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豹皮樟总黄酮的研究进展



全 文 :— 80 — 现代中药研究与实践2012年第26卷第4期Chin Med J Res Prac,2012 July.,Vol.26 No.4
豹皮樟总黄酮的研究进展
孙 玲
(连云港市第一人民医院东方医院药剂科,江苏 连云港 222042)
关键词 : 豹皮樟总黄酮;提取;含量测定;药理作用
中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1673-6427(2012)04-0080-03
豹皮樟(Litsea coreana Leve)属樟科、木姜子属,
老鹰茶是用豹皮樟的嫩梢和叶片为原料,以简便的工
艺(蒸汽杀青或沸水烫漂杀青后晒干或烤干)制成的
饮品,为我国江南农村长期饮用的一种植物代用茶,
俗称“白茶”,民间饮用历史悠久。它是一种无污染
且风味较佳的天然野生饮品,原料丰富,加工简单,
饮用方便。民间饮用表明其具有清凉止渴、解毒消
肿、醒神益智、明目健胃、顺气解表、散瘀止痛等
功效,且无毒副作用, 为药食同源植物 [1-3]。豹皮樟
中含有黄酮、皂苷、有机酸、香豆素和鞣质等成分,
其中黄酮类成分含量高,且是其活性主要成分 [4]。近
期有关豹皮樟总黄酮的研究性文章日益增多,这对有
效的开发和利用资源,寻找新的药用成分具有重要意
义。本文就豹皮樟总黄酮的化学成分及药理作用综述
如下。
1 提取分离
程文明 [5] 等采取 L9(34)正交设计,以芦丁为对
照,采用紫外分光光度法建立总黄酮的含量测定方
法,以豹皮樟总黄酮含量为考察指标,考察乙醇浓
度、提取时间、乙醇用量、提取次数 4 个因素对提
取的影响。结果发现,最佳提取工艺为 80%乙醇, 12
倍量,回流提取 3次, 每次 2h。但考虑到传统的醇提
后有机溶剂萃取的中药提取方法操作时间长,流程复
杂,且有机溶剂毒性较大,污染严重等缺点。陆维丽
[6] 等进行了不同工艺提取老鹰茶总黄酮含量的比较,
分别采用传统乙醇提取 -正丁醇萃取法和水提取 -
大孔树脂富集法提取老鹰茶总黄酮,并用紫外分光
光度法,以芦丁为标准品,270nm 下测定总黄酮含
量。结果发现,水提取 -大孔树脂富集法所得固体
中黄酮含量较高,可迭 55.86%,回收率为 105.6%,
RSD=1.64%。水提取大孔树脂富集的工艺操作简单,
所得固体黄酮含量高,更适于老鹰荼总黄酮的提取,
对进一步的工业化生产开发有较好的参考价值。
2 含量测定
近年来,黄酮类化合物以其光谱的药理作用而
备受青睐,人们对含有黄酮的化合物进行大量研究,
以期获得黄酮类化合物较多的中草药,因此黄酮的
含量测定成为研究关键的步骤。目前常用的中药总
黄酮含量测定的方法有紫外可见分光光度法、薄层
扫描法、高效液相色谱法、荧光分光光度法,以及
毛细管电泳法等 [7]。程文明 [5] 等通过紫外分光光度
法,以芦丁为对照,采用 NaAc-AlCl3 显色体系,在
410nm 处测定老鹰茶总黄酮含量,结果稳定。为了更
全面准确的控制药材质量,更有效的开发和利用资
源,陆维丽 [8] 等应用高效液相色谱法建立了测定老
鹰茶中四种主要黄酮成分的方法 [10]。用 Hypersil ODS
色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),以乙腈︰ 3%醋酸
溶液(18︰ 82)为流动相,流速:1.0 mL / min,
检测波长:355nm 为分析条件,测定老鹰茶中四种主
要黄酮的含量。四种黄酮含量的相关系数和线性范围
分别为:槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷 0.006~0.045mg/
mL(r=0.999 6)、 槲 皮 素 -3-O-β-D- 葡 萄 糖 苷
0.007~0.055 mg/mL(r=0.999 8)、山柰酚 -3-O-β-D-
半乳糖苷 0.007~0.049 mg/mL(r=0.999 9)、山柰酚 -3-
