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野生和栽培长春七中蛇床子素含量比较



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野生和栽培长春七中蛇床子素含量
比较
刘艳红 ,侯淑珍 ,王 薇 ,蒙跃龙 ,张培芳 ,宋小妹*(陕
西中医学院 ,陕西 咸阳 712046)
摘要:目的 比较野生长春七和栽培长春七中蛇床子素含量。
方法 采用 H PLC 法 ,以 C18柱为色谱柱 ,乙腈-水(73∶27)为
流动相 ,流速为 1.0 m L· min-1 , 检测波长为 322 nm。结果
 蛇床子素进样量在 0.202~ 2.424 μg 范围内与峰面积呈良
好的线性关系 ,相关系数为 0.999 7 ,平均回收率为 100.22%,
RSD为 1.31%。野生长春七中蛇床子素平均含量为 1.28%,
栽培长春七中蛇床子素平均含量为 0.42%。结论 野生长春
七中蛇床子素含量明显高于栽培长春七 ,二者中其他化学成
分存在一定差异。
关键词:长春七;蛇床子素;高效液相色谱法
doi:10.3969/ j.issn.1004-2407.2010.06.008
中图分类号:R284   文献标志码:A   
文章编号:1004-2407(2010)06-0415-02
基金项目:2008 年陕西省教育厅专项科研计划项目(项目编
号:08JK263);2008 陕西省科学技术研究发展计
划项目(项目编号:2008K16-04)
作者简介:刘艳红 ,女 , 2008 级硕士研究生 ,助教
*通信作者:宋小妹 ,女 , 教授 ,硕士研究生导师
    长 春 七 为 伞 形 科 植 物 岩 风 Libanotis
buchtormensis(Fisch.)DC.的干燥根 ,为陕西“太白
七药”之一 ,分布于陕西 、甘肃 、四川等地[ 1] 。其性甘 、
温 ,味苦 ,具有祛风散寒 、活血止痛 、健脾胃 、止咳 、解
毒之功效[ 2] ,在陕西民间有较好的应用。随着逐年增
长的市场需求 ,长春七野生资源日益减少;加之其主
要生长在悬崖峭壁 ,采挖难度较大 ,所以野生驯化长
春七就越来越迫切 。长春七化学成分研究表明其主
要成分为香豆素类[ 3] ,其总香豆素类以蛇床子素为
主 ,参考2005版《中国药典》[ 4] 蛇床子药材蛇床子素测
定方法以及相关文献[ 5-6] ,以长春七中蛇床子素为检
测指标 ,对野生长春七和栽培长春七中蛇床子素含量
进行测定 ,从而比较二者的质量差异 ,为长春七的人工
引种栽培 、扩大药源提供科学依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器 美国Waters 2695高效液相色谱仪;Waters
2996紫外检测器。
1.2 试药 蛇床子素对照品(中国药品生物制品检
定所);长春七药材[购自陕西眉县槐芽镇 ,经陕西中
医学院药学院高级实验师王继涛鉴定为伞形科植物
Libanotis buchtormensis(Fisch.)DC.] ;乙腈为色谱
纯;水为重蒸馏水;其余试剂均为分析纯 。
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性实验 色谱柱 Kroma-
si l ODS(250 mm×4.6 mm , 5 μm);流动相:乙腈-水
(73∶27);检测波长:322 nm;流速:1.0 mL ·min-1 ;
柱温:25 ℃,进样量为 10μL。在上述色谱条件下 ,蛇
床子素对照品和样品的色谱图 ,见图 1 。
图 1 HPLC图
A-蛇床子素对照品;B-长春七野生品;C-长春七栽培品;1-蛇床子素
2.2 对照品溶液制备 称取蛇床子素对照品 0.010
1 g ,置于50 mL 量瓶中 ,用甲醇溶解 ,定容至刻度 ,摇
匀 ,得 0.202 g ·L-1蛇床子素对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备 取野生品长春七粉末 0.5
