全 文 ：白羊草幼穗的组织培养
时永杰　孙晓萍　刘晓强
(中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 ,兰州 730050)
摘要　白羊草幼穗在附加有 2, 4-D 1. 0 mg / L、水解酪蛋白 500或 1 000 mg /L的 N6或 M S培养基中 ,在
25± 1℃ ,暗光培养条件下 ,两周时形成 0. 5 cm2大小的愈伤组织块。愈伤组织的发生率为 84%。培养 3周后
形成旺盛生长的愈伤组织。 其分化是在含有 N AA 0. 5 mg /L、 KT 1. 0 mg / L的 MS培养基上或者在附加有
KT 1. 0 mg /L、 IAA 0. 4 mg /L、 BA 1. 0 mg /L的 N6培养基上 2～ 4周后均可得到旺盛生长的分化植株 ,将该
植株移至不含激素的 N 6培养基内 ,在光照下进行培养 ,形成绿色分化植株。 3～ 4周后 ,将分化植株移入土壤
中 ,植株生长良好。
关键词: 　白羊草　组织培养
⒇
　白羊草 (Bothriochloa ischaemum )又名
白草、茎草 ,是禾本科孔颖草属多年生草本植
物 ,其生长势强、产草量高、抗旱、耐盐碱、适
应性广 ,以其营养价值高而在牧草生产中具
有广阔的前景。据本所云南试验点的分析测
试结果表明 ,白羊草的孕穗期粗蛋白质含量
为 18%～ 21% ,与苜蓿所含的粗蛋白质含量
相当。不仅如此 ,在禾本科牧草中白羊草的草
质优良 ,不仅可刈割晒制干草 ,亦可放牧家
畜。美国已培育出不少白羊草的高产品种 ,并
建成了人工草地〔 1〕。 为了充分利用这一广布
建群优势种 ,培育优良的白羊草品种 ,笔者进
行了白羊草的组织培养研究 ,其结果如下。
1　材料与方法
从田间取播种后第 2年返青、 0. 5 cm长
的未抽穗幼穗 ,在冰箱内 0～ 4℃下处理 24
～ 26 h,用 70%酒精表面灭菌后 ,无菌条件
下剥去幼穗外叶鞘及苞叶 ,将幼穗接种于愈
伤组织诱导培养基上 ,在温度 25± 1℃条件
下暗光培养 ,诱导产生愈伤组织。然后转移到
分化培养基上 ,进行愈伤组织的诱导分化 ,最
后在无激素培养基上 ,在光强为 1 000～
1 200勒克斯 ,光照时数 8～ 10 h /日 ,温度 25
± 1℃条件下建成绿色植株。
培养基的灭菌是在高压锅内 ,温度 121
℃ ,压力 1. 05 kg /cm2下 15 min高压灭菌。
光培养的光源为 40W日光灯。
2　结果
2. 1　愈伤组织的诱导　白羊草的幼穗接种
在附加有 2, 4-D 1. 0 mg /L,水解酪蛋白 500
或 1 000 mg /L的 N6或 MS培养基中 ,暗光
培养 1周时 ,外植体开始膨大 , 2周时形成约
0. 5 cm2的愈伤组织块。 在接种的 500个幼
穗外植体的培养基中 ,形成愈伤组织的 420
块 ,愈伤组织发生率为 84% 。培养 3周的幼
穗外植体形成旺盛生长的肉黄色松软愈伤组
织。
2. 2　愈伤组织的诱导分化　在附加有 NAA
0. 5 mg /L、 K T 1. 0 mg /L的 MS培养基上 ,
或者在附加有 KT 1. 0 mg /L、 IAA 0. 4 mg /L、
BA 1. 0 mg /L的 N6培养基上 , 2～ 4周后 ,均
可得到生长旺盛的健全分化苗。 将此分化苗
移入不含激素的 N6培养基中 ,光培养 2～ 4
周后 ,即可形成绿色的健壮分化植株 ,经拣苗
后移栽到土壤之中 ,植株生长良好。
3　讨论
3. 1　关于培养基　白羊草幼穗的愈伤组织
15卷　 6期
Vo l. 15, No. 6
草　业　科　学
PRATACU LTURAL SCIENCE
　　 19
12 /1998
⒇作者简介:时永杰 ,男 , 1961年 11月生 , 1982年 8月毕业于西北农业大学农学系 ,副研究员。收稿日期: 1998- 02- 16
诱导及其分化 ,在 N6和 MS培养基中都表现
很好。根据在实验中观察到的结果 ,在愈伤组
织的诱导过程中 ,激素水平及其他附加成分