O-β-D-葡萄糖苷 0.006~0.045 mg/mL(r=0.9999)。回
收率分别为:100.2%,RSD 为 2.48%;99.69%,RSD
为 2.60%;99.46%,RSD 为 3.09%;95.32%,RSD 为
2.39%。此分析条件测定四种黄酮简单、准确、稳定
性佳,可用于老鹰茶中黄酮成分的含量测定。
3 单体的提取
郁建平 [9] 等对豹皮樟的黄酮类化学成分进行分
离提纯,得到了山柰酚、山柰酚 -3-O-β-D- 葡萄
糖苷及槲皮素 -3-O-β-D- 葡萄糖苷三个黄酮类化
合物单体。陈玉璞 [10] 等采用聚酰胺柱色谱、硅胶柱
色谱、sephadex LH-20 柱色谱等柱层析的方法对豹皮
樟总黄酮进行分离提纯,通过紫外分光光度法、核
磁共振氢谱、核磁共振碳谱、质谱等波谱方法及化
学方法鉴定它们的化学结构。结果分离得到 4 个黄
酮苷类化合物,经光谱学方法鉴定它们的化学结构收稿日期: 2011-06-07
DOI:10.13728/j.1673-6427.2012.04.025
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分别为:槲皮素 -3-O-β-D- 乳糖苷、山柰酚 -3-O-
β-D- 葡萄糖苷、槲皮素 -3-O-β-D- 葡萄糖苷、
山柰酚 -3-O-β-D- 半乳糖苷。其中槲皮素 -3-O-
β-D- 乳糖苷和山柰酚 -3-O-β-D- 半乳糖苷为首
次从豹皮樟中提取。唐敏芳 [11] 等应用反复硅胶柱色
谱、Sephadex LH-20 柱色谱以及HPLC 对豹皮樟的乙
酸乙酯萃取部分进行分离纯化,得到了 5个化合物,
根据理化性质和波谱数据分别鉴定为槲皮素、山柰
酚、(+)- 儿茶素、B- 谷甾醇、胡萝卜苷。其中化合
物(+)-儿茶素为首次从豹皮樟提取的黄酮类化合物。
4 药理作用
4.1 抗炎、免疫调节
陈琳 [12] 等发现 TFLC 对二甲苯诱导的小鼠耳肿
胀、角叉菜胶诱导的大鼠足爪肿胀、棉球诱导的大鼠
肉芽肿和大鼠佐剂性关节炎具有抑制作用,对佐剂性
关节炎大鼠腹腔巨噬细胞 IL-1 的生成有抑制作用。
王婷玉 [13-14] 等发现 TFLC 对大鼠佐剂性关节炎(AA)
大鼠的原发性、继发性炎症具有明显的抑制作用,
降低多发性关节炎评分:可提高 AA大鼠低下的脾淋
巴细胞增殖反应;有效降低 AA大鼠 PMΦ中产生的
TNF-α、IT-6 水平;改善 AA大鼠膝关节病理损伤;
能明显降低 AA大鼠膝关常滑膜细胞中MMP-9 蛋白
表达。周倩 [15] 等采用胶原性关节炎大鼠(CIA)模
型研究发现,TFLC 可改善大鼠膝关节病理损伤。可
降低 CIA 大鼠 PMΦ中过强的吞噬功能,下调脾细胞
IL-2 的分泌水平和腹腔巨噬细胞 IL-1 的分泌水平,
同时抑制 PMΦ 中 TNF-α 的分泌水平以及 TNF-
αmRNA 的表达。胡成穆 [16] 等报道以 Cy 50mg·kg-1
ip 给药,每天 1次,连续 2 d,诱导小鼠免疫低下模
型,采用碳廓清试验、溶血素生成试验、二硝基氟
苯 (DNFB) 诱导的迟发性超敏反应,观察 TFLC 对免
疫低下小鼠非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫的
影响。结果发现碳廓清试验中 TFLC 可提高 Cy 致免
疫低下小鼠的吞噬指数 a 值和廓清指数 K值,提高
免疫低下小鼠巨噬细胞的吞噬功能;溶血素试验中
TFLC 剂量不同组可分别提高免疫低下小鼠血清 IgM
和 IgG 的生成、增加免疫低下小鼠脾细胞溶血素的产
生、明显促进免疫低下小鼠 DTH反应及提升 CD4+、
CD8+ 细胞数以及 CD4+/CD8+ 比值,并能提高脾淋巴
细胞生产 IL-2 含量。研究表明,TFLC 通过广泛刺激
小鼠的特异性及非特异性免疫应答,对免疫低下小鼠
的免疫功能有良好的增强作用。为 TFLC 用于肿瘤、
艾滋病等疾病的临床应用提供了一定的理论依据。
4.2 保肝护肝
倪洪昌 [17] 等发现 TFLC 能降低非酒精性脂肪肝
大鼠血清和肝脏 TG,明显减轻肝脂肪变性程度和炎
