全 文 ：第 22卷　第 1期 《新疆师范大学学报》 (自然科学版 ) Vol. 22, No. 1
2003年 3月 Journa l o f Xinjiang No rmal Univ ersity Mar. 2003
( Natura l Sciences Edition)
细穗柽柳中黄酮化合物提取方法的研究⒇⒇
庄　丽　　惠寿年　彭子模
(新疆师范大学生命与环境科学学院 ,乌鲁木齐 , 830054)
摘　要　本文以新疆细穗柽柳作为实验材料 ,在对水提法、醇提法和碱提法进行了比较研究的基础上 ,对醇提法进行了
五因素四水平的正交实验设计。 结果表明: 40%乙醇浓度、 3倍溶媒量、提取时间为 2h时 ,可获得最佳提取效果。
关键词　细穗柽柳　黄酮类化合物　正实实验　提取方法
中图分类号: 　 [Q945 ]　　　文献标识码: 　A　　　文章编号:　 1008-9659-( 2003) -01-0046-04
黄酮类化合物广泛存在于药用植物中 ,近年来随着研究方法和技术的不断提高 ,发现了许多新的黄酮类
化合物及其生理作用 ,特别是抗自由基及抗癌、防癌作用 ,使黄酮类化合物的研究进入了对一个新的阶段。掀
起了黄酮类化合物的研究、开发和利用研究的热潮 ,尤其在医药和食品领域中的应用 ,更具有广阔的发展前
景。[1 ]
目前对黄酮类化合物提取方法的研究不少 , [2- 3 ]但对新疆细穗柽柳 ( Tamarix Leptostachy Bgt )中黄酮
类化合物的研究却很少。为此 ,我们对其进行了三种不同方法的比较研究。
1　材料、试剂及仪器
1. 1　材料
新疆细穗柽柳于 2002年 6月采摘于新疆吐鲁番沙漠植物园 ,放于室内自然风干 ,一周后粉碎 ,经 20目
金属网筛滤好后备用。
1. 2　试剂
蒸馏水
乙醇 ( 20% , 40% , 60% , 80% )
NaO H溶液 (p H值分别为 8、 9、 10、 11)
1. 3　仪器
FW— 80高速万能粉碎机
电热恒温水浴锅
JY系列电子天平
S HB—循环水式多用真空泵
RE— 52A旋转蒸发器
⒇⒇ [作者简介 ]　庄丽 ( 1970- ) ,女 ,新疆师范大学 2000级硕士研究生 ;惠寿年 ( 1941- ) ,男 ,新疆师范大学教授 ;彭子模 ( 1939- ) ,男 ,新疆师范大学教授。
[收稿日期 ]　 2002. 11. 12
离心机
分样筛
2　实验方法
2. 1　水提法
分别称取 5份细穗柽柳茎叶粉末 ,每份均 5g。各加 10倍和 6倍蒸馏水 (即 50ml和 30ml )于 50℃、 60℃、
70℃、 80℃、 90℃进行温浸提取两次 (分别为 1h和 0. 5h ) ,合并两次滤液 ,离心 ,浓缩 ,然后于 50ml容量瓶定
容 ,测定其吸光度值。
2. 2　醇提法 [4- 5 ]
2. 2. 1　用不同浓度的乙醇进行提取
分别用 20%、 40%、 60% 、 80%的乙醇 ,以 60%为 1倍量对干燥细穗柽柳粉末 10g进行加热回流提取
1h,将滤液离心、浓缩 ,然后于 50ml容量瓶定容 ,测定其吸光度值。
2. 2. 2　用不同溶媒量的乙醇进行提取
分别用 1、 2、 3、 4倍量的 40%乙醇 (即 60ml、 120ml、 180ml、 240ml )对细穗柽柳粉末 10g进行加热回流提
取 1h,滤液离心、浓缩后于 50ml容量瓶定容 ,测定其吸光度值。
2. 2. 3　用相同浓度 ,相同溶媒量的乙醇提取不同的时间
分别用 2倍量的 ( 120ml ) 40%的乙醇对细穗柽柳粉末进行加热回流提取 1h、 2h、 3h、 4h ,滤浓缩后于
50ml容量瓶定容 ,测量其吸光度值。
2. 3　碱提法 [6 ]
分别取 5g干燥细穗柽柳粉末 4份 ,在 60℃恒温水浴中分别以 P H值为 8、 9、 10、 11的碱溶液 (溶媒量分
