全 文 ： 2007, Vol. 28, No. 09 食品科学 ※工艺技术332
收稿日期：2007-07-27 *通讯作者
作者简介：古丽巴哈尔·阿巴拜克力(1969-)，女，讲师，在职硕士研究生，研究方向为植物有效成分分析。
新疆长穗柽柳总黄酮提取工艺研究
古丽巴哈尔·阿巴拜克力1，阿不都拉·阿巴斯2,*
(1.新疆师范大学生命科学与化学学院，新疆 乌鲁木齐 830054；
2.新疆大学生命科学与技术学院，新疆 乌鲁木齐 830046)
摘 要：新疆长穗柽柳中含有黄酮类化合物，本实验采用分光光度法，以芦丁为标准样品测定长穗柽柳茎中的
总黄酮的含量，结果表明黄酮类化合物的最佳提取工艺为：乙醇浓度40%、提取时间1h、固液比1:50、提取
温度80℃。实验结果可能为今后长穗柽柳资源的开发利用提供重要的理论依据。
关键词：长穗柽柳；总黄酮；分光光度法；提取工艺
Study on Extraction Technology of Total Flavonoids Conte ts inTamarix elong teLdb.
GULIBAHAER Ababaikeli1，ABDULLA Abbas2,*
(1.College of Life Science and Chemistry, Xinjiang Normal University, Urumqi 830054, China；
2.College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830046, China)
Abstract ：T marix elongate Ldb. contains flavonoid. In this test the total flavonoids contents are assayed by using
spectroscopic methods with rutin as standard.The results showed that the optimum extracting conditions are 40% ethanol
with 1:50 solid liquidratio and heated at 80 ℃ for an hour. The result can provide important theoretical basis for exploitation
of Tamarix elongate Ldb resources.
Key words：Tamarix elongate Ldb.；t tal flavonoids；spectroscopic methods；extraction technology
中图分类号：O623.54 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2007)09-0332-04
长穗柽柳(Tamarix elongate Ldb.)为柽柳属的一种，
是我国西北沙漠地区最为常见的植物之一。多为灌木或
小乔木，高1～5m。花期一般为4～5月，果期为6～
7月。喜光、耐旱、耐盐碱，是一种珍贵的固沙造林
及水土保持树种[4]。自古以来在新疆柽柳花主要作为染
料使用，可将布料、皮革染成红、黄及棕色。叶花
不仅是骆驼和羊的极好养料，而且长期以来在维吾尔医
学中就作为药物使用，有清热解毒，利尿之功效。主
治麻疹难透、风疹自痒、感冒、风湿骨痛等。还具
有止咳、抑菌、抗炎、镇痛和退热作用。
目前，国内外有关长穗柽柳茎中黄酮类化合物提取
方法的报道不多，本实验利用不同浓度乙醇浸提，探
讨新疆地产药用植物——新疆长穗柽柳茎中黄酮类化合
物的最佳提取工艺，为开发和利用长穗柽柳中有效成分
提供理论依据。
1 材料与方法
1.1材料
长穗柽柳 新疆叶城县沙漠边缘。
1.2试剂
芦丁(Rutin)对照品、亚硝酸钠、氢氧化钠、硝酸
铝、三氯化铁、无水乙醇、镁粉均为分析纯。
1.3仪器
DF310A型粉碎机 江苏省南通友邦机械有限公司；
DZKW型电热恒温水浴锅 北京市永光明医疗仪器厂；
722N可见光光度计 上海精密科学仪器有限公司；HC-
TP11-1架盘药物天平 上海精科天平公司；DHG-9240A
型电热恒温鼓风干燥箱 上海一恒科学仪器有限公司；
TDL-60B台式离心机 上海安亭科学仪器厂；电子天
平(0.1mg/200g) Sartorius公司。
1.4黄酮含量测定原理及鉴定方法
1.4.1测定原理
黄酮类化合物主要包括黄酮苷和黄酮醇苷两大部
分，三氯化铝与黄酮类化合物作用后，生成黄酮的铝
盐化合物，呈黄色，颜色的深浅与黄酮的含量成一定
的比例关系，可以定量测定。
1.42黄酮类物质的鉴定方法
1.4.2.1金属盐类试剂的络合反应
333※工艺技术 食品科学 2007, Vol. 28, No. 09
(1)盐酸-镁粉反应
在样品液中加入少量镁粉，再滴加1～2滴浓盐酸，
在沸水溶液中加热3 min，观察反应结果。
(2)三氯化铁显色反应
将样品液滴于滤纸上，并滴加5% FeCl3指示剂，观
察反应结果。
(3)铝盐反应
在样品液中滴加1% AlCl3溶液，观察反应结果。
