全 文 ：山西大学学报 (自然科学版 ) 1 7(41 4 19 一 `刀 , 1更“
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筱麦组织培养及再生植株
周 小梅 都建平 李绍清 李晓玲
(山西人学生命科 学系 )
摘要 以筱麦 (A ve ,姐 ,川 da) 成熟种子 为材料 , 研究 了培养基成分对愈伤组织 的诱 导 、 分 化 和继 代
保持 的影 响 。 通 过对 M S 为 基木培 养基附加 2, 4一 D 、 6一 B A 、 K T 、 Z f 等成分的各种培 养基 卜诱 导
产生 的愈 伤组织观察 比较 , 发现在几4 一 D 浓度为 五 1 18 L 时 , 诱 守产生 的愈伤组 织 量最 多 , 随着
2声一 D 浓度 降 低 , 愈伤 组 织形成的量也减 少 ; 在 之4 一 D l哪 L 、 K T 住25 m g L 的培养基中愈伤组织
能 分化 出芽 , 产生人 量苗 , 进而 再生 植株 。 实验结果 表明 , 在继代培养 基中加人一定量 的 AB A 和
石 , 能有效地促使褐化的愈伤组织恢 复正 常 , 使之保持 良好的 产t 长状态和分化能力 。
关键词 筱麦 , 愈伤组织 , 分化 , 再生植株
中图法分类号 0 只 5
筱麦是禾本科燕麦属的一种粮草兼用作物 、 其营养价值在谷类 中名列前茅 , 这种作物
的生育期短 , 适 合于高寒地带栽培 , 由于 籽实 中含有较高含量的高热量物质 ( 含蛋 白质 21 % ,
脂肪 4 一 5% )食用能耐饥抗寒 , 是 当地人 民的主食 。 但由于品种资源贫乏 , 类型单一 , 产量
低 , 难以通过 常规的品种间杂交 , 仓lJ造新的类型 。 近年来 , 应用组织培 养技术于农作 物的改
良已受到各国的广泛重视 , 并取得了很大进展 。 有关禾本科主要农作 物的组织培 养国 内外
已有大量报道 , 但筱麦的组织培养在国内研究的为数不多 ! ’ 一 ` ’ , 而 国外 尚未 见报道 。我们
通过对筱麦成熟种子组织培养的研究 ,获得 了再生植株 ,并 对培养基的成分 做了一些探索 。
1 材料和方法
将筱麦成熟种子用 自来水浸泡过夜 , 70 % 乙醇处理 3 05 ,0 , l % 氯化汞 消毒 I Om in , 无菌
水冲洗 4 次 , 切去胚根和茸毛部分 , 接种到 含有 2 , 4 一 D 住5 一 Z m g工 , 6 一 B A 或 K丁O . s m g L
的诱导培养基上 , 置于 26 止 1 ℃ 、 散射光下培 养 待愈伤组织 形成后 ,转 人分化培 养基使其
分化成苗 。 所用的基本培养基为 M S , 附加 3% 蔗糖 , 0 . 5% 水解酪蛋 白 , 0 . 7% 琼脂 , p H S . 8 。
结果与讨沦
愈伤组织的诱导 接种在附加生长索和细胞分裂素的培 养基中的外植体 , 经过一定 时
勺`.2
收稿 日期性 994 02 04
DOI : 10. 13451 /j . cnki . shanxi . uni v ( nat . sci . ) . 1994. 04. 013
山西大学学报 (自然科学版 ) 17(’) I更抖
间的诱导 , 产生 白黄疏松的愈伤组织 , 出愈量以培养基 中含 Zm g瓜2 , 4 一 D 时最多 , 随着 2,
4一 D 浓度的降低 , 形成的愈伤组织量也减少 , 细胞分裂素对愈伤组织的诱导无显著效应
(表 l )
表 1 不同激索对愈伤组织诱导的影响
培养基编号 激 素成分 (
n堪几 ) 愈 伤组 织形成最
之4 一 D } N A A } 6一 B A 1 K T
+ + +
+ + +
十 十 +
注 : + + + , 很多 ; + 十 , 多 ; 十 , 少
2
.
1
.
1 取材部位 虽然植物细胞的全能性为植物材料进行组织培养提供 了可靠 的保证 , 但
对一些植物来说 ,材料的选取及其生理状态仍然决定着培养的成功与否 ,对于禾本科植物 ,早
期用叶片进行组织培养很难获得愈伤组织 , 再生植株则更难以实现 。 近年来所 用的外植体
多采用未成熟的幼胚 、 下胚轴 , 以及花序 、 花药和顶端分生组织 。 在筱麦的组织培养中所采
用的外植体有子房 ` ” 、 萌发的种胚和胚根 {” 、 颖 片 {” 和花药 {` ’ 。 用植物体的生殖器官作 为
外植体是禾本科植株组织培养成功的一大特点 , 我们在实验中 , 选择了 成熟胚作外 植体 , 得
到再生植株 , 再次证实了这一点 。
2
.
1
.
