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紫花前胡花和根挥发油成分分析与比较



全 文 :收稿日期:2013-12-04; 修订日期:2014-07-12
基金项目:湖南中医药大学校级青年基金(No. 99820001 - 91)
作者简介:鲁曼霞(1984-) ,女(土家族) ,湖南常德人,湖南中医药大学药
学院讲师,硕士学位,主要从事天然药物研究工作.
* 通讯作者简介:刘向前(1967-) ,男(汉族) ,湖南宁乡人,湖南中医药大
学药学院教授,博士学位,主要从事中药和天然药物活性成分研究工作.
紫花前胡花和根挥发油成分分析与比较
鲁曼霞,李丽丽,李 芝,黄玮超,刘向前*
(湖南中医药大学药学院,湖南 长沙 410083)
摘要:目的 研究与比较紫花前胡花和根挥发性成分。方法 采用气相色谱 -质谱(GC - MS)联机分析,并用面积归一化
法分别计算各组分的相对含量。结果 紫花前胡花和根挥发油中分别鉴定出 43 和 40 种成分,分别占挥发油总含量为
89. 15%和 86. 82%。结论 紫花前胡花和根挥发油相同物质共 30 种,主要成分都是 α -蒎烯;但紫花前胡花挥发油成分
中 β -月桂烯、石竹烯和大根香叶烯 D 的含量远远大于根挥发油;且紫花前胡花挥发油中检测到具有抗癌作用的
(-)- β -榄香烯,但其根中未检测出此成分。
关键词:紫花前胡; 紫花前胡花; 气相色谱 -质谱联用分析; 挥发油
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2015. 01. 029
中图分类号:R284. 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2015)01-0074-02
Comparison of Chemical Constituents of Volatile Oils from the flower and root of Peu-
cedaum decursivum (Miq.)Maxim. by Gas
LU Man-xia,LI Li-li,LI Zhi,HUANG Wei-chao,LIU Xiang-qian*
(Pharmacy College,Hunan University of TCM,Changsha,Hunan 410208,China)
Abstract:Objective To investigate and compare the chemical constituents of volatile oils from the flowers and the roots of Peu-
cedaum decursivum (Miq.)Maxim. plants.Methods The oils obtained were analyzed by GC - MS. The relative percentage con-
tents of the constituents were determined by GC with area normalization method. Results There were 43 and 40 compounds repre-
senting 89. 15% and 86. 82% of the oils respectively were identified. Conclusion The composition of volatile oils of flowers and
roots were very similar. There were 30 kinds of identical substances in the oils,and the main component of them was alpha - Pi-
nene. However ,The composition of volatile oils like beta. - Myrcene,Caryophyllene and Germacrene D of flowers were much
more than them of roots. And the (-)- . beta. - Elemene was extracted from the flowers,but not from the roots.
Key words:Peucedaum decursivum (Miq.)Maxim.; The flower of Peucedaum decursivum(Miq.)Maxim.; GC - MS;
Volatile Oils
