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假昙花的组织培养与快速繁殖



全 文 :·研究简报· 北方园艺 2009(2):106~ 108
第一作者简介:张志斌(1970-),男 ,实验师, 主要从事植物遗传育
种研究工作。
通讯作者:刘洋。
收稿日期:2008-08-10
假昙花的组织培养与快速繁殖
张 志斌 , 刘  洋
(青海省农林科学院作物所 ,青海西宁 810016)
  摘 要:以假昙花茎尖 、茎段为外植体进行培养试验。结果表明:适宜的原球茎诱导的培养
基为 KC+5 mg/ L BA+0.5 ~ 1.0 mg/ L NAA;增殖培养基:KC+5 mg/L BA+0.5 ~ 1.0 mg/ L
NAA +0.2%蛋白胨;分化及育苗培养基:KC+0.1 mg/ L NAA+0.1%活性炭。
关键词:假昙花;组织培养;外植体
中图分类号:S 682.2+9 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2009)02-0106-03
  假昙花(Rhipsalidopsis gaertneri),别名连叶仙人
掌、顶毛爪 ,又称“螃蟹花” ,“复活节仙人掌” ,为原产巴西
的仙人掌科假昙花属多年生肉质植物[ 1-2] 。附生类型。
株高 15~ 20 cm ,多分枝 ,花筒短 ,花大 ,花多 ,花径 6 ~
8 cm;花瓣伸展较广 ,是标准的辐射状花 ,花色橙红而鲜
丽 ,花期长 ,通常在3 ~ 4月开花。生长健壮 ,是一种美丽
的室内盆栽花卉 ,用于装饰家庭的窗台 、阳台或客厅 ,优
美大方 ,是室内点缀的理想材料 ,因而具有较大的市场
潜力。假昙花多采用扦插 、嫁接进行繁殖 ,只能在生长
季节进行 ,不能进行周年生产 ,但尚未见有关组织培养
和快速繁殖的报道 ,该试验所做的研究可为假昙花进行
规模化生产提供依据。
1 材料和方法
1.1 材料
试验所用材料为假昙花盆栽植株。
1.2 方法
1.2.1 诱导培养基 以 KC 为基本培养基 ,添加 BA 、
NAA 、KT 和 IBA 4种生长调节剂 ,配制成不同的剂量组
合 ,筛选出诱导效果最好的培养基(见表 1 、2)。
1.2.2 增殖培养基 以 KC为基本培养基 A:以 15种
不同剂量 、4种不同生长调节剂组合成增殖培养基(见表
3);B:以蛋白胨 、水解蛋白 、复合氨基酸 、胰蛋白胨等添
加物组成增殖培养基(见表 4)。
1.2.3 接种 取成熟植株长约 2.0 cm左右的茎尖 ,流
水冲洗 ,放入0.1%HgCl2溶液中灭菌10 min ,无菌水冲
洗干净 ,取茎尖1 ~ 2 mm接种在诱导培养基上。
1.2.4 培养条件 光照强度2 000 lx ,光照培养10 h ,黑
暗培养 14 h ,培养温度为(23±2)℃,培养基pH 5.5。
1.2.5 植株再生 将增殖培养基上已开始分化的原球
茎转接到含有 0.1%活性碳+0.1 ~ 0.5 mg/L NAA+
0.1~ 0.5 mg/ L 2 , 4-D的 KC 培养基上 ,待植株长到
2.0 cm 左右 ,将其单个分开接种于新鲜培养基上 ,每瓶
接种 10 ~ 15个。
1.2.6 观察与统计 28 d后统计茎节的培养和原球茎
诱导的结果及不同生长调节剂和添加物培养原球茎的
增殖结果 ,35 d后统计茎尖及茎段的培养诱导的结果。
2 结果与分析