2 植物激素 同大多数禾本科植物一样 , 2, 4一 D 对筱麦成熟胚愈伤组织的诱导是不可
缺少 的 , 其浓度 以 Zmg 压 为适 , 这 同王 辅德 、 梁守义等人的结果相一致! ’ , ” 。 细胞分裂素
6 一 B A 或 K T 与 .2 4 一 D 的配 合使用 与单独使用 2, 4一 D 无 明显差异 (表 1 中的 工 1 1 一工3天
可见 6 一 B A 和 K T 在诱导筱 麦成熟胚愈伤组织的形成时不是必需 的或略 有抑制作 用
(表 1中的 工 ` , I , ) , 梁守义等人在筱 麦未授粉子房 的培养中也发现 2一 D 和 K T 的联
合作用反而降低 了愈伤组织的诱导率 ` ” 。
.2 2 再生植株的形成 本实验设计了 12 种分化培养基 , 愈伤组织在这些培 养基 中生长 、 分
化情况见表 2 。
实验结果表明 : 在 .2 4 一 D 浓度 Zgm /L 、 细胞分裂素 a 25 gm L/ 的 D , 一 D 7 培 养基上 , 愈
伤组织生 长状 态差 , 量 少色褐 , 只有 加 Z T 的 7D 中分化出根 。 细胞分裂素的浓度增加到
0
.
s grn L/ 的 玖 一 玖 培养基 , 只有含 6一 B A 的玖 中 , 愈伤组织分化出小植株 , 即高浓度的
2
,
4 一 D 下 , 6 一 B A 对成苗有促进作用 。
在 2, 4一 D 浓度为 l gm /L, 6一 B A、 KT 分别为 0
.
5飞 L/ 的 D 。 和 玖 培 养基中 , 愈伤组织生
长状态不良 , 而降低了 细胞分裂素的 D , 。 一 D l : 培 养基 中愈伤组织生 长快 , 色泽 白黄 , 特
别是含 K T 的 D l l 上 , 愈伤组织分化出许多芽和根 , 进而再生完 .整植株 。
周小梅等 筱麦组织培养及再生植株
表 2 激素组合与愈伤组织分化的关系
培养基
编 号
激 素组合 (m g L ) 分化情况
N z气A 么 4一 D 6一 B A K T 2 1,
0
.
5
根
芽 、 根
内乙
D
0
.
5
0
.
5
。.25
0
.
25
芽
芽 根
仓25 } 根
几.D马玖,氏玩
植物激素对愈伤组织的分化起着重要的作用 , 不同的激素组合及浓度 、 生 长素和细胞分
裂素的比值影响到愈伤组织的生长和器官的分化 , 各种植物对此有不同的需 要 。 从我们的
实验结果看 出 , 筱麦成熟胚愈伤组织的诱导需要较高的 2 , 4 一 D , 而在器官分化 中则需降低
2产一D 浓度 ,并配合一定 量的细胞分裂素 , K T 和 6一 B A 促使苗的分化 , Z T 有利 于 根 的生
成 。
2 3 愈伤组织的继代和保持 在筱麦愈伤组织的继代和保持中 , 常常有褐化现象 的发 生 ,
当培养基中加人了适量的 BA A ( 0
.
3m g /)L 和 Z (T o . 5压 ) , 愈伤组织可恢复正常 , 颜 色从褐色 转
为白黄色 , 再转人分化培养基能分化成苗 。 Z T 和 A B A 可有效地防止愈伤组织褐化 , 使之保
持 良好的生长状态和分化能力 (表 3 ) 。
表 3 继代培养中愈伤组织的生长 、 分化情况
培 养基编号 激素组合 (mg 瓜 ) 蔗塘 愈伤组织状态及分化
(% )2
一
4 一 D K T Z T A B A 生长最 颜色质地 分化
P
1
2 3 较多 黄略褐 根
P
z
2 0
.
3 3 较多 黄 白松 根
P 3 2 0
.
5 0 3 3 多 黄 白松 苗
P
-
2 0
.
5 3 较多 黄 苗 、 根
P , 2 0
.
2 0
.
5 3 中 黄略 褐
P
6
0
.
3 3 中 黄 白松
P
,
2 6 较多 黄紧密
周小梅等 筱麦组织培养及再生植株
表 2 激素组合与愈伤组织分化的关系
培养基
编 号
激 素组合 ( m g L ) 分化情况
N z气A 么4 一 D 6 一 B A K T 2 1,
0
.
5
根
芽 、 根
内乙
D
0
.
5
0
.
5
。.25
0
.
25
芽
芽 根
仓25 } 根
几.D马玖,氏玩
植物激素对愈伤组织的分化起着重要的作用 , 不同的激素组合及浓度 、 生 长素和细胞分
裂素的比值影响到愈伤组织的生长和器官的分化 , 各种植物对此有不同的需 要 。 从我们的
实验结果看 出 , 筱麦成熟胚愈伤组织的诱导需要较高的 2 , 4 一 D , 而在器官分化 中则需降低
2产一D 浓度 ,并配合一定 量的细胞分裂素 , K T 和 6一 B A 促使苗的分化 , Z T 有利 于 根 的生
成 。
2 3 愈伤组织的继代和保持 在筱麦愈伤组织的继代和保持中 , 常常有褐化现象 的发 生 ,
当培养基中加人了适量的 BA A ( 0
.
3m g /)L 和 Z (T o . 5压 ) , 愈伤组织可恢复正常 , 颜 色从褐色 转
为白黄色 , 再转人分化培养基能分化成苗 。 Z T 和 A B A 可有效地防止愈伤组织褐化 , 使之保
持 良好的生长状态和分化能力 (表 3 ) 。
表 3 继代培养中愈伤组织的生长 、 分化情况
培 养基编号 激素组合 (mg 瓜 ) 蔗塘 愈伤组织状态及分化
(% )2
一
4 一 D K T Z T A B A 生长最 颜色质地 分化
P
1
2 3 较多 黄略褐 根
P
z
2 0
.
3 3 较多 黄 白松 根
P 3 2 0
.
5 0 3 3 多 黄 白松 苗
P
-
2 0
.
5 3 较多 黄 苗 、 根
P , 2 0
.
2 0
.
5 3 中 黄略 褐
P
6
0
.
3 3 中 黄 白松
P
,
2 6 较多 黄紧密
周小梅等 筱麦组织培养及 再生植株 42 3
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K e y w o心 A v e n a n “ d a , 以 l us , d lcf r e n it a t io n , P la n it ct r e g cn e ar t io n
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