(4)中性醋酸铅沉淀反应
在样品液中逐滴加入1%醋酸铅溶液，观察反应
结果。
1.4.2.2碱性试剂显色反应
在样品液中加入5% NaNO2溶液；摇匀，旋转5min
后，加入等体积10% Al(NO3)3溶液，6min后再加入1mol
NaOH溶液，混匀，用蒸馏水稀释，观察反应结果。
1.4.2.3在样品液中加入浓硫酸观察反应结果。
1.4.3单因素试验
1.4.3.1用不同浓度的乙醇进行提取
分别用20%、40%、60%、70%、80%的乙醇以
50ml为一倍量对干燥细穗柽柳粉末5g进行加热提取1h，
将滤液离心、浓缩，然后于50ml容量瓶定容，测定其
吸光度。
1.4.3.2用不同溶媒量的乙醇进行提取
分别用1、2、3、4、5倍量的40%乙醇(即50、
100、150、200、250ml)对干燥细穗柽柳粉末5g进行加
热回流提取1h，滤液离心、浓缩，然后于50ml容量
瓶定容，测定其吸光度。
1.4.3.3用相同浓度相同溶媒量的乙醇提取不同的时间
分别用一倍量(即50ml)40%的乙醇对干燥长穗柽柳
粉末进行加热提取0.5、1、2、3、4h，将滤液离心、
浓缩，然后于50ml容量瓶定容，测定其吸光度。
1.4.3.4分别称取五份干燥长穗柽柳粉末，每份均为
5g，各加一倍40%乙醇(即50ml)于50、60、70、80、
90℃进行温浸提取1h，滤液离心、浓缩，然后于50ml
容量瓶定容，测定其吸光度。
1.4.4黄酮类化合物含量测定
1.4.4.1标准溶液的配制
精确称取10mg经120℃烘干至恒重的芦丁标准品，
用体积分数30%乙醇溶解并定容至50ml即为标准液。
1.4.4.2样品溶液的制备
准确称取样品2g，以乙醇为溶剂，用最佳条件进行
提取，将滤液离心、浓缩，然后于50ml容量瓶中定容。
1.4.4.3测定波长的选择
分别取标准溶液和样品溶液1ml，置于10ml容量瓶
中，加入0.3ml 5% NaNO2，摇匀，放置6min后加入
0.3ml 10% Al(NO3)3，放置6 min再加入4ml 1mol/L NaOH
溶液，混匀，用30%乙醇稀释至刻度，同时作空白对
照，15min后测定波长400～600nm区段的吸光度，得
知芦丁最大吸光度在510nm，因此分光光度法选测定波
长为510nm。
1.4.4.4标准曲线的制作和回归方程的建立
①标准曲线的制作
精密量取标准溶液0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、
3.0ml于7只10ml容量瓶中，再分别加入0.3ml 5% NaNO2，
摇匀，放置6min后加入0.3ml 10% Al(NO3)3，摇匀，
6min后再加入4ml 1mol/L的NaOH溶液，混匀，用30%
乙醇稀释至刻度，15min后于波长510nm处测定吸光度，
0.0ml为空白对照，测得不同浓度下的吸光度。以标准
溶液浓度(N)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标作标准曲
线。见表1。
②回归方程的建立
用最小二乘法作线性回归方程
a=n∑(xy)－∑x·∑y/n∑x2－(∑x)2
b=∑x2·∑y－∑xn∑(xy)/n∑x2－(∑x)2
A=aN+b
1.4.4.5样品中黄酮含量测定
NV
总黄酮含量(%)=———×100
W
式中，N为样品液的浓度(mg/ml)；V为样品液体
积(ml)；W为称取样品的重量(mg)。
按标准曲线的制作方法精密量取样品溶液0.0、
1.0ml于10ml容量瓶中，再分别加入0.3ml 5% NaNO2，
摇匀，放置6min后加入0.3ml 10% Al(NO3)3，摇匀，
6min后再加入4ml 1mol/L的NaOH溶液，混匀，用30%
乙醇稀释至刻度，15min后于波长510nm处测定吸光度，
0.0ml为空白对照，测得不同浓度下的吸光度，根据回
归方程找出样品中总黄酮的浓度，计算得原料中总黄酮
含量。
1.4.4.6正交试验设计
采用L9(34)正交试验设计，进一步考察乙醇体积分
数、固液比、提取温度、提取时间对提取液中总黄酮
含量影响，以确定较佳的总黄酮提取条件。
表1 标准溶液的吸光度
Table 1 Standard rutin concentration absorbance
标准溶液浓度
(mg/ml)
0.00.010.020.030.040.050.06
吸光度 0.00.109.1960.2560.3800.4410.483
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将2.00g粉碎的长穗柽柳茎部按正交试验进行浸取，
将滤液离心、浓缩，然后于50ml容量瓶定容，用移液
管准确吸取1ml，放入10ml容量瓶中，按芦丁溶液标准
曲线的绘制步骤进行操作，测定吸光度，按回归方程
计算出总黄酮含量。
2 结果与分析
2.1黄酮类物质的鉴定
显色反应结果见表2，说明新疆长穗柽柳中含有黄
酮类化合物。
2.2单因素试验结果
试验结果表明：当提取时间为1h时，提取效果最
佳，时间过长溶剂的挥发损耗和生成也有变化，所以
时间确定为1h。
2.3标准曲线与回归方程
表2 　显色反应结果