症,并可降低血清和肝 MDA,提高肝组织 SOD 活
性。王建青 [18] 等发现 TFLC 能显著降低非酒精性脂
肪肝大鼠血清 ALT、AST、LDL-C、TC、TG 和肝匀
浆LDL-C、TC、TG;升高血清瘦素(Leptin)、胰岛素(INS)
水平,降低大鼠血清 TNF-α。表明非酒精性脂肪肝
大鼠给予 TFLC 后可明显减轻肝脏脂肪变性程度,并
减轻炎症反应,并且 TFLC 可显著降低肝匀浆MDA
而增加肝匀浆 SOS。王媛媛 [19] 等以酒精联合脂肪乳
灌胃大鼠制造大鼠酒精性脂肪性肝炎大鼠模型,发现
TFLC 能明显降低酒精性脂肪性肝炎大鼠血清 AST、
ALT、ALP、γ-GT 水平;降低血清和肝匀浆中 TC、
TG、MDA 含量,增强 SOD 和 GSH-PX 活性;同时
病理组织学显示 TFLC 能明显改善酒精性脂肪性肝炎
大鼠的肝细胞脂肪变性。刘洪峰 [20] 等也发现,TFLC
能降低酒精性脂肪性肝炎大鼠 ALT、AST、MDA、
TNF-α 含量,提高 SOD、GSH-PX 含量,肝组织
中 TNF-αmRNA 表达下降。同时病理学显示 TFLC
能明显减轻肝的病理损伤程度,表现为 TFLC 干预
后大鼠肝细胞脂肪变及炎症程度减轻。朱鹏理 [21] 等
发现 TFLC 可降低肝纤维化大鼠血清中 AIT、AST、
HA、LN、C Ⅳ、P Ⅲ NP 的水平,使肝纤维化大鼠
肝脏肝纤维化程度明显减轻,肝组织中 TGF-β、
CTGF mRNA 的表达明显减少。进一步的体外实验发
现 [22]TFLC 能明显抑制 TGF-β1 干预的肝星状细胞
(HSC)的增值,下调α-SMA、I 型胶原、Ⅲ型胶原、
Smad3、CTGF mRNA 的表达,上调 Smad7 mRNA 的
表达,且明显降低HSC 中 CTGF 蛋白的表达。
4.3 降糖、降脂
孙玉秀 [23] 等发现,糖尿病大鼠经 TFLC 治疗后
葡萄糖耐受量明显改善,空腹血糖、糖化血红蛋白、
胰岛素、游离脂肪酸、总胆固醇、甘油三酯和低密
度脂蛋白胆固醇显著下降,高密度脂蛋白胆固醇明显
增加,肝匀浆MDA含量下降,SOD 活性增高,光镜
下Ⅱ型糖尿病大鼠肝脏有明显的脂肪变性,电镜下
肝脏线粒体肿胀,内质网断裂,TFLC 对上述症状有
不同程度的改善,并且可下调Ⅱ型糖尿病大鼠肝脏
中 PTP1B 的表达。吕雄文 [24] 等发现 TFLC 可降低正
常小鼠的血糖值;显著对抗由肾上腺素引起的小鼠血
糖升高,明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖。并升高
血清 INS 水平,显著降低链脲佐菌素糖尿病大鼠模型
的血糖和血清 TC、TG、LDL-C 含量,同时升高血清
HDL-C 含量。
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5 结语
豹皮樟分布于云南、贵州、四川、安徽等地,其
中在安徽皖南山区资源丰富,作为一种纯天然绿色有
机保健饮品,豹皮樟的消暑解渴、消食去胀等多种保
健功效已经在长期的民间饮用过程中得到证实,另外
也有一些研究证实了其抗紫外线、抗癌变 [25-26] 等作
用。本文就其有效成分豹皮樟总黄酮的研究进展做一
综述 , 为进一步认识和了解这一野生资源,更好地开
发利用其药用价值提供理论依据。
参考文献
[1]  沙 济 琴 , 郑 达 贤 . 福 建 茶 树 鲜 叶 含 量 氟 的 研 究 [J]. 茶 叶 科
学 ,1994,14(1):37-42
[2] 李延松 . 老鹰荼资源调查与开发利用 [J]. 贵州茶叶 ,1995,(4):10-13.
[3] 郁建平 , 叶辉 . 老鹰茶 ( 豹皮樟 ) 天然食用色素的初步研究 [J]. 食品科
学 ,2002,23(2):40.
[4] 郁建平 . 贵州老鹰茶的化学成分 [J]. 植物资源与环境学报 ,2001,
10(3):61-62.
[5] 程文明 , 王小华 , 陆维丽 , 等 . 用正交设计法优选老鹰茶总黄酮的提取
工艺 [J]. 安徽医药 ,2005,9(10),729-730.
