全 文 ：河北农业科学 , 2011, 15 (3):82-85
JournalofHebeiAgriculturalSciences
编辑 索相敏
花蔺无性系建立的研究
李 响 , 王剑华 , 李 鑫 , 徐 娜 , 姜长阳＊ (辽宁师范大学生命科学学院 , 辽宁 大连 116029)
摘要:以花蔺根茎为材料 , 进行了愈伤组织的诱导和继代 、 不定芽分化 、 试管苗生根 、 移栽定植的研究 , 建立
起根茎无性系。结果表明:根茎愈伤组织诱导培养和继代培养的理想培养基是 MS+BA0.5mg/L+2，4-D
2.0mg/L;愈伤组织颗粒团分化培养的理想培养基是 MS+BA0.5 ～ 1.0mg/L+NAA0.1mg/L;试管苗生根培养
的理想培养基是 1/2MS+NAA0.1mg/L+IAA0.2mg/L。试管苗定植容易成活 , 且长势旺盛 , 并保持了野生植
株的所有生物性状。
关键词:花蔺;愈伤组织;无性系;快速繁殖
中图分类号:S604 文献标识码:A 文章编号:1008-1631 (2011)03-0082-04
EstablishmentofRegenerationCloneandRapidPropagationofBotentilaanserrina
LIXiang, WANGJian-hua, LIXin, XUNa, JIANGChang-yang＊
(ColegeofLifeSciencesLiaoningNormalUniversity, Dalian 116029, China)
Abstract:UsingtherhizomeofButomusumbelatusasmaterial, theclonewasestablishedincludingthecalusinduction
andsubculture, adventitiousbuddiferentiation, shootrooting, transplantingandfieldplanting.Theresultsshowedthat
thebestmediumforcalusinductionandsubculturewasMS+BA0.5 mg/L+2，4-D2.0 mg/L.Thebestmediumfor
calusgraindiferentiationwasMS+BA0.5-1.0 mg/L+NAA0.1mg/L.Thebestmediaforrootingwas1/2 MS+NAA
0.1 mg/L + IAA 0.2 mg/L.Thestableplantedseedlingssurvivedeasily, grewwelandretainedalbiological
characteristicsofthewildness.
Keywords:Butomusumbelatus;Calus;Clone;Rapidpropagation
收稿日期: 2011-02-14
基金项目:辽宁省高等教育教学改革资助项目 (20090304);辽宁师
范大学教学改革资助项目 (LSJG:20090108)
作者简介:李 响 (1989-), 女 , 辽宁沈阳人 , 本科在读 , 从事植
物组织培养研究。
通讯作者:姜长阳 (1953-), 男 , 辽宁大连人 , 教授 , 从事植物技
术研究。 E-mail:changyangjiang@126.com。
花蔺 (Butomusumbelatus)又称猪尾巴菜 、 蒲子
莲 , 属于花蔺科花蔺属多年水生草本植物 [ 1] , 生长于低
洼地和沿河地区 , 在我国黑龙江 、 吉林 、 新疆 、 华北地
区 、 陕西以及辽宁的沈阳 、 铁岭 、 康平 、 法库和瓦房店
等地均有分布。花蔺的根茎含淀粉 , 可用来酿酒 [ 2] 。近
年来在辽宁南部地区的人们发现 , 春天花蔺地下越冬的
根茎鲜食甜度与甘蔗相差无几。于是 , 人们就在春天将
花蔺的根茎挖出直接作为鲜饲料 , 或者是粉碎后添加到
精饲料中 , 猪很喜食 , 而且还节省了精饲料。因此 , 每
年春天人们都会大量地采挖花蔺粗壮的根茎作为猪饲
料。在野生条件下 , 花蔺能形成的种子很少 , 由于花蔺
主要依赖于横走根茎进行繁殖 , 繁殖的速度很慢 , 这使
得野生的花蔺分布和数量都较少。而近年来人们大量采
挖根茎 , 使本来就稀少的野生花蔺数量迅速减少。如
今 , 在辽宁的瓦房店地区 , 野生的花蔺已经几近绝迹。
目前虽多有水生植物组织培养研究的报道 [ 3 ～ 9] , 但迄今
未见到有关花蔺科植物组织培养及无性系建立的研究报
道。为了保护这种野生水生植物 , 我们对花蔺进行了组
织培养及无性系的研究 , 旨为相关科学研究提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验对象为花蔺根茎。