紫花前胡 Peucedaum decursivum (Miq.)Maxim.(2010 版《中
国药典》收载为伞形科植物)的干燥根。具有降气化痰、散风清
热的药用功效[1]。主要用于治疗风热头痛、痰热咳喘、呕逆、胸
膈满闷等疾病[2]。紫花前胡作为传统中药在方剂学中使用频率
很高,但是只将其根部作为药用部位,从而忽略了其他药用部位
如茎、叶、花的药用价值。目前关于紫花前胡花部挥发油化学成
分的研究报道较少。为了考察紫花前胡花部与根部的挥发油化
学成分是否存在差异,本实验采用 GC - MS技术对二者挥发油进
行测试分析,以峰面积归一化法测定各组分的相对百分含量,并
对比二者挥发油化学成分组成,为扩大紫花前胡药用资源提供参
考依据。
1 材料与仪器
1. 1 药材来源 药材采于湖南长沙,经湖南中医药大学刘向前教授
鉴定为紫花前胡 Peucedaum decursivum (Miq.)Maxim的花和根。
1. 2 仪器与试剂 QP2OlO 气质联用仪(日本岛津公司) ;AB104
~ N分析天平(梅特勒一托利多仪器公司) ;FW177 型中药粉碎
机(天津市泰斯特仪器有限公司) ;220VAC 型型电子调温电热套
(天津市泰斯特仪器有限公司) ;蒸馏器、挥发油测定器、冷凝器;
蒸馏水、环已烷、无水硫酸钠等试剂均为分析纯。
2 方法
2. 1 挥发油的提取 分别取紫花前胡花和根粗粉(过 2 号筛)
50g,置于 500ml圆底烧瓶中,加适量蒸馏水,浸泡 1h。按药典方
法提取 1h 后得具有浓郁香味的黄色挥发油。用无水硫酸钠干
燥,再用移液管加入环己烷 1ml萃取,备检。
2. 2 挥发油的 GC - MS分析
2. 2. 1 色谱条件 选用 DB - 5 石英毛细管柱(30m × 0. 25mm ×
0. 25μm) ;程序升温条件:初始温度 50℃,保持 3min,然后以 5
℃ /min的速度升至 250 ℃,并保持 5 min;气化室温度为 250 ℃;
载气为氦气(99. 99%) ,体积流量 1. 0 ml /min;柱前压为 53. 5
kPa;进样量为 1. 0 μl;分流比为 50∶ 1。
2. 2. 2 质谱条件 电离方式为 EI,电子能量为 70eV,离子源温度
250℃,接口温度 280℃,检测定量为 0. 75KV,质量扫描范围为 50
~ 500amu,分辨率为 2500。
2. 3 样品测定与分析 将挥发油样品进行 GC - MS联用仪分析,
获得挥发油的总离子流色谱图(见图 1 ~ 2) ,分别分离出 60,54
个峰。并且对各组分峰的质谱图经 GC - MS Postrun Analysis 软
件按峰面积归一化法计算各峰面积的相对百分含量。根据 GC -
MS联用仪所得质谱信息经计算机用 NIS107 数据库检索与标准
谱图对照、分析,相似度均在 90%以上,确认了其中的大部分化
学成分。分析鉴定结果见表 1。紫花前胡花挥发油中鉴定出 43
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种成分,占挥发油总含量为 89. 15%;紫花前胡根挥发油中鉴定
出 40 种成分,占挥发油总含量为 86. 82%。
图 1 紫花前胡花挥发油成分的总离子流图
图 2 紫花前胡根挥发油成分的总离子流图
表 1 紫花前胡花和根挥发油成分 GC - MS分析结果
序号 化合物 分子式 保留时间/min
相对含量 /%
花部 根部
1 正己醛(Hexanal) C6H12O 4. 920 - 0. 29
2 异壬烷(Isononane) C9H20 6. 794 - 0. 52
3 壬烷(Nonane) C9H20 6. 852 0. 37 4. 85
4 α -蒎烯(alpha. - Pinene) C10H16 7. 553 18. 86 32. 44
5 莰烯(camphene) C10H16 7. 942 0. 27 1. 56
6 (-)- . β -蒎烯( (-)- . beta. - Pinene) C10H16 8. 583 8. 15 2. 33
7 β -水芹烯(. beta. - Phellandrene) C10H16 8. 881 1. 89 2. 70
8 桧烯(Sabinene) C10H16 8. 942 0. 16 0. 57
9 β -月桂烯(beta. - Myrcene) C10H16 9. 211 3. 82 0. 20
10 α -水芹烯(. alpha. - Phellandrene) C10H16 9. 373 0. 63 1. 65
11 3 -蒈烯(3 - Carene) C10H16 9. 591 - 1. 25