[6] 马淘淘 , 张群林 , 李俊 . 中药总黄酮的含量测定方法 [J]. 安徽医
药 ,2007,11(11):1030-1032.
[7] 陆维丽,秦敬克,汤文建,等 .不同工艺提取老鹰茶总黄酮含量的比较[J].
生物学杂质 ,2009,26(3)66-67.
[8] 陆维丽 ,陈玉璞 ,汤文建 ,等 .HPLC 法测定老鹰茶中主要黄酮的含量 [J].
安徽医科大学学报 ,2009,44(5):653-654.
[9] 郁建平 , 叶 辉 . 贵州老鹰茶的黄酮类化合物 [J]. 中山大学学报自然科学
版 ,2001,40(6):110-114.
[10] 陈玉璞 , 程文明 , 李 俊 . 老鹰茶中黄酮类化学成分分析 [J]. 安徽医科大
学学报 ,2008,43(1):65-67.
[11] 唐敏芳 ,汤文建 ,李 俊 ,等 .豹皮樟乙酸乙酯萃取物的化学成分分析 [J].
安徽医科大学学报 ,2010,45(4):509-512.
[12]  陈琳 ,程文明 ,胡成穆 ,等 .豹皮樟总黄酮抗炎作用及部分机制研究 [J].
安徽医科大学学报 ,2004,39(6):439-442.
[13] 王婷玉 , 李 俊 , 葛金芳 , 等 . 豹皮樟总黄酮对大鼠佐剂性关节炎的作用
及部分机制研究 [J]. 中国药理学通报 ,2007.23(12):1618-1623.
[14]  Wang TY, Li J, Ge JF, et al. Preliminary study of total flavonoids from Litsea
coreana Levl. on experimental adjuvant-induced arthritis in rats[J]. Am J
Chin Med, 2008; 36(5):899-912.
[15] 周倩 , 李 俊 , 王婷玉 , 等 . 豹皮樟总黄酮对胶原性关节炎大鼠腹
腔巨噬细胞产生细胞因子及其免疫功能的影响 [J]. 中国药理学通
报 ,2010,26(3):353-358.
[16] 胡成穆 , 陈 琳 , 李 荣 , 等 . 豹皮樟总黄酮对免疫低下小鼠免疫功能的
影响 [J]. 中国药理学通报 ,2007,23(6):804-808.
[17] 倪洪昌 , 李 俊 , 金 涌 , 等 . 豹皮樟总黄酮对大鼠非酒精性脂肪性肝炎
的防治作用 [J]. 中国药理学通报 ,2006,22(5):591-594.
[18] Wang JQ, Li J, Zou YH, et al. Preventive effects of total flavonoids of
Litsea coreana leve on hepatic steatosis in rats fed with high fat diet[J]. J
Ethnopharmacol, 2009, 121(1):54-60.
[19] 王媛媛 , 李 俊 , 曹 琦 , 等 . 豹皮樟总黄酮对大鼠酒精性脂肪性肝炎的
防治作用及部分机制研究 [J]. 安徽医科大学学报 ,2007,42(2):179-182.
[20] 刘洪峰 , 李 俊 , 胡成穆 , 等 . 豹皮樟总黄酮对酒精性脂肪肝大鼠脂质过
氧化及TNF-α生成的影响 [J]. 安徽医科大学学报 ,2009,44(2):236-241.
[21] 朱鹏理 , 李 俊 , 张磊等 . 豹皮樟总黄酮抗肝纤维化作用及对肝组
织 中 TGF-β1、CTGF mRNA 表 达 的 影 响 [J]. 安 徽 医 科 大 学 学
报 ,2009,44(2):232-236.
[22] 孙玲 , 李 俊 , 黄 成 , 等 . 豹皮樟总黄酮血清对 TGF-β1 干预的大鼠肝
星状细胞的作用及部分机制 [J]. 安徽医科大学学报 ,2010,4(3):367-370.
[23] 孙玉秀 , 鲁云霞 , 汪凌云 , 等 . 豹皮樟总黄酮降糖 2型糖尿病大鼠血糖
的可能机制研究 [J]. 中国中西医结合杂志 ,2010,30(6):617-621.
[24] 吕雄文 , 李 俊 , 绉宇宏 , 等 . 老鹰茶总黄酮降血糖作用的实验研究 [J].
中国中医药科技 ,2008,15(2)119-121.
[25]  陈晓明 , 任正隆 , 张怀渝 , 等 . 蒙山绿茶和老鹰茶的防紫外线作用研究
[J]. 辐射研究与辐射工艺学报 ,2005,23(5):278-281.
[26] 赵 欣 , 邵林楠 , 郑妍菲 . 老鹰茶的抗突变和体外抗癌效果 [J]. 食品工
程 ,2008,4,29-31.