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满山红滴丸的体外抗菌实验



全 文 :第 36 卷 3 期
2014 年 3 月
宁夏医科大学学报
Journal of Ningxia Medical University
根据此前的研究结果,这种溶出度的差异可
能造成生物利用度的差异。因此,制订药品的溶
出度标准时,应该采用尽可能低浓度的表面活性
剂或者有机溶剂。另外,固体制剂的溶出度符合
外国药典的规定并不能保证有良好的生物等效
性。因此,我们建议中国药典应以含 0. 05%十二
烷基硫酸钠的 pH 4. 5 醋酸盐缓冲液为溶出介质
测定尼莫地平片的溶出度。
参考文献:
[1] He ZG,Zhong DF,Chen XY,et al. Development of a
dissolution medium for nimodipine tablets based on
bioavailability evaluation[J]. Eur J Pharm Sci,2004,
21(4):487.
[2] 林永亮. 尼莫地平片溶出度研究[J].国际医药卫
生导报,2007,13(03):59.
[3] 张春燕,顾健,许庭郁,等. 尼莫地平片体外溶出度
与体内吸收的相关性研究[J]. 中国药学杂志,
2005,40(22):1734.
[4] 王宁,陈锋杰,赵语,等. 不同厂家尼莫地平片溶出
度考察[J]. 中国药房,2004,15(8):501.
[5] 戴幼琴,张渝,郭仕华,等. 尼莫地平片体外溶出度
对比研究[J]. 浙江中西医结合杂志,2006,16
(12):747.
[6] 英国药典委员会. 英国药典[S]. 3 卷.二部.北京:
化学工业出版社,2009:2932.
(责任编辑:路锦绣)
文章编号:1674 - 6309(2014)03 - 0353 - 03
·技术与方法·
满山红滴丸的体外抗菌实验
赵承孝, 李建宽, 刘恩荔, 梁泰刚
(山西医科大学药学院,太原 030001)
摘要:目的 测定满山红滴丸的体外抗菌活性。方法 对满山红滴丸对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、福氏
志贺菌等 9 种细菌的最低杀菌浓度(MBC)进行测定。结果 满山红滴丸对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、表
皮葡萄球菌、福氏志贺菌、铜绿假单胞菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、腐生葡萄球菌、乙型溶血性链球菌 9 种
细菌都有较强的杀灭作用,MBC分别为 2. 18、4. 36、17. 44、4. 36、2. 18、8. 72、4. 36、8. 72 和 34. 875mg·mL -1。
结论 满山红滴丸对所选菌种有较广泛的抗菌活性。
关键词:满山红;滴丸;体外抗菌
中图分类号:R285. 5 文献标识码:B
收稿日期:2013 -07 -25
基金项目:山西省科技攻关项目(2006031201 -01)
作者简介:赵承孝(1982 -),男,山西人,讲师,主要从事中药新药
研究。E -mail:zhaochengxiao1982@163. com
通信作者:梁泰刚(1979 -),男,副教授,硕士生导师。
E -mail:ltaigang@gmail. com
满山红为杜鹃花科植物兴安杜鹃的干燥叶
(Rhododendron dauricum L),具有止咳、祛痰、平
喘的作用,主要用于治疗急、慢性支气管炎和哮
喘。作者前期研究发现黄酮类是满山红主要有效
成分,以现代澄清剂 -树脂吸附联用除杂技术对
其有效部位 -总黄酮进行分离纯化,使有效部位
含量稳定在 60%以上[1],并将其开发成为滴丸制
剂。同时证实有效部位不仅保留了满山红的药理
活性,而且活性更强,用药剂量大大减少[2 - 3]。黄
酮类化合物具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤,调节心血
管等多种生物活性,具有改善糖和脂代谢、清除自
由基作用,具有抗菌、抗病毒作用,还可镇痛止泻、
防治溃疡等[4]。对黄酮类成分,如当归总黄
酮[5],藜中黄酮类成分[6]等的抑菌作用已多有报
道。黄酮类成分种类很多,总黄酮的组成情况也
多样,因此,本实验拟探索满山红总黄酮有效部位
所制备的满山红滴丸对金黄色葡萄球菌、大肠埃
希菌、福氏志贺菌等 9 种常见菌种的杀灭作用,评
价其抗菌活性,以利于其在临床上的推广和
应用,。
1 试验材料
1. 1 菌株
