全 文 ：药学与临床研究
Pharmaceutical and Clinical Research
2010
Jun;18(3)
紫花前胡（Peucedanum decursivum （Miq.） Max
im）为伞形科植物紫花前胡的干燥根，是我国传统
中药，主要分布在安徽、浙江、江西、江苏等省。 传统
中医认为，该药可宣散风热、下气、消痰，主要用于
治疗风热头痛、胸膈满闷等疾病。 研究发现，该植物
主要含有线型二氢吡喃香豆素和线型呋喃香豆素
苷，其中线型呋喃香豆素的紫花前胡苷（Nodakenin，
NDK） 含量最高， 为其主要成分。 药理实验证明，
NDK 具有明显的抗血小板聚集和镇痛作用等 ［1］，与
紫花前胡的某些临床功效（呕逆、胸膈满闷、头痛
等） 相符， 可以认为是紫花前胡的主要活性成分。
2000 年以前， 紫花前胡和白花前胡（Peucedanum
praeruptorum Dunn） 均作为前胡被收入 《中国药
典》。 但化学成分研究表明，这两个品种的主要成分
有较大的差别。 白花前胡是以角型二氢吡喃香豆素
类化合物为主，其中以白花前胡甲素（Pd-Ia）的含量
最高。 紫花前胡是以线型二氢吡喃香豆素和线型呋
喃香豆素类化合物为主 ［2］，这两类成分的药理作用
有明显区别［1，3］。因此，在 2005版的药典中对中药前
胡进行了调整，白花前胡作为前胡载入药典。 2010
年白花前胡和紫花前胡被分列为前胡和紫花前胡
两个品种载入药典。
本课题组前期仅对紫花前胡根中线型二氢吡
喃香豆素类的代表性成分 Pd-C-I 进行定量研究［4］，
并对紫花前胡的茎叶和根中 Pd-C-I 的含量进行比
较分析 ［5］。 基于 NDK 与紫花前胡的功效相一致，
又是其中含量最高的香豆素类成分，并且最新的研
究结果表明 NDK 具有改善学习记忆障碍的功能，
其与升高胆碱能神经系统作用有关， 提示 NDK 有
望发展成为新的预防和治疗健忘症的药物［6］。所以以
NDK 作为紫花前胡质量控制的指标比较合理。 徐
勤 ［7］等采用 HPLC 法，于三相系统中测定紫花前胡
中 NDK 的含量。 本文在此基础上，建立了简便、快
捷、准确的 HPLC定量方法，并应用该法测定了不同
产地的 10 批紫花前胡样品， 为中药紫花前胡质量
控制建立了可行的方法，同时为区分前胡类混淆品
种提供依据。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪（Agilent 1200），包括在线脱气
机 G1322A，二元泵 GB1312A，自动进样器 GB1329A，
柱温箱 G1316A，DAD 检测器 G1315D，RID 检测器
G1362A，Chemstation Rev B.03.02 化学工作站，Ag-
ilent Zorbax SB-C18（4.6 mm×250 mm，5μm）色谱柱；
UP2200H 型超声波提取器 （40kHz，220V）；十万分
之一电子天平（Mettler Toledo AB265-S）。
NDK 自制， 经各种理化常数和 MS，NMR 鉴定
HPLC 法测定紫花前胡中紫花前胡苷的含量*
周 婵，罗建光，孔令义**
中国药科大学 天然药物化学教研室，南京 210009
基金项目 《中国药典》2010版一部品种质量标准修订项目(yz-246)；
国家自然科学基金重点项目（30830116）；
国家重大科技专项（20092X09502-011）
作者简介 周婵，女，在读硕士，E-mail:zhouchan03@yahoo.com.cn
通讯作者 孔令义，男，教授，博士生导师，Tel:025-83271405，
E-mail:cpu_lykong@126.com
收稿日期 2010-02-26 修回日期 2010-03-12
摘要 目的：建立 HPLC 法测定中药紫花前胡中紫花前胡苷含量的方法，为其质量控制提
供依据。 方法： 采用反相高效液相色谱法，Agilent Zorbax SB-C18 色谱柱 （4.6 mm×250 mm，
5μm），流动相为甲醇-水（40:60），流速为 1mL·min-1，检测波长 334 nm，柱温 40℃。结果：紫花
前胡苷在此色谱条件下获得良好分离， 线性范围为 25.0~300.0 ng （r2=0.9999）， 平均回收率为
98.6%，RSD1.8%。 结论：首次建立了两相系统 HPLC 法测定紫花前胡药材中紫花前胡苷含量的
方法，该方法准确，可靠，对紫花前胡药材及其制剂的质量控制有较重要意义，已被 2010 版《中
国药典》采纳。
关键词 紫花前胡； 紫花前胡苷； HPLC； 两相系统
中图分类号 R927.2 文献标志码 A 文章编号 1673-7806（2010）03-253-03
*
**
253
DOI:10.13664/j.cnki.pcr.2010.03.009
药 学
研 究
结构，HPLC 测定纯度达 98.0%以上； 水为纯净水；
甲醇为色谱纯。
10批紫花前胡药材样品分别从不同产地采集，
经中国药科大学生药学教研室张勉教授鉴定为伞
形科前胡属植物紫花前胡 （P. decursivum （Miq.）