2.1 原球茎的诱导培养
不同生长调节剂组合对原球茎形成的影响方面:对
茎尖 、茎段的诱导使用了 4种植物激素的不同组合 ,培
养结果见表1 、2。从表1可以看出 ,BA与 NAA的组合
对茎尖的诱导效果好于 KT 与 NAA的组合 ,诱导率最
高可达 70%,最低为 50%。从表 2的结果来看 ,13 ~ 18
号培养基上的茎段不经过原球茎阶段直接出芽形成芽
丛;1、7 、8 、10 、11 、12 、19 、20 、21 、22 、23 、24号培养基适合茎
段的诱导培养 ,不仅诱导率高 ,而且每个外植体所产生
的平均原球茎数也都在 5个以上。因高浓度的生长调
节剂易引起植株变异 ,尽量选用浓度低的组合[ 3] ,所以
7 、8号培养基较优。
  表 1 生长调节剂组合对茎尖形成原球茎的影响
培养基及生长调节剂/mg·L-1
BA KT NAA
外植
体数
形成原球茎的
外植体数
诱导率
/ %
0 1.0 0.1 10 4 40
1.0 0 0.1 10 7 70
0.5 0 0.1 10 5 50
0 0.5 0.1 10 5 20
  由试验中还得到 ,在细胞分裂素浓度相同的情况
下 ,随着生长素浓度的提高 ,所形成的原球茎平均数降
低。在原球茎分化成苗的过程中 ,随生长素浓度的增
加 ,幼苗逐渐变得健壮 、矮化[ 3-6] 。在细胞分裂素绝对浓
度较高和生长素绝对浓度较高或很低时 ,原球茎呈愈伤
组织状。
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北方园艺 2009(2):106 ~ 108 ·研究简报 ·
  表 2 不同生长调节剂组合对茎段形成原球茎的影响
处理号     生长调节剂    
BA NAA IBA
诱导率
/ %
平均原球
茎数/个
平均
芽数/个 处理号
    生长调节剂    
BA NAA IBA
诱导率
/ %
平均原球
茎数/个
平均
芽数/个
1 0.5 0.1 0 70 5.7 0 13 0.5 0 0.1 70 0 1.5
2 0.5 0.2 0 31 4.2 0 14 0.5 0 0.2 49 0 2.0
3 0.5 0.5 0 49 2.8 0 15 0.5 0 0.3 56 0 2.8
4 1.0 1.0 0 47 3.1 0 16 1.0 0 0.5 49 0 3.8
5 1.0 2.0 0 42 2.5 0 17 1.0 0 1.0 47 0 2.3
6 1.0 5.0 0 21 2.2 0 18 1.0 0 2.0 78 0 1.8
7 5.0 0.5 0 80 6.9 0 19 5.0 0 0.5 76 5.8 0
8 5.0 1.0 0 73 6.3 0 20 5.0 0 1.0 79 5.2 0
9 5.0 5.0 0 47 3.1 0 21 5.0 0 2.0 71 6.1 0
10 9.0 0 0 77 6.0 0 22 9.0 0 0.5 73 6.0 0
11 9.0 1.0 0 66 5.3 0 23 9.0 0 1.0 68 6.6 0
12 9.0 3.0 0 67 5.1 0 24 9.0 0 2.0 62 7.1 0
2.2 原球茎的增殖培养
2.2.1 生长调节剂对原球茎增殖的影响 原球茎的增
殖培养是实现假昙花快速繁殖的关键 ,在适合的培养基
上 ,原球茎增殖很快 ,分化后可得到大量再生苗。从表 3
可以看到 ,试验中的组合对原球茎的增殖作用没有明显