1.2 试验方法
1.2.1 材料处理 2007年 3月中旬在辽宁瓦房店地区
低洼地 , 挖取休眠的花蔺根茎 , 除掉附着的杂物 , 洗净
后放到 500mL的磨口广口瓶中 , 进行灭菌处理。具体
灭菌方法参见郑纯凤等 [ 10]鹅绒委陵菜的研究方法 , 培
养条件参见胡芷维等 [ 11]刺儿菜的研究。
1.2.2 培养基种类对诱导根茎愈伤组织的影响 将无
菌花蔺根茎切成长 0.3 ～ 0.4cm的段 , 接种到 MS+BA
0.5mg/L为基本培养基 、 附加不同浓度生长素的培养基
上 (表 1), 分别进行根茎愈伤组织诱导的暗培养和光
培养 (光照强度 3 000lux, 每日光照 12h)。每种培养
基接种培养 100个根茎段 , 重复 2次。接种培养 50d
时 , 观察愈伤组织的色泽与形态 , 并统计愈伤组织的诱
导率。
1.2.3 根茎愈伤组织的继代增殖培养 把以上由根茎
诱导的愈伤组织切割成 0.2 ～ 0.3cm的块状 , 接种到
MS+BA0.5mg/L+2，4-D2.0mg/L培养基上。在光照
DOI :10.16318/j.cnki.hbnykx.2011.03.044
第 3期 李 响等:花蔺无性系建立的研究
下 (光照强度 3000lux, 每日光照 12h)进行愈伤组织
的继代扩增培养。继代培养 6次 , 每种培养基接种培养
400块愈伤组织 , 重复 2次。接种培养 45d时 , 观察继
代愈伤组织的整体形状 、 表面形态和色泽 , 并统计颗粒
增殖数。
表 1 诱导根茎愈伤组织的培养基种类Table1 Themediumforthecallusinduction
编号 培养基组分
1 MS+BA0.5mg/L+2，4-D1.0mg/L
2 MS+BA0.5mg/L+2，4-D1.5mg/L
3 MS+BA0.5mg/L+2，4-D2.0mg/L
4 MS+BA0.5mg/L+IBA1.0mg/L
5 MS+BA0.5mg/L+IBA1.5mg/L
6 MS+BA0.5mg/L+IBA2.0mg/L
7 MS+BA0.5mg/L+IAA 1.0mg/L
8 MS+BA0.5mg/L+IAA 1.5mg/L
9 MS+BA0.5mg/L+IAA 2.0mg/L
10 White+BA 0.5mg/L+2，4-D 1.0mg/L
11 White+BA 0.5mg/L+2，4-D 1.5mg/L
12 White+BA 0.5mg/L+2，4-D 2.0mg/L
13 White+BA 0.5mg/L+IBA 1.0mg/L
14 White+BA 0.5mg/L+IBA 1.5mg/L
15 White+BA 0.5mg/L+IBA 2.0mg/L
16 White+BA 0.5mg/L+IAA1.0mg/L
17 White+BA 0.5mg/L+IAA1.5mg/L
18 White+BA 0.5mg/L+IAA2.0mg/L
1.2.4 激素浓度对愈伤组织分化培养的影响 把以上
继代培养的颗粒状愈伤组织分散成由 3 ～ 4个颗粒组成
的颗粒团后 , 接种到以 MS为基本培养基 、 附加不同浓
度植物激素的培养基上 (表 2), 进行愈伤组织的分化
培养。每种处理接种培养 100个颗粒团 , 重复 3次。从
接种培养 10d时开始 , 不定期地观察分化不定芽的长
势。接种培养 40d时 , 详细观察不定芽的长势 , 并统计
愈伤组织的分化率。
表 2 不同浓度的植物激素培养基Table2 Themediumswithdifferentconcentrationsofphytohormone
编号 培养基组分
1 CK1 (不加任何激素的 MS培养基)
2 MS+BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L
3 MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L
4 MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L
5 MS+BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L
6 MS+BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L
7 MS+BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L
8 MS+BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L