12 对聚伞花素(m - Cymol) C10H14 9. 815 - 0. 25
13 D -柠檬烯(D - Limonene) C10H16 10. 175 1. 48 16. 05
14 柠檬烯 C10H16 10. 470 3. 59 0. 62
15 β -顺式 -罗勒烯(. beta. - cis - Ocimene) C10H16 10. 700 0. 43 -
16 γ -萜品烯(gamma. - Terpinene) C10H16 10. 921 0. 33 0. 76
17 正癸醇(1 - Decanol) C10H22O 11. 307 0. 07 -
18 2,3,3 -三甲基辛烷(Octane,2,3,3 - trimethyl -) C11H24 11. 410 - 0. 52
19 异松油烯(Terpinolene) C10H16 11. 826 0. 18 -
20 正十一烷(Undecane) C11H24 12. 463 - 1. 57
21 十六烷(Hexadecane) C16H34 13. 265 0. 03 -
22 4 -松油醇 /萜品醇(4 - Terpineol)C10H18O 14. 808 1. 09 0. 21
23
4 -(异丙基)-
2 -环己烯 -1 -酮
(2 - Cyclohexen - 1 - one,
4 -(1 - methylethyl)-)
C9H14O 15. 002 0. 17 0. 08
24 α -松油醇 /萜品醇(. alpha. - Terpineol) C10H18O 15. 233 0. 21 0. 71
25 百里香酚甲醚(methyl thymyl ether) C11H16O 15. 522 0. 25 1. 01
26 乙酸龙脑酯(Bornyl acetate) C12H20O2 17. 028 0. 32 0. 87
27 十五烷(Pentadecane) C15H32 18. 128 - 0. 27
28 甘香烯(Elixene) C15H24 19. 098 0. 19 -
续表 1
序号 化合物 分子式 保留时间/min
相对含量 /%
花部 根部
29 环异洒剔烯(Cycloisosativene) C15H24 19. 835 - 0. 97
30 依兰稀(Ylangene) C15H24 19. 907 0. 16 0. 67
31 古巴烯(Copaene) C15H24 20. 330 0. 74 -
32 β -波旁烯(. beta. - Bourbonene) C15H24 20. 449 0. 28 0. 12
33 (-)- β -榄香烯( (-)- . beta. - Elemene) C15H24 20. 706 1. 37 -
34 石竹烯(caryophyllene) C15H24 21. 073 16. 23 1. 62
35 β -荜澄茄油萜(. beta. - Cubebene) C15H24 22. 015 0. 87 0. 17
36 大牻牛儿烯(germacrene D) C15H24 22. 501 5. 42 1. 74
37 α -石竹烯(. alpha. - Caryophyllene) C15H24 22. 653 0. 94 3. 85
38 佛术烯(eremophilene) C15H24 22. 711 - 1. 05
39 衣兰油烯(Alpha. - Muurolene) C15H24 22. 998 1. 65 1. 35
40 β -葎草烯 /蛇麻稀(. beta. - Humulene) C15H24 23. 563 0. 23 -
41 α -愈创木烯(. alpha. - Guaiene) C15H24 23. 681 0. 12 -
42 花侧柏烯(cuparene) C15H22 23. 790 0. 09 0. 08
43 大根香叶烯 D(Germacrene D) C15H24 23. 851 12. 98 0. 35
44 异喇叭烯(Isoledene) C15H24 24. 217 0. 78 -
45 δ -杜松烯(. delta. - Cadinene) C15H24 24. 370 0. 86 1. 31
46 α -花柏烯(. alpha. - Chamigrene) C15H24 24. 468 0. 06 0. 15
47 α -依兰烯(. alpha. - Ylangene) C15H24 24. 637 0. 91 -
48 氧化石竹烯(Caryophyllene oxide) C15H24O 24. 894 0. 75 0. 15
49 斯巴醇(Spathulenol) C15H24O 25. 663 0. 14 0. 12