金黄色葡萄球菌(26003 - 26)、大肠埃希菌
(44102 - 22)、表皮葡萄球菌(261069 - 5)、福氏
·353·
宁夏医科大学学报
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第 36 卷 3 期
2014 年 3 月
志贺菌(51536 - 2)、铜绿假单胞菌(10104 - 2a)、
肺炎链球菌 (31002 - 16)、流感嗜血杆菌
(58543 - 2)、腐生葡萄球菌(26101 - 19)、乙型溶
血性链球菌(32210 - 20),均由中国药品生物制
品检定所提供。
1. 2 培养基
营养琼脂 (060208)、营养肉汤 (060106)、血
琼脂基础培养基 (060306),均由中国药品生物制
品检定所提供。对于营养条件较高的乙型溶血性
链球菌、肺炎链球菌、表皮葡萄球菌、流感嗜血杆
菌,采用血肉汤和血琼脂培养基,即在营养肉汤和
血琼脂基础培养基中加入 10%新鲜无菌脱纤维
兔血。
1. 3 药物
满山红滴丸:山西医科大学药学院自制,批
号:20050804,用纯化水配成 558mg·mL -1混悬
液,经 121℃、20min 灭菌,备用。本品在水中易
溶;pH值为 4. 95。
盐酸左氧氟沙星注射液,生产厂家:白求恩医
科大学制药厂,规格:5mL(0. 1g),批号:060120。
消咳喘片,生产厂家:哈尔滨泰华药业股份有
限 公 司,规 格:12 片 /板,2 板 /盒。批 号:
20051101,取 3 片研碎,加纯化水至 15mL 配成混
悬液,经 121℃20min灭菌,备用。
菌种复苏将 0. 3mL 营养肉汤培养基加入菌
种安瓿中,混匀;将混匀的菌液吸入 6mL 营养肉
汤或血肉汤中,加复苏菌液 3 ~ 5 环,37℃培养
18 ~ 24h后同前法再次转接种备用。
2 试验方法
2. 1 供试品制备
将 558mg·mL -1的灭菌满山红滴丸用营养
肉汤或血营养肉汤 2 倍稀释法稀释成 279、
139. 5、69. 75、34. 875、17. 44、8. 72、4. 36、2. 18 和
1. 09mg·mL -1梯度浓度。
盐酸左氧氟沙星注射液用灭菌注射用水稀释
成 2 和 1μg·mL -1。
消咳喘片灭菌混悬液使用原液。
2. 2 菌液制备
把各种供试菌种用其适应的固体斜面培养基
分别进行菌种斜面活化,37℃ 24 h。取新鲜培养
物 3 白金耳至 6mL 营养肉汤中,35 ~ 37℃培养
18 ~24h,取此培养液 1mL加 0. 9%无菌氯化钠溶
液 9mL,充分振荡 10 min。采用 10 倍递增法稀释
调整浊度,参考麦氏比浊管制成含菌数 106CFU·
mL -1,备用[7]。
2. 3 试验过程
将满山红提取物各稀释液、盐酸左氧氟沙星
和消咳喘片混悬液,分别置于试管中 1mL /管,每
管加入菌液 0. 1mL,混匀;同时设阴性及菌株对
照,阴性对照加 1mL 肉汤,菌株对照加 1mL 肉汤
及 0. 1mL 菌液,至 37℃培养箱内培养 18 ~ 24h,
将加药管移种于琼脂平皿或血平皿培养基上,培
养 18 ~ 24h,观察培养基中无细菌生长的最低药
物稀释浓度为该药的最低杀菌浓度(MBC),结果
见表 1。
表 1 满山红滴丸体外抑菌试验结果
菌株
药物浓度 /(mg·mL -1)
558 279 139. 5 69. 75 34. 875 17. 44 8. 72 4. 36 2. 18 1. 09
盐酸左氧氟
沙星 /(μg·mL -1)
2 1
消咳
喘片
阴性
对照
菌体
对照
金黄色葡萄球菌 - - - - - - - - - + - - - - +
大肠埃希菌 - - - - - - - - + + - + + - +
表皮葡萄菌 - - - - - - + + + + - - + - +
福氏志贺菌 - - - - - - - - + + - - - - +
铜绿假单胞菌 - - - - - - - - - + - - - - +
肺炎链球菌 - - - - - - - + + + - - - - +
流感嗜血杆菌 - - - - - - - - + + - - + - +
腐生葡萄球菌 - - - - - - - + + + - - - - +
乙型溶血性链球菌 - - - - - + + + + + - - - - +
注:+为有菌生长,-为无菌生长
3 结果
从表 1 可见,满山红滴丸对金黄色葡萄球菌
的 MBC为 2. 18mg·mL -1、对大肠埃希菌的 MBC
为 4. 36mg·mL -1、对表皮葡萄球菌的 MBC 为
17. 44mg · mL -1、对福氏志贺菌的 MBC 为