9 MS+BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L
10 MS+BA0.1mg/L+IAA 0.1mg/L
11 MS+BA0.5mg/L+IAA 0.1mg/L
12 MS+BA1.0mg/L+IAA 0.1mg/L
13 MS+BA1.5mg/L+IAA 0.1mg/L
14 MS+BA0.1mg/L+IAA 0.5mg/L
15 MS+BA0.5mg/L+IAA 0.5mg/L
16 MS+BA1.0mg/L+IAA 0.5mg/L
17 MS+BA1.5mg/L+IAA 0.5mg/L
1.2.5 生长素浓度对不定芽生根培养的影响 把以上
分化的不定芽基部周围的愈伤组织除掉后 , 接种到以
1/2 MS+NAA0.1mg/L为基本培养基 、 附加不同浓度
生长素的液体培养基上 (表 3), 在光照下 (光照强度
3 000lux, 每日光照 12h)进行不定芽的生根培养。每
种处理接种培养 100个不定芽 , 重复 3次。从接种培养
15d时开始 , 不定期地观察根色和试管苗的长势 , 并统
计根数。接种培养 40d时 , 详细观察试管苗的长势 , 并
统计生根率和平均生根数。
表 3 不同浓度的生长素液体培养基Table3 Theliquidmediumswithdifferentconcentrationsofauxin
编号 培养基组分
1 CK2 (不加任何生长素的 MS培养基)
2 1/2MS+NAA0.1mg/L+IAA 0.2mg/L
3 1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA0.2mg/L
4 1/2MS+NAA0.1mg/L+2，4-D0.2mg/L
5 1/2MS+NAA0.1mg/L+IAA 0.6mg/L
6 1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA0.6mg/L
7 1/2MS+NAA0.1mg/L+2，4-D0.6mg/L
1.2.6 试管苗的移栽与定植 把培养 30d的生根试管
苗和培养 50d生长着根茎的试管苗 , 从培养瓶中取出
后 , 直接移栽到温室苗床 (上面有约 1cm深的水层)
上的营养钵中。移栽后前 10d要进行遮光处理 , 以避免
直射光照。每次移栽 600株试管苗 , 重复 2次。移栽后
30d, 调查移栽成活率。
对温室中带有移栽成活试管苗的营养钵断水 2 ～
3d, 于 5月上旬把试管苗定植到水库边上。每次定植
500株试管苗 , 重复 2次。定植后 30d调查定植成活
率 , 并对定植苗的生长情况 、 生物性状进行观察。翌年
春天 , 调查试管苗单株根茎的收获量。
2 结果与分析
2.1 培养基种类对根茎诱导愈伤组织的影响
由表 4可以看出 , 不同浓度的生长素对根茎段愈伤
组织的诱导作用效果不同。在附加不同浓度 2，4-D的培
养基上均能诱导根茎段形成愈伤组织 , 其中在附加浓度
为 2.0mg/L的 2，4-D培养基上愈伤组织的培养诱导效
果最好 , 并且在无光培养条件下诱导效果好于光照培养
的效果。在附加不同浓度 IBA的培养基上均不能诱导根
茎段形成愈伤组织;在附加不同浓度 IAA的培养基上也
基本不能诱导根茎段形成愈伤组织。在无光培养的条件
下 , 附加浓度为 2.0mg/L的 2，4-D培养基上 , 不仅愈
伤组织培养诱导率达到了 87%, 而且外观上愈伤组织
长势好。在无光的 条件下培养 50d, 附加浓度为
2.0mg/L的 2，4-D培养基上诱导生长的愈伤组织表面有
淡黄色 、 界限不太明显的颗粒状 , 颗粒大小为 0.2 ～
0.6cm(一般认为 , 这样的愈伤组织为具有分化能力的
愈伤组织)。表明在无光培养的条件下 , 花蔺根茎愈伤
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河北农业科学 2011年
组织诱导培养的理想培养基是 MS+BA0.5mg/L+2，4-
D2.0mg/L。
表 4 不同培养基种类对根茎愈伤组织诱导的影响Table4 Theefectsofdifferentmediaonthecallusinductionofrhizome
培养基种类 愈伤组织诱导率(%) 愈伤组织长势
MS+BA0.5mg/L+2，4-D1.0mg/L 67/43 ++/+
MS+BA0.5mg/L+2，4-D1.5mg/L 74/46 ++/+
MS+BA0.5mg/L+2，4-D2.0mg/L 87/71 ++/+
MS+BA0.5mg/L+IBA1.0mg/L 0/0 -/-