50 库贝醇(Cubenol) C15H26O 26. 842 1. 05 -
51 正戊醇(1 - pentadecanol) C15H32O 26. 978 - 0. 41
52 α -杜松醇(. alpha. - Cadinol) C15H26O 27. 133 0. 91 -
53 2 -萘甲醚(Oxacyclotridecan - 2 - one) C12H22O2 27. 959 - 1. 43
54 桧脑 /杜松脑(Juniper camphor) C15H26O 28. 335 0. 12 -
3 结论
紫花前胡花部和根部的挥发油总量花大于根,而且花部的挥
发油所含化合物种类多于根部。二者挥发油成分很相似,其中相
同的物质共有 30 种,倍半萜烯类及其含氧衍生物居多,如 α -蒎
烯、β -蒎烯、莰烯、斯巴醇、β -月桂烯、石竹烯、β -水芹烯和大
根香叶烯 D等。
其中紫花前胡花部中主要成分是 α -蒎烯(18. 86%)、石竹
烯(16. 23%)和大根香叶烯 D(12. 98%)。紫花前胡根中主要成
分是 α -蒎烯(32. 44%) ,与文献中报道相符[3]。其次是 D -柠
檬烯(16. 05%) ,这与文献报道的柠檬烯和爱草脑有差别[4,5]。
本样品中未检出爱草脑(estragole)和冰片基氯,与文献报道有差
别[3]。由于各药材的产地、气候、土壤等环境条件对植物生长有
很大影响,所以鉴定出来的挥发油成分及含量存在一定的差异。
紫花前胡挥发油成分大多具有抗菌消炎、祛痰止咳和镇静安
神等良好的生理活性,能够在医药领域里得到广泛应用[6]。如 α
-蒎烯具有明显的镇咳和祛痰作用,并有抗真菌作用;β -蒎烯
是生产维生素 E等的重要原料之一;大根香叶烯 D 和石竹烯具
有平喘作用,是治疗老年性慢性支气管炎的有效成分之一;β -
榄香烯为国产抗癌新药,基础与临床试验均表明其具有较强的抗
肿瘤作用,抗癌谱广,对多种肿瘤细胞有直接杀伤作用,是一种具
有广泛应用前景的抗癌新药;在紫花前胡花挥发油成分中 β -月
桂烯、石竹烯、大根香叶烯 D的含量远远大于其在根挥发油中的
含量。由此可见,紫花前胡花挥发油在镇咳、祛痰与平喘方面具
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 26 NO. 1 时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 1 期
有与根部挥发油同样的药效,并且在治疗慢性支气管炎方面更优
于根部。在紫花前胡花中检测到具有抗癌作用的(-)- β -榄
香烯,但紫花前胡根中未检测到此成分。这进一步证实了紫花前
胡花极具有开发价值。
参考文献:
[1] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].上海:上海
科学技术出版社,2000:1008.
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HPLC法测定[J]. 湖南中医药大学学报,2010,30(6) :93.
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分析[J]. 湖南中医药大学学报,2010,30(5) :26.
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分[J]. 中草药,2003,34(10) :883.
[5] 兰玉坤,聂金嫒,李志良. 紫花前胡挥发油的多种组分的结构表征
及其保留时间的估计和预测[J]. 精细化工,2004,21(5) :342.
[6] 李丽丽,刘向前,张晓丹. 当归属植物研究进展[J]. 中成药,
2009,31(4) :601.
收稿日期:2014-03-11; 修订日期:2014-08-06
基金项目:重庆市教委科技项目(No. KJ120322)
作者简介:段 恒(1977-) ,女(汉族) ,重庆人,重庆医科大学副教授,博士
学位,主要从事中医药调控女性生殖研究工作.
* 通讯作者简介:周 滢(1978-) ,女(汉族) ,贵州贵阳人,重庆医科大学
副教授,博士学位,主要从事药剂学研究工作.
不同补肾复方对小鼠卵细胞质量的影响
段 恒1,2,周 滢1,2*
(1.重庆医科大学中医药学院,重庆 401331; 2.重庆医科大学中医药研究室,重庆 400016)
摘要:目的 探讨不同补肾复方补益肾气为主之毓麟珠、滋养肾阴为重之养精种玉汤、温补肾阳为要之温胞饮在体外受精
-胚胎移植过程中对小鼠卵细胞质量的影响。方法 将 KM小鼠随机分为 5 组,对照组和激素组给予蒸馏水灌胃 10 g·