都相同时 ,两种培养基诱导愈伤组织的效果
都很理想 ,既使在分化培养基中激素成分和
水平不同时 ,二者均能分化出较好的分化植
株。所以 , N6和 M S培养基都是白羊草幼穗
理想的培养基〔2〕。
3. 2　关于 2, 4-D和蔗糖的浓度　本试验中
2, 4-D和蔗糖的浓度均较低 ,前者为 1. 0
mg /L,后者为 3. 0% ,这与某些报导资料有
所不同〔 3〕。但从培养结果来看 , 2, 4-D在 1. 0
mg /L的浓度下 ,白羊草幼穗能形成较好的
愈伤组织 ,且愈伤组织的发生率在 80%以
上 ,过高和过低的 2, 4-D的浓度不利于白羊
草的愈伤组织形成 ,足以说明此浓度是可以
信赖的。关于蔗糖浓度 ,一般的禾本科牧草组
织培养中要比 3. 0%高一些 ,而本试验从开
始诱导愈伤组织产生到分化形成再生植株 ,
均为 3. 0% ,培养效果很好。至于分化频率较
低 ,这在禾本科植物的组织培养中是普遍存
在的现象 ,多次试验结果表明并非因蔗糖浓
度较低所致〔 4〕。
参考文献
1　吴仁润 ,卢欣石 . 中国热带亚热带牧草种质资源 .
北京:中国科学技术出版社 , 1992, 81～ 82
2　王丽 ,邹明谦 . 大赖草的组织培养及植株再生的
研究 . 草业科学 , 1995, ( 6): 42～ 44
3　时永杰 ,周丽霞 . 禾本科牧草的组织培养 . 草与
畜杂志 , 1989,增刊: 304～ 306
4　周荣仁 . 利用组织培养研究植物耐盐机理与筛
选耐盐突变体的进展 . 植物生理学通讯 , 1989,
( 5): 27～ 29
TISSUE CULTURE OF YOUNG SPIKELETS OFBOTHRIOCHLOA ISCHAEMUM
Shi Yong jie　 Sun Xiaoping　 Liu Xiaoqiang
( Lanzhou Insti tute of Animal Science and Veterina ry medicine, CAAS, Lanzhou 730050)
ABSTRACT
Cultured in darkness and under the temperature condi tion o f 25± 1℃ for 2 w eeks, the
young spikelet of Bothriochloa ischaemum , laid on N6 o r M S medium containing 2, 4-D ( 1. 0
mg /L ) and CH ( 500 or 1 000 mg /L) , produced callus of 0. 5 cm
2
in size and wi th a rate o f oc-
currence as high as 84% . The cal lus became w ell grow n in one w eek and then it was cultured
into vig orous shoo ts in 2～ 4 mo re w eeks on a new medium of M S+ N AA ( 0. 5 mg /L)+ KT
( 1. 0 mg /L) o r N6+ KT ( 1. 0 mg /L )+ IAA ( 0. 4 mg /L)+ BA ( 1. 0 mg /L ) . The formed
shoots w ere then transferred onto a medium of N6 w ithout hormones, and, under light , they
developed into g reen plants in 3～ 4 w eeks. The plants w ere successfully t ransplanted into
soil and g rew well.
Key words: Bothriochloa ischaemum , tissue cul ture
20　　　　　　　　　　　　　　　　　　　草　业　科　学　　　　　　　　　　　　　　　　 12 /1998