别为 10倍和 6倍 ,即 50ml和 30ml )温浸提取 2次 , (分别为 1h和 0. 5h ) ,合并两次滤液 ,离心浓缩后于 50ml
容量瓶定容 ,测定吸光度值。
2. 4　用不同方法提取
取细穗柽柳粉末 3份各 5g ,每份均在 50ml和 30ml的溶媒量、 60℃恒温水浴的条件下 ,分别以蒸馏水、
40%乙醇、P H为 10的碱溶液作溶媒 ,提取 ,合并两次滤液并离心浓缩 ,于 50ml容量瓶定容 ,测定其吸光度
值。
2. 5　提取工艺优化
根据不同浓度的乙醇、不同的溶媒量以及提取时间等因素对醇提法进行了五因素四水平的实验设计 ,选
择最佳提取工艺。
3　结果与分析
3. 1　水提法的提取效果
结果如表 1所示:
表 1　水提法的提取效果
温度 (℃ ) 50 60 70 80 90
吸光度值 3. 3487 3. 3678 3. 3787 3. 3797 3. 801
　　从表 1可见: 随着温度的升高 ,提取效果也相应提高。但考虑到温度过高有可能破坏材料中的某些有效
成分 ,因此 ,最后采用 60℃的温度条件。
3. 2　醇提法的提取效果
·47·第 1期 庄　丽等　　细穗柽柳中黄酮化合物提取方法的研究
结果如表 2～ 4所示:
表 2　不同乙醇浓度对提取效果的影响
乙醇浓度 (% ) 20 40 60 80
吸光度 3. 3363 3. 3893 3. 3072 3. 2832
表 3　不同溶媒量对提取效果的影响
溶媒量 (倍 ) 1 2 3 4
吸光度 3. 4045 3. 4377 3. 5513 3. 5517
表 4　不同时间对提取效果的影响
时间 (h ) 1 2 3 4
吸光度 3. 4056 3. 4377 3. 4379 3. 4277
　　从表 2可见:在溶媒量和提取时间一致的情况下 , 40%乙醇的提取效果比较好 ,以后随着乙醇浓度的增
大 ,吸光度却反而下降了。之所以会出现后面的情况 ,很可能是由于乙醇浓度过高时 ,某些脂溶性物质溶出也
增多 ,干扰因素也随之增加 ,给提纯带来了困难之故。
从表 3可见: 不同溶媒量的提取效果中 ,以 3倍溶媒量为最好。虽然 4倍溶媒量的提取效果和 3倍溶媒
量的提取效果相差无几 ,但从节约提取剂的角度考虑 ,理应选择 3倍溶媒量进行提取为佳。
从表 4可见: 用相同浓度 ,相同溶媒量的乙醇回流提取不同的时间 ,则以 2h- 3h的提取效果为最佳。如
果时间过短 ,则不利于有效成分的充分溶出 ,但往后随着时间的增加 ,吸光度却反而下降。我们推测可能是回
流时间太长 ,有部分乙醇挥发 ,导致沸点增大 ,从而破坏了某些有效成分之故。
结果如表 5所示:
表 5　碱提法的提取效果
P H值 8 9 10 11
吸光度值 3. 3595 3. 3536 3. 4841 3. 3363
　　从表中可以看出: P H为 10时的提取效果最好。碱性太强 ,可能会破坏材料中的某些有效成分。
3. 4　不同提取方法的比较
结果如图 1所示:
图 1　不同提取方法对提取效果的影响
从图 1可见: 以蒸馏水作为提取剂时 ,提取液的吸光度值为 3. 3841,其效果最差 ;以乙醇作为提取剂时 ,
提取液的吸光度值为 3. 4897,效果最好 ;以碱作为提取剂时 ,提取液的吸光度值为 3. 4081,居中。为此 ,我们
初步选用了乙醇作为提取剂 ,再进一步作五因素四水平的正交实验。
3. 5　提取工艺的筛选优化
对醇提法进行了五因素四水平的正交实验设计:
从表 6的实验结果及方差分析可知:醇提取的最佳提取条件为 A2B4C3D2 ,即用 3倍量 40%的乙醇在
60℃时提取 2h为最佳条件。
·48· 新疆师范大学学报 (自然科学版 ) 2003年
表 6　 L16( 45 )的醇提法正交实验结果及分析
乙醇 提取 溶媒量 提取 吸光
浓度 (% ) A 温度 (℃ ) (倍 ) 时间 (h ) 度值
1 2 3 4 5
1 1( 20) 1( 50) 1( 1) 1 1 3. 3262