g ,精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加入无水乙醇 20
mL ,密塞 ,称定质量;超声处理 60 min ,放冷 ,再称定
质量;用无水乙醇补足减失的质量 ,摇匀 ,微孔滤膜过
滤 ,取续滤液作为供试品溶液。
2.4 线性关系考察 分别精密吸取上述对照品溶液1 ,
2 ,4 ,6 ,8 ,10和12μL ,按上述色谱条件注入液相色谱仪 ,
测定峰面积。以峰面积 A对蛇床子素进样量m(μg)进
行线性回归 ,得回归方程 A =4×106m -79 148(r =
0.999 7),结果表明 ,蛇床子素在 0.202 ~ 2.424 μg
范围内线性关系良好 。
2.5 精密度实验 精密吸取上述对照品溶液 10
μL ,连续进样 5次 ,记录峰面积 , RSD 为 0.97%。结
果表明 ,本方法精密度良好 。
2.6 重复性实验 精密称取野生品长春七样品粉末
5份 ,按供试品溶液的制备方法制备供试品溶液 ,依法
测定 ,RSD为 1.97%,结果表明该方法重复性良好。
2.7 稳定性实验 取同一供试品溶液 ,分别于 0 , 2 ,
4 ,6 ,8 ,10 , 12 , 14 , 16 ,18 , 20 , 22 和 24 h 测定其峰面
积 , RSD为 0.99%,表明该供试品溶液在 24 h 内稳
定性良好。
2.8 加样回收率实验 取已知含量的长春七栽培品
药材粉末 0.28 g ,共 5份 ,精密称定 ,分别加入适量对
照品 ,按上述实验条件和方法测定蛇床子素含量 ,计
算回收率 ,结果见表 1。结果表明 ,本法回收率良好 ,
RSD为 1.31%。
415西北药学杂志 2010 年 12 月 第 25 卷 第 6 期
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表 1 回收率实验结果
样重/g 样品中量/mg 加入量/mg 测得量/mg 回收率/% 平均回收率/ % RSD%
0.281 3 0.281 3 0.28 0.557 4 98.61
0.281 8 0.281 8 0.28 0.559 4 99.14
0.278 1 0.278 1 0.27 0.550 9 101.04 100.22 1.31
0.281 2 0.281 2 0.27 0.555 9 101.74
0.275 4 0.275 4 0.28 0.557 0 100.57
2.9 含量测定 称取野生品长春七药材 0.1 g 和栽
培品长春七药材 0.5 g 各两份 ,按照 2.3项下方法制
备样品溶液 ,进样 10 μL ,测定峰面积 ,按标准曲线法
计算药材中蛇床子素含量。结果野生长春七中蛇床
子素含量为 1.28%,栽培长春七中蛇床子素含量为
0.42%。
3 讨论
前期研究曾考察了超声法和回流提取法 ,通过含
量测定结果得知 ,超声法提取更完全 ,故选择超声法
提取;考察了提取溶剂甲醇和无水乙醇 ,通过含量测
定结果得知 ,无水乙醇提取效率更高 ,故选择无水乙
醇作为提取溶剂 。
在色谱条件摸索时 ,曾比较过乙腈-水(65∶35)、
乙腈-水(75∶25)和乙腈-水(73∶27)3种溶剂系统 ,
其中乙腈-水(65∶35)分离度好 ,但是蛇床子素出峰
时间较晚;乙腈-水(75∶25)蛇床子素出峰时间较早 ,
但是分离度差;乙腈-水(73∶27)分离度好 ,而且蛇床
子素出峰时间合适 ,所以最终确定流动相为乙腈-水
(73∶27)。
从实验结果看 ,栽培长春七与野生长春七相比 ,
所含主要化学成分均为蛇床子素 ,二者间其他化学成
分存在一定差异 。野生长春七中蛇床子素含量明显
高于栽培长春七 ,这可能与栽培长春七生长年限短有
关 ,但是在一定程度上栽培长春七可以解决野生资源
稀缺的问题。
参考文献:
[ 1]  全国中草药汇编编写组.中国中草药汇编[ M] .北京:
人民卫生出版社 , 1976:170.
