,et al.
Compounds from wild mushrooms with antitumor
potential[J]. Anti-Cancer Agents in Medicinal
Chemistry,2010,10(5):424-436.
〔责任编辑 程琴娟〕