Maxim）。 其根洗净，晾干，粉碎过三号筛，于 50℃干
燥 6h后，置干燥器备用。样品材料及来源见表 1。定
量分析方法学考察采用编号 Z0801的紫花前胡样品。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Agilent Zorbax SB-C18色谱柱（4.6mm×250mm，
5μm）；流动相：甲醇-水（40:60）等度洗脱；流速 1mL·
min-1；检测波长 334nm；进样量 10μL；柱温 40℃。 色
谱分离图见图 1。 在选定的色谱条件下，按紫花前胡
苷峰计算，色谱柱理论塔板数应不低于 3000。
2.2 溶液的制备
对照品溶液 精密称取紫花前胡苷对照品适
量，加甲醇制成每毫升含 50μg的溶液，即得。
供试品溶液 取本品粉末（过三号筛）约0.5g，
精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 25mL，
称定重量，浸泡 1h 后超声处理（功率 100W，频率
40kHz）20min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失
的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液 1mL 置 10mL
量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，用 0.45μm 滤膜过
滤，作为供试品溶液。
2.3 样品提取条件的考察
2.3.1 提取方法的考察 取紫花前胡药材（Z0801）
粉末（过三号筛），以甲醇为提取溶剂，比较超声和
热回流提取中紫花前胡苷的含量。 结果发现，超声
提取效果较好,且超声提取简单易行，提取时间短，
不需要加热。 所以最终选择超声提取的方法。
2.3.2 提取溶剂的考察 取紫花前胡药材（Z0801）
粉末（过三号筛）0.5g，精密称定，置具塞三角瓶中，
分别精密加入 25mL 下列提取溶剂:（1）甲醇；（2）乙
醇；（3）乙酸乙酯；（4）氯仿。 超声 20min，比较上述溶
剂的提取效果。以NDK的峰面积（A）作为考察指标，
结果表明，甲醇提取效果最好，如表 2所示。
2.3.3 提取时间的考察 取紫花前胡药材（Z0801）
粉末（过三号筛）0.5g，精密称定，置具塞三角瓶中，以
25mL甲醇为提取溶剂，比较超声 20、30、40min的提
取效率。 以 NDK的峰面积（A）作为考察指标，HPLC测
定结果表明，25mL甲醇超声提取 20min效果最好。
2.4 最低检测限及最低定量限测定
取紫花前胡苷对照品溶液，在上述色谱条件下
分别以不同体积进样，取峰面积为噪音 3 倍（S/N=
3）和 10 倍（S/N=10）时的进样量分别为最低检测限
（LOD） 和最低定量限 （LOQ）。 NDK 的 LOD 为
0.11ng，LOQ为 0.37ng。
2.5 方法学考察
2.5.1 线性关系考察 精密称取紫花前胡苷适量，加
甲醇制成每毫升含 50μg的溶液，作为对照品储备液。
上述储备液分别进样 0.5、1.5、2.5、3.5、5.0、
6.0μL（自动进样器），按本色谱条件进行HPLC 法分
析，记录峰面积，以进样量（Y，ng）为横坐标，峰面积
（A）为纵坐标进行回归计算。 结果表明，NDK 在检
测范围内显示了良好的线性关系。 线性方程为 Y=
3.2619A +4.4718，r2 =0.999 9， 线性范围为 25.0 ~
300.0ng。
2.5.2 精密度与稳定性试验 精密吸取对照品溶
液，连续进样 6 次，计算各色谱峰的保留时间（tR）和
峰面积（A）的相对标准偏差（RSD）来考察日内变
异。日间变异通过连续进样3天，每天进样 6次来测
定。 NDK的日内和日间RSD均小于 1.0%。
精密称取紫花前胡药材 （Z0801） 粉末 0.5g
（过三号筛），按“2.2”项制备供试样品，分别于 0、2、
4、6、8、10、24h 进样分析， 经计算，RSD 为 1.1%，表
明供试品溶液在 24h内稳定。
2.5.3 重复性试验 精密称取紫花前胡药材
（Z0801）粉末 0.5g（过三号筛），按“2.2”项制备供试
样品并分析，以 NDK 的峰面积，考察测定方法的重
现性，其 RSD为 2.3%。
2.5.4 加样回收率试验 取已知含量的药材（Z0801）
表 2 不同提取溶剂测得的结果
提取溶剂 甲醇 乙醇 乙酸乙酯 氯仿
A 385.2 375.4 149.8 125.7表 1 10 批紫花前胡药材的样品
编号 Z0801 Z0802 Z0803 Z0804 Z0805 Z0806 Z0807 Z0808 Z0809 Z0810
产地 江苏 江苏 江苏 江苏 江苏 安徽 江西 江苏 浙江 浙江
HPLC法测定紫花前胡中紫花前胡苷的含量
图 1 紫花前胡根提取物的 HPLC-DAD色谱图
(A为对照品图，B 为样品图，1 为 NDK)
A B
254
药学与临床研究
Pharmaceutical and Clinical Research