4. 36mg·mL -1、对铜绿假单胞菌的 MBC 为 2. 18
mg·mL -1、对肺炎链球菌的 MBC 为 8. 72mg·
mL -1、对流感嗜血杆菌的 MBC 为 4. 36mg·
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mL -1、对腐生葡萄球菌的 MBC 为 8. 72mg·
mL -1、对乙型溶血性链球菌的 MBC 为 34. 875
mg·mL -1。
4 讨论
本实验采用稀释法来检测满山红滴丸的抗菌
效果,对所选 9 种常见细菌均有一定的抗菌作用。
由于中药成分比较复杂,抗菌作用很可能是多种
不同有效成分共同作用的结果,抗菌效果还与药
物的浓度、细菌的浓度有直接关系。
近年来由于抗生素的不合理应用,已经造成
越来越多的致病菌广泛的耐药性,致使临床感染
病死率不断增高,尤其是金黄色葡萄球菌的耐药
率已达 90% 以上,同时造成的肠道菌群紊乱,易
加重原发感染[8]。中药的抑菌作用机制不同于
抗生素,不易使细菌产生耐药性,因此从天然产物
中寻找抗菌资源,筛选抗菌药物越来越受到国内
外学者的重视。而满山红滴丸含有多种有效成
分,并且无明显的毒副作用,在临床上具有较大的
应用价值。而且对金黄色葡萄球菌有极强的抗菌
效果,因此,积极探讨该制剂的抗菌作用,以指导
临床合理使用中药协同抗生素治疗细菌感染,对
减少耐药菌株的产生有着积极的现实意义。
关于黄酮类化合物的抑菌机理:酚类物质可
通过破坏细胞壁及细胞膜的完整性,导致微生物
细胞释放胞内成分引起膜的电子传递、营养吸收、
核苷酸合成及 ATP活性等功能障碍,从而抑制微
生物的生长。殷彩霞等指出,酚类化合物及其衍
生物一般呈弱酸性(pH值为 6),能使蛋白质凝固
或变性,具有杀菌和抑菌的作用[9]。黄酮类化合
物的化学结构都属于酚类衍生物,因而也具有以
上的特性,表现一定的抑菌功能。
本文结果论证了满山红滴丸的广谱抗菌作
用,有利于其在临床上的进一步推广和应用,并且
也能为临床疾病的治疗提供一定依据。
参考文献:
[1] 张振杰. 中药满山红的药学研究[D].太原:山西医
科大学,2005.
[2] 赵承孝,杨飞,康永,等.满山红滴丸急性毒性试验
和主要药效学试验[J]. 中国医院药学杂志,2008
(12):973 - 975.
[3] 赵承孝,杨飞,梁泰刚,等.满山红滴丸的平喘抗炎
作用[J].中国药物与临床,2010. 10(7):756 - 759.
[4] Marco KC Hui,William KK Wu,Vivian Y Shin,et al.
Polysaccharides from the root of Angelica sinensis pro-
tect bone marrow and gastrointestinal tissues against
the cytotoxicity of cyclophosphamide in mice[J]. In-
ternational Journal of Medical Sciences,2006,3
(1) :1.
[5] 李谷才,魏文亭,高堂杰,等.当归总黄酮提取及其
体外抑菌活性研究[J]. 时珍国医国药,2011,22
(2):310 - 311.
[6] 刘松艳,张沐新,吴月红,等.藜中黄酮类化学成分
及抑菌效果的研究[J]. 东北师大学报:自然科学
版,2011,43(1):93 - 96.
[7] 袁永成.山楂粗黄酮抗氧化能力及抑菌活性研究
[J]. 农产品加工·学刊,2012,2:53 - 56.
[8] 宋世平,解晓珍,席道友,等. 158 株金黄色葡萄球菌
的耐药性监测与分析[J]. 中华医院感染学杂志,
2003,13(4):384 - 385.
[9] 殷彩霞,谢家敏.茶多酚抑菌抗氧性能研究[J]. 云
南化工,1999,5(2):24 - 26.
(责任编辑:任义芳)
文章编号:1674 - 6309(2014)03 - 0355 - 02
·病例报道·
佐匹克隆引起药物依赖 4 例报道
滑宏巨
(宁夏中医研究院睡眠医学科,银川 750021)
收稿日期:2013 -06 -22
作者简介:滑宏巨,男,学士,副主任医师,主要从事睡眠医学研究。
E -mail:hhjhhj46@163. com
佐匹克隆片属于新型镇静催眠药物,具有镇 静催眠和肌肉松弛作用。该药为速效催眠药,能
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院发现 4 例长期服用佐匹克隆片产生典型药物依
赖[1]的病人,报告如下。
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