全 文 ：ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
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（收稿日期：２０１２－１２－２５）
了哥王中总木脂素含量测定方法的研究
赵金鹿１，２，刘丽霞１，魏　岚１，佟立今１，孙立新１＊（１．沈阳药科大学药学院，沈阳 １１００１６；２．沈阳药科大学中药学院，沈阳
１１００１６）
摘要：目的　建立测定了哥王中总木脂素含量的分析方法。方法　采用紫外分光光度法，测定波长为２８０ｎｍ。结果　总木脂素
的质量浓度在１０．０～６０．０μｇ·ｍＬ－１（ｒ＝０．９９９　３）范围内与吸光度线性关系良好，平均回收率为９８．５％，ＲＳＤ为１．８％。结论
该方法操作简便、快捷、准确，适用于了哥王中总木脂素的含量测定。
关键词：了哥王；总木脂素；含量测定
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１３．０３．００３
中图分类号：Ｒ２８２　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１３）０３－０２２６－０２
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｌｉｇｎａｎｓ　ｉｎ　Ｗｉｋｓｔｒｏｅｍｉａ　ｉｎｄｉｃａ
ＺＨＡＯ　Ｊｉｎｌｕ１，２，ＬＩＵ　Ｌｉｘｉａ１，ＷＥＩ　Ｌａｎ１，ＴＯＮＧ　Ｌｉｊｉｎ１，ＳＵＮ　Ｌｉｘｉｎ１＊（１．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ
１１００１６，Ｃｈｉｎａ；２．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍａｔｅｒｉａ　Ｍｅｄｉｃａ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　１１００１６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｌｉｇｎａｎｓ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　Ｗｉｋｓｔｒｏｅｍｉａ　ｉｎｄｉｃａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｕｌｔｒａ－
ｖｉｏｌｅｔ　ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ．Ｔｈｅ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　２８０ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｌｉｇｎａｎ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ａ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｉｎ
ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　１０．０－６０．０μｇ·ｍＬ－１（ｒ＝０．９９９　３）．Ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｏｆ　ｌｉｇｎａｎ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｗａｓ　９８．５％ａｎｄ　ＲＳＤ　ｗａｓ　１．８％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ
Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ａｃｃｕｒａｔｅ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｌｉｇｎａｎｓ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｉｎ　Ｗｉｋｓｔｒｏｅｍｉａ　ｉｎｄｉｃａ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｗｉｋｓｔｒｏｅｍｉａ　ｉｎｄｉｃａ；ｔｏｔａｌ　ｌｉｇｎａｎｓ；ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
基金项目：辽宁省科技厅项目（编号：２０１１４１２００４）；辽宁省高
校创新团队支持计划（编号：ＬＴ　２０１２０１８）
作者简介：赵金鹿，女，硕士研究生
＊通信作者：孙立新，女，教授，博士，博士生导师
　　了哥王Ｗｉｋｓｔｒｏｅｍｉａ　ｉｎｄｉｃａ（Ｌ．）Ｃ．Ａ．Ｍｅｙ．为
瑞香科荛花属植物，其根、茎、叶和果实均可入药，又
名南岭荛花、地棉皮、山棉皮、哥春光、雀儿麻等。了
哥王始载于《岭南采药录》，其性寒，味苦，微辛，有毒，
归肺肝经；具有清热解毒、消肿散结、止痛等功效［１－３］。
　　了哥王的化学成分主要有木脂素类、黄酮类和香
豆素类。木脂素类成分是了哥王药材中主要的抗肿
瘤活性成分之一，主要有杜仲树脂醇（（＋）－ｍｅｄｉｏｒｅｓ－
ｉｎｏｌ）、罗汉松脂酚（ｍａｔａｉｒｅｓｉｎｏｌ）、松脂醇（ｐｉｎｏｒｅｓｉｎｏｌ）、
牛蒡酚（（＋）－ａｒｃｔｉｇｅｎｉｎ）等［４］。孙立新等［５］测定了了