[ 2]  张洁 , 荆知敏 , 徐爱萍 , 等.长春七的生药学研究[ J] .西
北药学杂志 , 2000 , 15(1):11.
[ 3]  宋小妹 , 吴立军 , 曹军毅 , 等.长春七化学成分研究[ J] .
中国中药杂志 , 2007 , 32(6):546.
[ 4]  中国药典 2005年版[ S] .一部.2005:6.
[ 5]  张宇洁 , 贺浪冲 ,苗延青 , 等.长春七中蛇床子素的提取
方法和含量测定研究[ J] .时珍国医国药 , 2006 , 17(8):
1457.
[ 6]  崔春利 , 刘道恒 , 唐志书 ,等.H PLC 法测定长春七提取
物及药材中蛇床子素含量[ J] .现代中医药 , 2008 , 28
(4):70.
(收稿日期:2010-03-17)
贵州毕节市药用植物新资源的种类
与分布
刘  留 , 何顺志*(贵阳中医学院药学系 , 贵州 贵阳
550002)
摘要:目的 通过调查研究 ,基本搞清了贵州毕节市药用植物
新资源的种类与分布。方法 通过野外考察 、标本采集 、分类
鉴定 、资料考证等相结合。 结果 贵州省毕节市现有药用植
物 404 种 ,其中 43 种为贵州药用新资源 、2 种为贵州特有药用
植物。结论 毕节市药用植物资源丰富 , 部分种类具有较高
的药用和科研价值。
关键词:贵州省;毕节市;药用植物;药用新资源
doi:10.3969/ j.issn.1004-2407.2010.06.009
中图分类号:R282   文献标志码:A   
文章编号:1004-2407(2010)06-0416-04
基金项目:贵州省中药现代化项目[ 黔科合社字(2008)5004]
作者简介:刘留 , 男 ,硕士研究生
*通信作者:何顺志 ,男 , 研究员 ,硕士生导师
  近 10年来 ,我们在中药资源调查研究中发现 ,贵
州西北部毕节市药用植物资源十分丰富。我们对毕
节市药用植物资源的种类和分布进行了调查研究 ,并
参考《贵州中草药名录》[ 1] 、《贵州中药资源》[ 2] 、《贵州
中草药资源研究》[ 3] 等资料 ,基本搞清了毕节市的药
用植物资源 ,并发现了 43种药用新资源 ,为毕节市中
草药资源利用及可持续发展提供科学依据。
1 自然概况
毕节市是典型的岩溶山区 ,位于贵州省西北部 ,
地处东经 104°51′~ 105°56′,北纬 27°3′~ 27°47′之
间 ,东邻金沙县 、大方县 ,南抵纳雍县 ,西接赫章县和
云南省镇雄县 ,北与四川省叙永县和古蔺县隔赤水河
相望。毕节地势西部高 ,北 、东 、南三面脚底。全境海
拔 1 500米上下的地区较广。最高处是花厂与纳雍
县交界处乌菁山 ,海拔 2 218 米;最低处是东北端马
洛河汇入赤水河处 ,海拔 471米 。北部赤水河谷是低
中山地貌。西部长春堡至青松是高中山 ,其余大部分
地区是中山地貌 。主要河流切割较深 ,达 500 ~ 700
米 ,地势起伏大 ,地形破碎 ,坝子狭小 。岩溶地貌与地
下河分布普遍。
毕节属北亚热带温凉湿润季风气候 ,平均日照时
数 1 391.1 h ,年平均气温 12.8 ℃ ,1月平均气温2.4
℃,7月平均气温 21.8 ℃,年活动积温 3 717 ℃;年平
均降水量 954.2 mm;无霜期 246 d。主要灾害性天
气有春旱 、倒春寒 、冰雹 、伏旱 、暴雨和秋季低温 。
境内山清水秀 ,平畴谷幽 ,风光秀美 ,夏无酷暑 ,
冬无严寒 ,雨量充沛 ,气候适宜 。
2 药用新资源
根据我们的野外调查和参考有关资料 ,本地区共
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