2010
Jun;18(3)
Determination of Nodakenin in Peucedanum decursivum. (Miq.) Maxim by HPLC
ZHOU Chan, LUO Jian-guang, KONG Ling-yi*
Department of Natural Medicinal Chemistry, China Pharmaceutical University, Nanjing 21009, China
ABSTRACT Objective: To develop an HPLC method to determine the contents of nodakenin in
Peucedanum decursivum, and provide scientific basis for its quality control and preparation. Method: The
analysis was carried out on an Agilent Zorbax SB-C18 column eluted with methanol and water as mobile
phases. The detection wavelength was 334 nm, and the flow rate was 1.0mL·min-1. Result: The nodakenin
had a good linear range of 25.0~300.0ng (r2=0.999 9), with the average recovery and RSD of 98.6% and
1.8%, respectively. Conclusion: This method for quantification of nodakenin in Peucedanum decursivum is
simple, accurate and reliable and can be used for the its quality control of and preparations. It has been
adopted by the China Pharmacopeia of 2010 edition.
KEY WORDS Peucedanum decursivum; Nodakenin; HPLC; Biphasic system
粉末共 6份，精密加入对照品溶液适量，按“2.2”项制备
供试品溶液，计算 NDK加样回收率，结果见表 3。
2.6 样品含量测定
按含量测定方法，将对照品溶液和供试品溶液
分别注入液相色谱仪，计算样品中 NDK的含量。 共
测定 10批样品，结果见表 4。
3 讨 论
3.1 紫花前胡已有系统化学成分和药理活性的研
究报道，从紫花前胡根中分离得到的线型呋喃香豆
素苷类化合物，经活性筛选具有显著的抗血小板聚
集作用 ［8］，可以认为是紫花前胡抗血小板聚集的主
要活性成分， 并且 NDK 含量相对较高。 因此选择
NDK作为紫花前胡药材质量控制指标，建立紫花前
胡专属性成分 NDK 的定量分析方法， 并对其方法
学进行系统的适用性评价。
3.2 参考文献 ［7］采用的乙腈-甲醇-水三相系统的
流动相选择，我们分别对乙腈-甲醇-水、甲醇-水、
乙腈-水系统进行了比较分析， 摸索了等度洗脱和
梯度洗脱的情况。 乙腈-水-甲醇系统中，在所使用
的 3 根色谱柱上，NDK 的保留时间为 9~15min，理
论板数约为 4000。 经过试验比较，发现两相系统的
分离效果优于三相系统， 且两相系统易于操作，故
采用两相洗脱系统。 在甲醇-水、 乙腈-水系统中，
NDK 的分离情况和峰型相近，故选择成本较低的甲
醇-水（40:60）系统，可使紫花前胡中的 NDK 和其它
结构相似成分得到完全分离。
参考文献
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化因子（PAF）作用的研究［J］. 成都中医药大学学报，
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表 3 紫花前胡苷加样回收率实验结果
组号
已知含量
（mg）
加入量
（mg）
测得量
（mg）
回收率
（%）
1 0.4303 0.4472 0.8681 97.9
2 0.4850 0.4675 0.9602 101.7
3 0.4601 0.4650 0.9196 98.8
4 0.4382 0.4479 0.8704 96.5
5 0.4857 0.4890 0.9718 99.4
6 0.4576 0.4575 0.9019 97.1
平均回收
率（%）
RSD
（%）
98.6 1.8
表 4 紫花前胡中紫花前胡苷的含量
编号 Z0801 Z0802 Z0803 Z0804 Z0805 Z0806 Z0807 Z0808 Z0809 Z0810
含量
（%） 1.48 1.88 1.48 1.51 0.90 1.53 1.57 1.68 1.47 1.56
255