kg -1,毓麟珠组、养精种玉汤组和温胞饮组分别给予毓麟珠浸膏相当于生药 16 g·kg -1、养精种玉汤浸膏相当于生药 10 g
·kg -1、温胞饮浸膏相当于生药 13 g·kg -1,每日 1 次,连续 15 d。最后 1 次给药后,激素组腹腔注射 PMSG 10U /只,中药
各组、对照组注射等量生理盐水。48h后腹腔注射 HCG 10U /只。观察小鼠排卵情况及卵细胞形态和体外受精及卵裂情
况。结果 激素组可增加小鼠排卵数 /个(34. 30 ± 11. 64) ,各中药组较对照组、激素组卵细胞正常率高 /个(%) [89
(76. 07) ,80(76. 19) ,83(75. 45%)vs 48(57. 83) ,188(54. 81) ],P < 0. 05 或 P < 0. 01;各中药组较激素组受精率 /个(%)
[47(40. 17%) ,42(40. 00) ,43(39. 09)vs 71(20. 70) ]、卵裂率 /个(%) [22(46. 81) ,19(45. 24) ,19(44. 19)vs 19
(26. 76) ]、卵裂球正常率 /个(%) [19(86. 36) ,16(84. 21) ,16(84. 21)vs 13(68. 42) ]均高(P < 0. 05 或 P < 0. 01)。结论
不同补肾复方补益肾气为主之毓麟珠、滋养肾阴为重之养精种玉汤、温补肾阳为要之温胞饮均可促进小鼠卵细胞成熟,
并能改善卵细胞质量。毓麟珠作用尤为显著。
关键词:补肾复方; 卵细胞质量; 体外受精; 小鼠
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2015. 01. 030
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2015)01-0076-02
当今不孕症在影响人类生活与健康之疾病中位居前三。源
自《景岳全书》及《傅青主女科》之毓麟珠、养精种玉汤、温胞饮均
可用于肾虚不孕的治疗,分别为治疗肾气虚、肾阴虚及肾阳虚不
孕的代表方。本研究旨在评价不同补肾复方补益肾气为主之毓
麟珠、滋养肾阴为重之养精种玉汤、温补肾阳为要之温胞饮在体
外受精 -胚胎移植(IVF - ET)过程中对小鼠卵细胞质量的影响,
以反映中医“肾主生殖”理论在辅助生殖技术(ART)中的指导价
值,为 ART开拓新思路、新途径。
1 材料与仪器
1. 1 动物 雌性清洁级 KM小鼠 50 只,体质量 22 ~ 26 g,雄性清
洁级 KM小鼠 10 只,体质量 30 ~ 35 g,购自重庆医科大学动物实
验中心。实验动物使用许可证号 SCXK(渝)2007 - 0001。
1. 2 药物 毓麟珠浸膏含生药 2. 4 g·mL -1、养精种玉汤浸膏含
生药 1. 5 g·mL -1、温胞饮浸膏含生药 2. 0 g·mL -1,水浸出物,
由重庆医科大学中医药学院中药教研室提供,批号 20111022;孕
马血清促性腺激素(PMSG) ,1000IU /支,宁波市三生药业有限公
司生产,批号 20110222;人绒毛膜促性腺激素(HCG) ,1000IU /
瓶,上海生物化学制药厂生产,批号 111220。
1. 3 主要试剂和仪器 Olymbus SZX9 体视显微镜、GIBCO M199
培养液、HERAEUS BB5O6O培养箱、Olymbus BX40 光学显微镜。
2 方法
2. 1 分组及给药 将 22 ~ 26g 雌性小鼠 50 只随机分为 5 组,每
组 10 只。对照组和激素组给予蒸馏水灌胃 10 g·kg -1,毓麟珠
组、养精种玉汤和温胞饮组组分别给予毓麟珠浸膏相当于生药
16 g·kg -1、养精种玉汤浸膏相当于生药 10 g·kg -1、温胞饮浸膏
相当于生药 13 g·kg -1,均相当于成人剂量的 6. 25 倍灌胃,每日
1 次,连续 15 d。最后一次给药后,激素组腹腔注射 PMSG 10U /
只,中药各组、对照组注射等量生理盐水,48 h 后 50 只小鼠同时
腹腔注射 HCG 10U /只。
2. 2 检测指标及方法
2. 2. 1 小鼠排卵计数与卵细胞形态观察 注射 HCG16h 后颈椎
脱臼处死小鼠,取出输卵管,体视镜下划破输卵管膨大部,收集卵
细胞,计数正常(卵细胞胞浆饱满,颗粒细胞均匀分布)与异常
(卵细胞胞浆不饱满,颗粒细胞不均匀分布)卵子数目,评价卵细
胞形态。
2. 2. 2 小鼠体外受精与卵裂情况观察 雄性小鼠颈椎脱臼处死,
置附睾于培养液中,划破并挤压附睾释出精子,转移到培养板中,
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