2 1( 20) 2( 50) 2( 2) 2 2 3. 3274
3 1( 20) 3( 50) 3( 3) 3 3 3. 3312
4 1( 20) 4( 50) 4( 4) 4 4 3. 3630
5 2( 40) 1( 60) 1( 2) 3 4 3. 3578
6 2( 40) 2( 60) 2( 1) 4 3 3. 3642
7 2( 40) 3( 60) 3( 4) 1 2 3. 3756
8 2( 40) 4( 60) 4( 3) 2 1 3. 3893
9 3( 60) 1( 70) 1( 3) 4 2 3. 3172
10 3( 60) 2( 70) 2( 4) 3 1 3. 3086
11 3( 60) 3( 70) 3( 1) 2 4 3. 2980
12 3( 60) 4( 70) 4( 1) 12 3 3. 3184
13 4( 80) 1( 80) 1( 4) 1 3 3. 2832
14 4( 80) 2( 80) 2( 3) 4 4 3. 2016
15 4( 80) 3( 80) 3( 2) 3 1 3. 3320
16 4( 80) 4( 80) 4( 1) 2 3. 2758
4　结论
4. 1　分别以蒸馏水、乙醇和碱溶液作为提取剂 ,提取新疆柽柳中的黄酮类化合物的结果显示 ,以醇提取法的
提取效果最佳。
4. 2　从醇提取法的五因素四水平的正交实验得出: 40%的乙醇 , 3倍溶媒量、 60℃温度条件下 ,提取 2h为最
佳提取条件。
参考文献
1　张德权 .生物类黄酮的研究应用概况 .食品与发酵工业 , 1999, 25( 6): 52— 57
2　庄向平 .银杏叶中黄酮含量的测定和提取方法 .中草药 , 1992, 23( 3): 122— 124
3　唐孟成 .春秋桑叶中黄酮类化合物含量及提取方法比较 .浙江农业大学学报 , 1994, 22( 4): 394- 398
4　郭建平 .葛根总黄酮不同提取工艺的探讨 .中草药 , 1995, 26( 10): 522
5　徐任生 ,陈仲良 .中草药有效成分提取与分离 .上海:上海科技出版社 , 1983
6　丁利君 .金银花中黄酮类物质最佳提取工艺的研究 .食品科学 , 2002, 23( 2): 63
The Extracting of Flanonoids from Tamarix Leptostachgs Bgt
Zhuang Li　Hui shou nian　Pen Zi mo
( The School of Li fe and Environment Sciences ,X injiang Normal University 830054)
Abstract　 The Optimum ex tracting process o f f lav onoids in Tamarix Loptostachg s Bg t. w as investi-
ga ted by using normal experiment on the basis o f the comparison of three ex tracting methods, w hich used
w ater、 ethanol、 aikali as solv ent respectiv ely. The results show ed that 3: 1 of 40% alcohol to Tamarix Lep-
tostachg s Bg t. w eigh tr tio, ex t raction fo r 2h w ere optimal.
Key words　 Tamarix Lopto stachgs Bg t.　 Flavonoids　 Normal experiment Ex traction method
·49·第 1期 庄　丽等　　细穗柽柳中黄酮化合物提取方法的研究