差异 ,但不同的组合对原球茎的发育方向起调控作用。
低浓度 BA和较高浓度NAA或 IBA 使原球茎分化 ,较
高浓度的 BA 和低浓度的 NAA 或 IBA 维持原球茎增
殖。综合考虑 ,4、5号培养基较适宜原球茎增殖培养。
2.2.2 复合添加物对原球茎增殖的影响 从表 4的结
果中可以看到 ,在KC培养基中附加不同浓度的 4种复
合添加物后 ,以 0.2%蛋白胨的培养效果最好 ,其存活率
和增殖率都最高 ,并且在以后的培养中观察到 ,分化的
幼苗健壮 ,颜色深绿。
  表 3 不同生长调节剂浓度组合对原球茎
增殖的影响
处理号 生长调节剂浓度/ mg·L-1
BA KT NAA IBA
鲜重增加率/ % 分化率/ %
1 2.0 0 0 0 58 74
2 8.0 0 0 0 60 54
3 0.5 0 0.1 0 55 87
4 5.0 0 0.1 0 57 34
5 5.0 0 0.5 0 59 46
6 5.0 0 1.0 0 56 85
7 5.0 0 2.0 0 58 90
8 5.0 0 0 0.5 54 71
9 5.0 0 0 1.0 58 84
10 0 1.0 0.5 0 51 90
11 0 5.0 0.5 0 52 86
12 0 5.0 1.0 0 57 85
13 0 5.0 2.0 0 51 81
14 0 5.0 0 0.5 55 60
15 0 5.0 0 1.0 52 56
  表 4 不同的复合添加物对原球茎增殖的影响
类型     蛋白胨/ %         水解蛋白/ %        复合氨基酸/ %       胰蛋白胨/ %   
0.1 0.2 0.3 0.1 0.2 0.3 0.1 0.2 0.3 0.1 0.2 0.3
存活率/ % 92 98 90 60 55 50 86 56 70 50 50 72
鲜重增加率/ % 82 90 85 50 10 80 75 8 75 7 15 46
分化率/ % 90 93 90 76 20 86 59 50 90 28 36 58
2.3 植株再生
分化的原球茎在再生培养基上 14 d后分化出芽 ,
30 d 后逐渐长出根。在培养过程中发现 ,2 ,4-D抑制幼
苗生长 ,只是浓度不同抑制的程度不同。浓度不同的
NAA对幼苗生长差异不大 ,随浓度提高 ,苗壮矮化 ,且
在培养过程中生长调节剂可逐代积累 ,因此成苗培养基
为:KC+0.1 mg/L NAA+0.1%活性炭较适宜。
3 讨论
3.1 生长调节剂的影响
生长调节剂在原球茎和芽诱导中起主导作用。高
浓度的细胞分裂素对原球茎的发生有利 ,但高浓度不利
于芽的产生。生长调节剂也对原球茎的增殖 、生长发育
起调控作用。低浓度BA和较高浓度NAA或 IBA使原
球茎分化 ,较高浓度的 BA和低浓度的 NAA或 IBA维
持原球茎增殖。
3.2 复合添加物的影响
复合添加物成分复杂 ,富含各种氨基酸 、维生素等
成分 ,一定浓度和种类的复合添加物对原球茎的增殖效
果很好 ,0.2%的蛋白胨对原球茎的增殖效果最好。外
植体的存活率是影响增殖的主要因素。复合添加物可
能会对原球茎产生毒害或引起渗透压的改变 ,进而导致
原球茎的死亡。复合添加物的添加一定要在试验的基
础上进行。
参考文献
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凌职业技术学院学报, 2003(1):20-21.