MS+BA0.5mg/L+IBA1.5mg/L 0/0 -/-
MS+BA0.5mg/L+IBA2.0mg/L 0/0 -/-
MS+BA0.5mg/L+IAA 1.0mg/L 8/0 +/-
MS+BA0.5mg/L+IAA 1.5mg/L 7/2 +/+
MS+BA0.5mg/L+IAA 2.0mg/L 13/0 +/-
White+BA 0.5mg/L+2，4-D 1.0mg/L 12/0 +/-
White+BA 0.5mg/L+2，4-D 1.5mg/L 34/0 +/-
White+BA 0.5mg/L+2，4-D 2.0mg/L 56/0 +/-
White+BA 0.5mg/L+IBA 1.0mg/L /0 -/-
White+BA 0.5mg/L+IBA 1.5mg/L /0 -/-
White+BA 0.5mg/L+IBA 2.0mg/L /0 -/-
White+BA 0.5mg/L+IAA1.0mg/L /0 -/-
White+BA 0.5mg/L+IAA1.5mg/L /0 -/-
White+BA 0.5mg/L+IAA2.0mg/L /0 -/-
＊表中 “ /” 前的数据为暗培养 , “ /” 后的数据为光培养;“ +
+” 为长势好 , “ +” 为长势一般 , “ -” 为不生长。下表同。
2.2 根茎愈伤组织的继代增殖培养
试验结果表明 , 继代扩增培养的愈伤组织块能
100%地增殖生长。 1块愈伤组织在 1个培养周期中能由
0.2 ～ 0.3cm的块状组织生长成直径为 0.9 ～ 2.1cm的
球状愈伤组织。球状的愈伤组织表面布满了界限明显 、
直径为 0.2cm的愈伤组织颗粒 , 2次重复试验的结果基
本一致。从第 2次继代培养愈伤组织到第 6次继代培
养 , 每次继代培养 1个愈伤组织颗粒平均能生长增殖出
26.4个愈伤组织颗粒。同时 , 接种后伴随着愈伤组织
的的生长 , 淡黄色的愈伤组织逐渐变绿 , 培养到 20d左
右时 , 就变成了嫩绿色 , 并且由不太明显颗粒状变成了
明显的颗粒状。表明花蔺根茎愈伤组织继代培养的理想
培养基是 MS+BA0.5mg/L+2，4-D2.0mg/L。
2.3 激素浓度对愈伤组织分化培养的影响
由表 5可以看出 , 在不加激素 (CK1)以及不同浓
度的 BA与不同浓度的 IAA配合使用时 , 培养的愈伤组
织颗粒团均不能分化;不同浓度的 BA与不同浓度的
NAA配 合 使 用 时 , 除 MS+BA 0.1mg/L+NAA
0.5mg/L培养基外 , 其他培养的愈伤组织颗粒团均能分
化。其中在 BA浓度为 0.5mg/L和 1.0mg/L与 NAA的
浓度为 0.1mg/L配合使用时 , 所培养的愈伤组织颗粒
团分化率分别达到了 93%和 96%, 而且分化芽长势较
好。在这 2种培养基上 , 培养 10d左右时在颗粒团中间
的颗粒上出现不定芽点 , 随后不定芽点迅速增加 , 并在
不定芽点的周围生长出叶片。培养到 40d时 , 在 1个不
定芽点周围会生长 4 ～ 8个长 0.9 ～ 2.5cm的绿色的披针
形叶片 , 使其形成不定芽。在有的不定芽基部还会生长
出 1 ～ 2条根 , 绝大多数不定芽的基部周围生长着绿色
的愈伤组织。表明花蔺愈伤组织颗粒团分化培养的理想
培养基是 MS+BA0.5 ～ 1.0mg/L+NAA0.1mg/L。
表 5 不同浓度激素对颗粒团分化的影响Table5 Theeffectsofdifferentconcentrationsofhormonesonthedifferentiationofcalus
培养基种类 愈伤组织分化率(%) 分化芽长势
CK1 0 -
MS+BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L 6 ++
MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L 93 ++
MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L 96 ++
MS+BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L 60 +
MS+BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L 0 -
MS+BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L 26 +
MS+BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L 37 +
