全 文 ：·１１２　 · 中国医院用药评价与分析　２０１６年第１６卷第０１期　　　Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｄｒｕｇ－ｕｓｅ　ｉｎ　ｈｏｓｐｉｔａｌｓ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ　２０１６Ｖｏｌ．１６Ｎｏ．０１
ＨＰＬＣ法测定祛风止痛片中蛇床子素和二
氢欧芹醇当归酸酯
赵向阳（宿州市食品药品检验所，安徽 宿州 　２３４０００）
中图分类号　Ｒ４５３　　　　文献标识码Ａ　　　　文章编号　１６７２－２１２４（２０１６）０１－０１１２－０２
ＤＯＩ　
摘　要　目的：建立用高效液相色谱法测定祛风止痛片中蛇床子素和二氢欧芹醇当归酸酯的方法。方法：色谱柱：Ａｇｉｌｅｎｔ–Ｃ１８（４．６ｍｍ×
１５０ｍｍ，５μｍ）流动相：乙腈－水（５１∶４９）；流速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ
－１，检测波长：３３０ｎｍ，柱温：２５℃，进样量：１０μＬ。结果：蛇床子素和二氢欧芹
醇当归酸酯的线性范围为０．８１２８～４．０６４μｇ和０．７６９６～３．８４８μｇ，平均加样回收率（ｎ＝６）分别为９９．６６％和９９．１４％。结论：本法条件简单，
易于操作，能同时定量测定２种成分。
关键词　祛风止痛片；蛇床子素；二氢欧芹醇当归酸酯；ＨＰＬＣ
　　祛风止痛片处方是由老鹳草、槲寄生、续断、威灵仙、独活、制草
乌、红花等七味中药制成，具有祛风寒、补肝肾、壮筋骨的功能，主要
用于风寒祛湿闭阻、肝肾亏虚所致的痹病，症见关节炎肿胀、腰膝酸
软、四肢麻木。该处方中的独活是本方的主要药物，有祛风除湿、通
痹止痛的作用，其主要活性成分为蛇床子素和二氢欧芹醇当归酸
酯［１］。本实验采用 ＨＰＬＣ法同时测定祛风止痛片中蛇床子素和二
氢欧芹醇当归酸酯。实验表明：本法条件简单，易于操作，专属性
强，重复性好，可同时定量测定２种成分。
１　仪器与试药
１．１　仪器仪器　Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０高效液相色谱仪，ＤＡＤ检测器；安捷伦
色谱工作站；Ａｇｉｌｅｎｔ　Ｃ１８（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５ｕｍ），赛多利斯ＢＰ２１１Ｄ
型电子天平。
１．２　试药　对照品为中检院。乙腈为色谱纯；其他试剂均为分析
纯。３批祛风止痛片及其阴性样品为安徽雪枫药业有限公司提供。
２　方法与结果
２．１　色谱条件　色谱柱：安捷伦Ｃ１８（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５ｕｍ）流动
相：乙腈－水（５２∶４８）；流速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长：３３０ｎｍ，进
样量：１０μＬ。该色谱条件下，蛇床子素和二氢欧芹醇当归酸酯保留
时间分别为１２．６ｍｉｎ和１６．８ｍｉｎ，蛇床子素和二氢欧芹醇当归酸酯之
间以及与其它相邻杂质峰的分离度均符合要求（Ｒ﹥１．５），理论板
数按二氢欧芹醇当归酸酯计算不少于６０００。
２．２　对照品溶液的制备 取蛇床子素对照品、二氢欧芹醇当归酸酯
对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每１ｍＬ各含１５０μｇ、５０μｇ的
溶液，即得。
２．３　供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约０．５ｇ，置具塞锥
形瓶中，加甲醇２０ｍＬ，密塞，超声处理（功率１５０Ｗ，频率４０ｋｈｚ）２５
分钟，放冷，滤过，滤液置５０ｍＬ容量瓶中，用少量甲醇洗涤容器及
残渣，洗液并入同一容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