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·研究简报· 北方园艺 2009(2):108~ 110
观赏紫稻花色苷含量和稳定性的研究
黄 友明 , 卢其 能 , 张 双艳
(宜春学院生命科学学院 ,江西宜春 336000)
  摘 要:选择 2个典型的紫稻品种为试材 ,用1%(v/v)盐酸甲醇溶液提取色素 ,用紫外-见可
分光光度计扫描提取液和测定色素含量变化。结果表明:隐性紫色稻的花色苷含量是显性紫色
稻花色苷含量的3.0倍;光和热对花色苷的稳定性有显著影响。
关键词:花色苷;紫色稻;含量;稳定性
中图分类号:S 511;Q 946.83+.9 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2009)02-0108-03
  花色苷大量存在于紫色稻的叶片 、茎中 ,是一类使
这些器官呈现从红色到黑色系列的水溶性色素[ 1-2] ,花
色苷属于类黄酮化合物 ,在细胞质中经过莽草酸途径合
成后转移入液泡内[ 3-4] 。花色苷具有多种生理功能 ,可
作为抗氧化剂 ,清除自由基和活性氧[ 2, 5-6] ,为膜脂过氧
化作用的抑制剂及抵御强光胁迫产生的光抑制剂;花色
苷的产生是植物适应环境条件的表现 ,当植物受昆虫和
病原体侵袭产生的机械损害及人为损伤时 ,花色苷的合
成能对植物起到保护作用;此外 ,花色苷还可以作为一
种渗透剂 ,提高植物的抗旱和抗寒能力[ 5-6] 。
  紫稻有 2种 ,一种是显性紫稻 ,一种是隐性紫稻。
与正常绿色水稻相比 ,紫稻的茎和叶中较多的花色苷类
色素使其植株呈现紫红色 ,从而具有较高的观赏价值 ,
可用于园林景观的配色植物。此外 ,由于人工合成色素
第一作者简介:黄友明(1972-), 男, 江西宜春人 ,硕士 ,讲师 ,主要
研究方向为植物激素生理。E-mail:huangyouming52@126.com。
通讯作者:卢其能。 E-mail:qineng lu@sina.com。
基金项目:江西省教育厅科技资助项目(2007313)。
收稿日期:2008-10-20
固有的毒性和致癌性越来越受到人们的高度关注 ,从紫
稻中提取的花色苷 ,作为一类具有营养和保健作用的天
然色素 ,可广泛用于食品 、药品和保健品中 ,以取代现有
的人工合成色素。试验通过对紫稻花色苷含量及稳定
性的研究 ,为紫稻观赏价值发掘和紫稻色素的进一步开
发奠定了基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
选择 2个典型的紫稻品种(Oryza sativa L.),分别
为显性紫稻和隐性紫稻。2007年 8 ~ 12月将 2个品种
种植在宜春学院农学院校园内的实验田中 ,收割后在弱
光条件下晾干待用。
1.2 紫稻色素光谱分析和色素含量的测定
1.2.1 紫稻材料的采集和色素提取 在 11月 7 ~ 9日
早上的 9时之前到实验基地采集紫色稻的茎叶。分别
用锋利的不锈钢剪刀剪取叶片和茎秆。用天平称取一
定量的样品(约 0.5 g),用剪刀分别将每个材料剪成1 ~
3 mm长的小段 ,加入冷的含 1%(体积比)盐酸的甲醇溶
液和石英沙 ,迅速研磨至匀浆 ,沉淀 ,取上清用于试验。
[ 4]  范成明 ,李枝林.兰花组织培养及分子生物学研究进展[ J] .园艺学
报 , 2003(4):487.
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术出版社 ,2001:15-17.
Study on the Tissue Culture and Rapid Propagation Technique of the Rhipsalidopsis gaertneri
ZHANG Zhi-bing , LIU Yang
(Institute of Crop , Qinghai Academy of Agricultural and Forestry Sciences , Xining , Qinghai 810016 , China)
Abstract:Used the stem top and stem segment of Rhipsalidopsis gaertneri as explants.The results showed that the best
medium to induce of protocorms was KC+5 mg/ L BA+0.5 ~ 1.0 mg/ L NAA;Proliferation medium was KC+5mg/ L
BA+0.5 ~ 1.0 mg/L NAA+0.2%peptone;cultivation medium was KC+0.1 mg/L NAA+0.1%AC.
Keywords:Rhipsalidopsis gaertneri ;Tissue culture;Explant
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