MS+BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L 23 +
MS+BA0.1mg/L+IAA 0.1mg/L 0 -
MS+BA0.5mg/L+IAA 0.1mg/L 0 -
MS+BA1.0mg/L+IAA 0.1mg/L 0 -
MS+BA1.5mg/L+IAA 0.1mg/L 0 -
MS+BA0.1mg/L+IAA 0.5mg/L 0 -
MS+BA0.5mg/L+IAA 0.5mg/L 0 -
MS+BA1.0mg/L+IAA 0.5mg/L 0 -
MS+BA1.5mg/L+IAA 0.5mg/L 0 -
2.4 生长素浓度对不定芽生根培养的影响
由表 6可以看出 , 在不加生长素 (CK2)以及附加
不同浓度 IBA和 2，4-D的培养基上 , 生根培养的不定芽
不能生根;在附加不同浓度 IAA的培养基上 , 培养的不
定芽均能生根形成试管苗。其中 , 在附加浓度为
0.2mg/L的 IAA培养基上不定芽生根率为 94%, 每株
试管苗平均生根 6.1条 , 并且培养的试管苗长势好。观
察中发现 , 在附加浓度为 0.2mg/L的 IAA培养基上培
养到 15d时 , 绝大多数培养的不定芽能生长出 2 ～ 4条
根。将培养生长 30d的试管苗继续培养到 50d时 , 试
管苗根部生长出长 0.5 ～ 1.2cm的根茎。根形成的初期
为白色 , 后期为绿色 , 说明在这种液体培养基中培养生
长的根还能进行光合作用。表明花蔺试管苗生根培养的
理想培养基是 1/2 MS+NAA0.1mg/L+IAA0.2mg/L。
表 6 不同浓度生长素对不定芽生根培养的影响Table6 Theeffectsofdifferentconcentrationsofauxinsonrootingofadventitiousbuds
培养基种类 生根率(%)平均生根数(条 /株) 试管苗长势
CK2 0 0 -
1/2 MS+NAA0.1mg/L+IAA 0.2mg/L 94 6.1 ++
1/2 MS+NAA0.1mg/L+IBA0.2mg/L 0 0 -
1/2 MS+NAA0.1mg/L+2，4-D0.2mg/L 0 0 -
1/2 MS+NAA0.1mg/L+IAA 0.6mg/L 68 2.1 +
1/2 MS+NAA0.1mg/L+IBA0.6mg/L 0 0 -
1/2 MS+NAA0.1mg/L+2，4-D0.6mg/L 0 0 -
2.5 试管苗的移栽与定植
·84·
第 3期 李 响等:花蔺无性系建立的研究
移栽后 30d移栽成活率为 99%。表明这种试管苗
很容易移栽成活。移栽成活后的试管苗除了生长缓慢
外 , 外观上与移植前变化不大。
定植后 30d定植平均成活率为 99.5%。表明定植
后未出现缓苗现象。定植前期生长缓慢 , 40d左右开始
快速生长。与野生的花蔺相比 , 定植的试管苗明显具有
生长旺盛 、 群体整齐 、 秋末枯萎晚 5 ～ 9d的特点 , 并保
持了野生花蔺的所有生物性状。翌年春天试管苗平均单
株根茎的收获量比野生植株增加 21%。
3 结论与讨论
在本研究的愈伤组织继代培养中 , 经过 45d的培
养 , 1个愈伤组织颗粒平均能分化出 26.4个愈伤组织颗
粒。而在分化培养中 , 由 3 ～ 4个愈伤组织颗粒组成的
颗粒团能分化出 1个不定芽。也就是说 , 按照由 4个愈
伤组织颗粒组成的颗粒团分化出 1个不定芽计算 , 通过
愈伤组织的继代培养 , 年增殖 6.68.1 (约为 350万)个
不定芽。这说明本研究中 , 通过愈伤组织继代培养的方
法繁殖速度快 , 不仅能够保证花蔺保护研究工作对种苗
的需要 , 也能满足人们为收获花蔺根茎栽培时对种苗的
需求。
一般认为通过组织培养的方法所获得的试管苗移栽
成活率较低 [ 12 ～ 14] , 但在本研究中 , 试管苗移栽的成活
率很高 , 容易移栽成活。产生这种现象有以下 3个原
因:(1)花蔺是 1种水生植物 , 其自身的遗传性使其能
适应移栽的水环境。 (2)花蔺试管苗的生根培养是在
液体培养基中完成的 , 这种液体培养环境与移栽后的水
环境在通气性 、 压力等环境条件基本一致。移栽前后基
本相同的环境不会对试管苗造成较大的伤害 , 使其容易
成活。 (3)试管苗不易移栽成活主要是因为根系吸收
力差 , 导致试管苗营养不足和缺氧引起的 , 而花蔺的试
管苗在培养过程中形成绿色的根系 , 这种绿色的根不仅
能进行光合作用合成自身所需的营养 , 而且还能产生本
身呼吸所需的部分氧气 , 同时其吸收力也较强 , 能提供
更多的营养。
参考文献:
[ 1] 中国科学院植物志编辑委员会 .中国植物志 (第 56卷)
[ M] .北京:科学出版社 , 1978:147.