２．４　阴性溶液　取缺少独活的样品，按照２．３方法制成阴性对照
溶液。
２．５　阴性测定　分别取对照品、供试品和阴性溶液各１０μＬ，依上述
色谱条件测定，结果显示阴性无干扰，见图１。
２．６　线性关系的考察　精密量取２．２项下的对照品溶液１．０ｍｌ，２．
０ｍｌ，４．０ｍｌ，６．０ｍｌ，８．０ｍｌ，１０．０ｍｌ置１０ｍｌ量瓶中，加甲醇至刻度，摇
匀，分别精密吸取１０ｕｌ，以峰面积积分值为纵坐标（Ｙ），对照品质量
浓度（μｇ／ｍＬ）为横坐标（Ｘ），求得回归方程：蛇床子素 Ｙ＝１２２６０６Ｘ
＋６０４９．３，ｒ＝０．９９９７；二氢欧芹醇当归酸酯 Ｙ＝１２８９０３Ｘ＋１６２０．５，
ｒ＝０．９９９６；结果表明蛇床子素在０．８１２８μｇ～４．０６４μｇ，二氢欧芹醇
当归酸酯在０．７６９６μｇ～３．８４８μｇ范围内线性关系良好。
２．７　稳定性试验　取同一批号样品（批号：２０１４０１０５）的供试品溶
液，在０，２，４，６，８，１２ｈ进样分析，每次１０μＬ。结果表明１２ｈ内稳定，
蛇床子素和二氢欧芹醇当归酸酯的ＲＳＤ分别为０．８８％和１．０２％。
２．８　精密度试验　分别取蛇床子素和二氢欧芹醇当归酸酯对照品
溶液１０μＬ，连续进样６次，测定峰面积，结果蛇床子素的 ＲＳＤ为０．
３２％，二氢欧芹醇当归酸酯的ＲＳＤ为０．９２％。精密度符合要求。
Ａ
Ｂ
Ｃ
图１　对照品（Ａ）、供试品（Ｂ）和阴性供试品（Ｃ）的 ＨＰＬＣ色谱图
１．蛇床子素　２．二氢欧芹醇当归酸酯
表１　回收率测定结果（ｎ＝６）
成分
供试品
量／ｍｇ
加入对照
品量／ｍｇ
总测得
量／ｍｇ
回收
率／％
平均回
收率／％
ＲＳＤ
／％
蛇床子素 １．９８２１　 ２．００２３　 ３．９８０６　 ９９．８１　 ９９．６６　９９．１４
１．９８２１　 １．９８１５　 ３．９６０７　 ９９．８５
１．９８２１　 １．９９２３　 ３．９６０４　 ９９．３０
１．９８２１　 １．９０２８　 ３．８８０２　 ９９．７５
１．９８２１　 ２．０１１４　 ３．９８６８　 ９９．６７
１．９８２１　 ２．０１４２　 ３．９８７６　 ９９．５７
二氢 １．７４４２　 １．７５２３　 ３．４８０８　 ９９．１０　 ０．１５　 ０．２４
１．７４４２　 １．７７４９　 ３．４９０６　 ９８．３９
１．７４４２　 １．７４６３　 ３．４７７２　 ９９．２４
１．７４４２　 １．７３９８　 ３．４７２４　 ９９．３３
１．７４４２　 １．７４４５　 ３．４７４８　 ９９．２０
１．７４４２　 １．７４２４　 ３．４７８６　 ９９．５４
10.14009/j.issn.1672-2124.2016.s1.087
中国医院用药评价与分析　２０１６年第１６卷第０１期　　　Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｄｒｕｇ－ｕｓｅ　ｉｎ　ｈｏｓｐｉｔａｌｓ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ　２０１６Ｖｏｌ．１６Ｎｏ．０１　 ·１１３　 ·
２．９　重复性试验　取样品（批号２０１４０１０５），按２．３项下的方法平行
制备６份并测定，结果蛇床子素和二氢欧芹醇当归酸酯的ＲＳＤ分别
为０．７７％和１．２１％。
２．１０　回收率试验　取已知蛇床子素和二氢欧芹醇当归酸酯量的
样品（批号２０１４０１０５）１０ｍＬ，共６份，各精密加入对照品适量，依法
测定并计算回收率，结果见表１。
２．１１　样品测定　取样品，按２．３项下制备供试品溶液，每个批号平
行制备３份，测定，记录色谱图，按外标法计算３批样品含量，结果
见表２：
３　讨论
蛇床子素在３３０ｎｍ波长处有最大吸收，此波长处，二氢欧芹醇
当归酸酯能够满足要求，故选用检测波长为３３０ｎｍ。实验结果显示
本法专属性好，提取方法简单，能够有效地控制产品质量。
参考文献
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中国医药科技出版社，２０１０∶６３．