哥王中罗汉松脂酚和牛蒡子苷元的含量。
　　目前测定总木脂素含量的方法为紫外分光光度
法［６－７］，但了哥王中总木脂素含量的测定方法未见报
道。本文建立了测定了哥王中总木脂素含量的紫外
分光光度法，为了哥王药材的质量评价提供依据。
６２２ 西北药学杂志　２０１３年５月　第２８卷　第３期
ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
１　仪器与试药
１．１　仪器　ＵＶ－２６５ＦＷ型分光光度计（日本岛津）；
无水乙醇（天津市博迪化工有限公司）。
１．２　试药　９个产地了哥王药材经由沈阳药科大学
中药学院孙启时教授鉴定为瑞香科荛花属植物了哥
王 ［Ｗｉｋｓｔｒｏｅｍｉａ　ｉｎｄｉｃａ （Ｌ．）Ｃ．Ａ．Ｍｅｙ．］；罗汉松
脂酚对照品（自制，质量分数９８．５％）。
２　方法与结果
２．１　溶液的制备
２．１．１　对照品储备液的制备　取罗汉松脂酚对照品
约５．０ｍｇ，精密称定，置于５０ｍＬ量瓶中，用体积分
数为７０％乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
２．１．２　供试品溶液的制备　称取了哥王药材细粉
（过６０目筛）约０．１ｇ，精密称定，置于圆底烧瓶中，加
体积分数７０％乙醇３０ｍＬ于８０℃水浴中回流提取
３次，每次１ｈ。热滤，合并滤液，减压蒸干，所得浸膏
用体积分数７０％乙醇溶解并定容于５０ｍＬ量瓶中，
摇匀，即为供试品溶液。
２．２　测定方法　在２００～４００ｎｍ波长范围内分别
扫描罗汉松脂酚对照品及供试品溶液，发现两者在
２８０ｎｍ处均有一个吸收峰，且峰形变化平缓，便于定
量测定，因此将２８０ｎｍ作为测定波长。
　　分别取供试品溶液、对照品溶液在２８０ｎｍ测定
吸光度，计算，即得。
２．３　方法学验证
２．３．１　标准曲线的绘制　分别精密量取对照品储备
液１．０，２．０，３．０，４．０，５．０和６．０ｍＬ置于１０ｍＬ量
瓶中定容，制成罗汉松脂酚质量浓度为１０．０，２０．０，
３０．０，４０．０，５０．０和６０．０μｇ·ｍＬ－１的系列对照品溶
液，在２８０ｎｍ测定吸光度。以对照品质量浓度Ｃ为
横坐标、吸光度Ａ为纵坐标，线性回归得回归方程Ａ
＝０．０１３　５　Ｃ＋０．０６５　９（ｒ＝０．９９９　３），表明总木脂素
的质量浓度在１０．０～６０．０μｇ·ｍＬ－１范围内线性
关系良好。
２．３．２　稳定性实验　取同一供试溶液（广西），分别
按０，０．５，１．０，１．５，２．０和２．５ｈ时间间隔进行测定。
测定结果的ＲＳＤ为１．７％ （ｎ＝６），表明供试品溶液
在２．５ｈ内稳定。
２．３．３　重复性实验　分别精密称取６份（广西）样品
约０．１ｇ，按供试品溶液的制备项下方法操作，测定结
果总木脂素平均含量为１４．８６ｍｇ·ｇ－１，ＲＳＤ为１．８％
（ｎ＝６），表明本实验测定方法的重复性良好。
２．３．４　加样回收率实验　精密称取已知准确含量的
样品 （广西，含量１４．８６ｍｇ·ｇ－１）约０．０５ｇ，精密加
入罗汉松脂酚对照品溶液７．５ｍＬ（质量浓度为０．１
ｍｇ·ｍＬ－１），按供试品溶液的制备项下方法操作，在
２８０ｎｍ测定吸光度，结果见表１。
表１　回收率测定结果
Ｔａｂ．１Ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ
Ｎｏ． 原有量／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
１　 ０．７２９　６　 ０．７５　 １．４７９　９　 １００．０
２　 ０．７３７　０　 ０．７５　 １．４８０　２　 ９９．１
３　 ０．７３５　６　 ０．７５　 １．４７１　３　 ９８．１　 ９８．５　 １．８
４　 ０．７５４　８　 ０．７５　 １．４７１　２　 ９５．５
５　 ０．７２０　７　 ０．７５　 １．４６８　８　 ９９．７
２．４　样品测定　取９个产地样品，按供试品溶液制
备项下的方法操作。在２８０ｎｍ测定吸光度，计算各
产地样品中总木脂素含量，测定结果见表２。
表２　不同产地了哥王总木脂素含量测定结果（ｎ＝３）
Ｔａｂ．２Ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｌｉｇｎａｎｓ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｒｅｇｉｏｎｓ（ｎ＝３）
序号 产地　　 总木脂素含量／ｍｇ·ｇ－１　 ＲＳＤ／％
１ 贵州　　 ５．１４　 ２．７
２ 广西梧州 １１．０９　 ２．１
３ 江西　　 ２９．０２　 １．４
４ 广州　　 ２８．３７　 １．６
５ 广西桂林 ６．１１　 ３．２
６ 广西　　 １４．８６　 ２．４
７ 广东１　 ２９．７８　 １．９
８ 广东２　 ２９．５４　 １．１
９ 沈阳　　 ２６．４３　 １．７
３　讨论
　　本实验采用无水乙醇、乙醇、体积分数７０％乙
醇、体积分数５０％乙醇和体积分数２０％乙醇回流提
取，结果表明用体积分数７０％乙醇的提取量最多，推
测了哥王药材中可能含有部分木脂素苷类。采用体
积分数７０％乙醇回流提取１ｈ，分别提取１，２和３
次，表明提取３次得到的总木脂素量最多。最终采用
体积分数７０％乙醇回流提取３次，每次１ｈ。
　　含量测定结果表明，广东、江西产地的了哥王药材
中总木脂素含量较高，而贵州、广西桂林产地的总木脂
素含量最低，这可能与地理环境和采收季节有关。
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