[ 2] 李书心 .辽宁植物志 (下册) [ M] .沈阳:辽宁科学技
术出版社 , 1991:644-645.
[ 3] 许文一 , 高 洋 , 马依妮 , 孙慧超 , 姜长阳 .水芹的组
织培养及快速繁殖研究 [ J] .安徽农业科学 , 2008, 36
(14):5761-5762.
[ 4] 王丽卿 , 季高华, 周胜耀 , 李 燕 .四种观赏水草的组织
培养试验 [ J] .水产科技情报 , 2006, 33 (2):84-86.
[ 5] 吴丽爽 , 王晓萍 .水生观赏植物组织培养研究进展 [ J] .
黑龙江农业科学 , 2005, (5):25-28.
[ 6] 孙月芳 , 陆瑞菊 , 周润梅 , 王亦菲 .观赏水草的立体培
养 [ J] .上海农业学报 , 2004, 20 (2):17-19.
[ 7] 孙玉刚 , 吴丽爽 , 王晓萍 .两种观赏水草的离体培养
[ J] .中国农学通报 , 2009, (5):195-199.
[ 8] 高 颖 .观赏水草大青叶的组织培养 [ J] .植物生理学
通讯 , 2000, 36 (8):30.
[ 9] 黄伟如 , 谢映忠 , 梁张慧 , 刘绍钦 , 叶伟忠 .热带观赏
水草———红玫瑰的组织培养与快速繁殖 [ J] .植物生理
学通讯 , 2000, 41 (2):332.
[ 10] 郑纯凤 , 丁 莲 , 方 晨 , 佟少明 , 姜长阳 .鹅绒委凌
菜组织培养及快速繁殖的研究 [ J] .河北农业科学 ,
2008, 12 (12):569-572.
[ 11] 胡芷维 , 唐瑞琪 , 王 艇 , 徐 娜 , 姜长阳 .刺儿菜无性
系建立的研究 [ J] .广东农业科学 , 2009, (5):58-61.
[ 12] 安利佳 , 姜长阳 .植物组织培养导论 [ M] .大连:辽
宁师范大学出版社 , 1996:130-131.
[ 13] 丰 峰 .栽培与生产提高试管苗移栽成活率的技术
[ J] .中国花木盆景 , 2001, (7):18-19.
[ 14] 王 鹏 , 土建民 , 王占华 , 吴 红.提高组培苗移栽成活
率的技术方法 [ J] .中国林副特产 , 2004, (4):21-22.
(上接第 81页)
参考文献:
[ 1] 雷 春 , 陈劲峰 , 钱春桃 , 张永兵 , 宋 慧 .辐射花粉
授粉和胚培养诱导产生黄瓜单倍体植株 [ J] .西北植物
学报 , 2004, 24 (9):1739-1743.
[ 2] 杜胜利 , 韩毅科 .黄瓜倍性鉴定方法的研究 [ J] .园艺
学报 , 2002, 29 (3):280-281.
[ 3] 李好琢 , 张志宏 .植物单倍体植株的倍性鉴定 [ J] .北
方园艺 , 2007, (1):49-51.
[ 4] AshokKunmarHG, MurthyHN, PackKY.Embryogenesis
andplantregenerationfromanthercultureofCucumissativus
L.[ J] .ScientiaHoticulture, 2003, 98:213-222.
[ 5] 谢 淼 , 秦丽颖 , 潘俊松 , 何欢乐 , 吴爱忠 , 蔡 润 .
黄瓜花器形态发生 、 小孢子发育与花药培养 [ J] .西北
植物学报 , 2005, 25 (6):1096-1100.
[ 6] 韩毅科 , 杜胜利 , 王 鸣 .黄瓜染色体制片及倍性研究
[ J] .华北农学报 , 2003, 18 (1):72-74.
[ 7] StacyA.PloidyDeterminationinAgrostisUsingFlowcytome-
tryandMorphologicalTraits[ J] .CropScience, 2002, 42:
192-196.
[ 8] 郭永强 , 王建设 .西葫芦胚囊再生植株倍性鉴定方法研
究 [ J] .华北农学报 , 2004, 19 (3):80-83.
[ 9] 杜胜利 , 魏惠军 .通过辐射花粉诱导获得黄瓜单倍体植
株 [ J] .中国农业科学 , 1999, 32 (2):107.
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