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－５７
表２　样品的测定结果（ｎ＝３）
批号 二氢含量（ｍｇ·ｍＬ－１） 蛇床子素含量（ｍｇ·ｍＬ－１）
２０１４０１０５　 ０．０８１　 ０．０７７
２０１４０３０２　 ０．０８３　 ０．０７５
２０１４０３０３　 ０．０８４　 ０．０７５
（上接第１１１页）氟喹诺酮类药物相比，其对革兰阳性菌、革兰阴性
菌以及厌氧菌的抗菌活性都非常强，且该药物口服后吸收迅速、完
全，首关消除不明显，在组织内的穿透性较好，从血浆中排除的平均
半衰期为１２小时，且不受进食或空腹用药的影响，绝对生物利用度
＞９０％。研究显示［９］，以莫西沙星为基础的三联用药治疗明显优于
质子泵抑制剂、阿莫西林、克拉霉素的标准三联用药，ＨＰ根除率较
高，副作用小。莫西沙星的８－甲氧基部分可以提高对革兰氏阳性
菌的活性，使其对厌氧菌的抗菌活性大大增强，同时还减少了耐药
菌株的产生，使光素性大大降低。莫西沙星抗菌活性高，其ｐｋ／ｐｄ
参数良好，抗菌谱可覆盖全部呼吸道主要致病菌，杀菌作用快，过敏
反应少。研究表明［１０］，莫西沙星不仅能够有效的对人体微生菌起到
良好的抗菌性，还对喹诺酮类药物的耐药性有良好的敏感作用。
综上所述，莫西沙星治疗 ＨＰ感染胃病可有效清除 ＨＰ，提高治
疗效果，患者依从性良好，不良反应少。本组研究中，观察组缓解率
为９５．６％，对照组缓解率为７６．５％，观察组优于对照组，Ｐ＜０．０５，且
观察组不良反应、ＨＰ根除率以及耐药率方面均优于对照组，均Ｐ＜
０．０５，可见莫西沙星有良好的抗菌效果，治疗 ＨＰ感染胃病疗效确
切，效果较满意。
参考文献
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ｊｅｃｔｅｄ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｕｌｃｅｒ　ｂａｓｅ　ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｓ　ｉｎｔｏ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ，
ｎｅｕｒｏｎａｌ，ｇｌｉａｌ　ａｎｄ　ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ　ｃｅｌｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ，ｍｕ－
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　（上接第１１０页）发挥正常的保护功能时，胃壁也就无法抵御胃酸的
侵袭，直接导致胃溃疡发病。泮托拉唑除了具有超强的抑酸功能外，
还可以对 ＨＰ造成不利的影响，它可以降低 ＨＰ的活动力，这种抑制
机制可能与质子泵抑制剂分子结构中含有类似咪唑结构的基团相
关。ＨＰ破坏胃肠道保护机制的重要因子之一就是尿素酶，如果药物
能够使尿素酶得到有效的抑制或破坏就可以阻止 ＨＰ在胃内的黏附
过程，进而起到抗菌的作用。当 ＨＰ得到抑制或者是清除后，胃肠道
的保护机制就能恢复，使胃酸无法对胃壁造成侵袭，达到治疗胃溃疡
的目的［６］。泮托拉唑可以抑制基础、夜间以及２４小时胃酸分泌，因
此，Ｈ离子减少可在９０％以上，２４小时保证胃内ｐＨ 值≥１４［７］。此
外，泮托拉唑在代谢过程中不易与细胞色素Ｐ４５０作用而氧化失效，二
者的亲和力低于奥美拉唑、兰索拉唑，且不会对Ｐ４５０氧化酶系统的活
性产生诱导作用，因此，对通过Ｐ４５０氧化酶代谢的其他合用药物的影
响较小［８］。
综上所述，泮托拉唑治疗胃溃疡合并出血患者可以有效清除
ＨＰ，抑制胃酸的分泌，临床效果满意，值得临床推广。
参考文献
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