Table 2 Result of color reaction
试剂 盐酸-镁粉 5% FeCl3 1% AlCl3 1%醋酸铅试剂 碱性显色试剂 浓硫酸
现象 血红色，气泡 棕褐色沉淀 黄色 黄褐色沉淀 样品液变为红色 黄色
表3 乙醇浓度对提取效果的影响
Table 3 Effects of ethanol concentration
乙醇浓度(%) 20 40 60 70 80
吸光度 0.3380.6410.4410.4050.395
试验结果表明，在溶媒量温度及时间一致的情况
下，40%乙醇的提取效果比较好，往后随着乙醇浓度
增大，吸光度反而下降，可能是乙醇浓度过高，某些
脂溶性物质溶出也增多，干扰因素也随之增加。
表4 溶媒量对提取效果的影响
Table 4 Effects of mass ratio on extraction
溶媒量(倍) 1 2 3 4 5
吸光度 0.6230.8070.8780.9131.091
试验结果表明，在乙醇浓度温度及浸泡时间一致
时，随料液比的增长提取效果也逐渐上升。
表5 温度对提取效果的影响
Table 5 Effects of temperatures on extraction
温度(℃) 50 60 70 80 90
吸光度 0.4560.4600.4740.5730.378
试验结果表明，50～80℃之间总黄酮含量逐渐上
升，并在80℃达到最大值，随后出现下降趋势，可能
因为持续高温影响某些不稳定的黄酮类化合物，而导致
结构破坏，失去功能等，此最佳温度选为80℃。
表6 提取时间对提取效果影响
Table 6 Effects of time on extraction
时间(h) 0.5 1 2 3 4
吸光度 0.4350.4690.4460.4070.426
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 0.020.040.060.08
A
浓度(mg/ml)
图1 标准曲线
Fig.1 Standard profile of rutin
y=8.2036x+0.0203
R2=0.986
2.4正交试验结果
表6 正交试验结果
Table 6 Results of orthogonal test
试 A B C D 总黄酮
验 乙醇浓度 固液比 提取温度 提取时间 吸光度 含量
号 (%) (g/ml)(℃) (h) (%)
1 A1(40%)B1(30)C1(60)D1(1)0.3941.139
2 A1(40%)B2(40)C2(70)D2(2)0.4361.267
3 A1(40%)B3(50)C3(80)D3(3)0.5371.575
4 A2(60%)B1(30)C2(70)D3(3)0.4271.239
5 A2(60%)B2(40)C3(80)D1(1)0.5121.498
6 A2(60%)B3(50)C1(60)D2(2)0.3661.053
7 A3(80%)B1(30)C3(80)D2(2)0.4151.203
8 A3(80%)B2(40)C1(60)D3(3)0.3871.117
9 A3(80%)B3(50)C2(70)D1(1)0.4831.410
K1 3.98 3.583.3084.046
K2 3.79 3.8823.9163.523
K3 3.73 4.0384.2763.931
K1 1.3271.1931.1031.349
K2 1.2631.2941.3051.174
K3 1.2431.3461.4251.31
R 0.0840.1530.3220.175
从表6可以看出最佳条件为A1B3C3D1，乙醇浓度
40%、固液比1:50、提取温度80℃、提取时间1h。对
提取效果的影响C＞D＞B＞A。
3 结 论
335※工艺技术 食品科学 2007, Vol. 28, No. 09
新疆长穗柽柳中含有黄酮类化合物，以乙醇为提取
剂时，乙醇浓度低时黄酮类物质无法有效溶出，而浓
度逐渐升高时，随着乙醇浓度再增加，黄酮类化合物
的溶解度减小，可能是由于随着乙醇浓度的增加，一
些醇溶性杂质、色素、亲脂性强的成分溶出量增加，
这些成分与黄酮类化合物竞争同乙醇-水分子结合，从
而导致黄酮类化合物的提取率下降。
一般来说，溶剂用量越大，提取率越大，但是，
过大的料液比会造成溶剂和能源的浪费，并给后序工作
带来麻烦，同时增大溶剂量，很有可能把一些不易溶
出的成分提取出来，造成黄酮类化合物的提取率降低。
通常冷提杂质少，热提效率高。温度升高，分子
运动速度加快，渗透、扩散、溶解速度加快，同时
高温可以引起细胞膜结构的变化，使黄酮类化合物由外
层细胞转移到溶剂中。因此，随着提取温度的升高黄
酮类化合物的提取率升高，但是，温度过高可能引起
黄酮类化合物结构被氧化破坏导致其提取率降低，此
外，时间过长溶剂的挥发损耗和生成也有变化。出于
经济、有效的角度考虑乙醇浓度为40%、固液比1:50、
提取温度80℃、提取时间1h时提取效果最佳。按这个
提取条件进行提取时的样本总黄酮含量1.68%。
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