全 文 ：银叶杜鹃 （Rhododendron argyrophyllum）属杜鹃花科
（Ericaceae）杜鹃花属（Rhododendron），为常绿小乔木，自然
生长于四川西部、贵州及云南东北部海拔 1 300～2 000 m 的
森林中。银叶杜鹃分枝细密，株形紧凑，花繁叶茂，无需人工
整形即成自然圆球形，具有极高的商业开发价值，是杜鹃花
属植物中的珍品。银叶杜鹃一般通过种子、扦插、压条等方
式繁殖，但繁殖系数低，繁殖速度慢，且生根困难。组织培养
能大大提高银叶杜鹃的繁殖速度，且能提高其观赏和商业
价值 [1]。
能否有效控制污染是组织培养的关键技术之一 [2-3]。银
叶杜鹃的茎尖属于带苞片的芽，该类型外植体带有内生菌
和外生菌，污染较难控制。因此，本研究对银叶杜鹃在组织
培养过程中的污染控制问题进行了系统的研究。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验材料取自宜宾职业技术学院农业科技园三年生银
叶杜鹃苗。取材时间为 2014 年 3—5 月。
1.2 试验方法
外植体消毒预处理所取茎尖，采用无菌水冲洗 2 次后，
用 0.1％ HgCl2浸泡，再用无菌水冲洗 5～6 次进行消毒处理；
对种子用 70％酒精浸泡 30 s 后，用 0.1％ HgCl2浸泡，最后再
用无菌水冲洗 5～6次来进行消毒预处理。
1.3 数据统计方法
在不同的取材时间每月分 3 次进行试验，每个时间的
试验重复 3 次，接种培养后，在 4 周内对材料污染率、褐变
率及启动率进行观察统计，结果取平均值。计算公式如下：
污染率（%）=污染数/接种总数×100
褐变率（%）=褐变数/未污染总数×100
死亡率（%）=死亡数/未污染总数×100
2 结果与分析
2.1 外植体种类选取对成活结果的影响
外植体种类的选取应本着污染少易启动的原则，一般
仅限于茎尖，但试验中因素错综复杂，本次试验在 3 月选取
了银叶杜鹃的茎尖、种子、叶片进行对比，结果见表 1。
外植体的选取应尽量选取新生部位以及胚、种子等作
为外植体进行培养，可减少携带内生菌的几率。从表 1 可以
看出，在选用银叶杜鹃不同部位外植体进行组织培养中，
以茎尖作为外植体，其污染率最低，仅为16.7%。
银叶杜鹃组织培养中污染控制研究
李俊强 林利华
（宜宾职业技术学院生物与化工系，四川宜宾 644003）
摘要 于不同时间取不同部位的三年生银叶杜鹃，采用 HgCl2消毒方法对其外植体进行处理。结果表明：不同取材部位、时间及 HgCl2
消毒时间对银叶杜鹃污染控制的难度不同。在 3 月上旬取三年生银叶杜鹃的茎尖建立无菌体系，用 HgCl2对银叶杜鹃进行消毒处理 10 min
的污染率控制最低。
关键词 银叶杜鹃；组织培养；污染控制；消毒
中图分类号 S685.21；Q943.1 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2015）21-0159-01
作者简介 李俊强（1976-），男，四川兴文人，博士，副教授，从事植物
生物技术方向的教学与科研工作。
收稿日期 2015-09-18
部位 接种数∥个 污染数∥个 褐变数∥个 死亡数∥个 污染率∥% 褐变率∥% 死亡率∥%
茎尖 60 10 15 15 16.7 30.0 30.0
种子 60 14 18 20 23.3 39.1 43.5
叶片 60 18 13 16 30.0 31.0 38.1
表 1 不同部位外植体对银叶杜鹃成活的影响
2.2 取材时间对外植体污染控制的影响
试验选择 3 月上、中、下旬及 4 月上、中、下旬和 5 月
上、中、下旬共计 9 个时间段进行重复试验，建立银叶杜鹃
组织培养的无菌系，结果见表 2。
外植体的取材时间对污染的控制有显著的影响。从表 1
可以看出，从 3 月上旬至 5 月下旬，污染率呈上升趋势，而 3
月上旬污染率最低，为取材最佳时间。
2.3 HgCl2消毒时间对消毒结果的影响
在植物组织培养过程中，HgCl2是无菌系建立所使用的
最理想的消毒剂。但是 HgCl2剧毒，处理时间过长易导致植
取材时间 接种数∥个 污染数∥个 褐变数∥个 死亡数∥个 污染率∥% 褐变率∥% 死亡率∥%
3 月上旬 60 5 10 12 8.3 18.2 21.8
5 月下旬 60 22 25 25 36.7 65.8 65.8
3 月中旬 60 8 12 13 13.3 23.1 25.0
3 月下旬 60 15 15 15 25.0 33.3 33.3
4 月上旬 60 21 21 18 35.0 53.8 46.2
4 月中旬 60 22 22 20 36.7 57.9 52.6
4 月下旬 60 15 22 24 25.0 48.9 53.3
5 月上旬 60 20 25 24 33.3 62.5 60.0
5 月中旬 60 18 24 20 30.0 57.1 47.6
表 2 不同取材时间对银叶杜鹃外植体成活的影响
物组织坏死 ，无法分化 。因此 ，在组织培养过程中 ，调整
（下转第 165 页）
林业科学现代农业科技 2015 年第 21 期
159
（上接第 159页）
HgCl2消毒时间是一个关键环节。筛选出来的外植体先用无
菌水冲洗处理后，进一步进行 HgCl2消毒时间梯度试验，试
验结果见表 3。
本研究表明，在 3—5 月进行银叶杜鹃无菌系的建立
时，对所取茎尖材料以采用 HgCl2处理 10 min 为宜，时间过
长或过短，都会引起污染率和死亡率的增加。
3 结论与讨论
在植物组织培养过程中，污染是很常见的，同时也是一
个难以控制的难题 [4-7]。能否有效控制污染是离体培养是否
成功的关键技术，可通过观察污染情况分析污染原因。选择
合适的污染控制方法就能在一定程度上控制污染。在外植
体的初代培养中，在合适的季节选取适宜的外植体种类，根
据外植体的具体情况选择合适的消毒剂和消毒方法，并进
行适当的预处理，可大大降低污染率。从本次试验中可以看
出，在银叶杜鹃的组织培养过程中，在 3 月上旬选取茎尖作
为外植体进行离体培养，用 HgCl2消毒 10 min，可以将其污
染率控制在最低程度。
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表 3 不同 HgCl2消毒时间对银叶杜鹃外植体消毒
结果的影响
处理时间
min
接种数
个
污染数
个
褐变数
个
死亡数
个
死亡率
%
7 60 12 11 0 0
8 60 10 15 1 2.0
9 60 8 18 3 5.8
10 60 2 15 5 8.6
11 60 5 12 7 12.7
12 60 7 15 10 18.9
污染率
%
褐变率
%
20.0 22.9
16.7 30.0
13.3 34.6
3.3 25.9
8.3 21.8
11.7 28.3
（上接第 160页）
2.3.2 竹蔸生理机能渐逝对肥力吸收的影响。一般地，竹株
砍伐后竹蔸随时间的推移生理机能渐逝，然后木质纤维脱
水干化，最后在细菌的作用下腐烂。竹蔸施肥后，在肥料浓
度对竹蔸吸收肥力的影响与生理机能渐逝过程叠合，形成
合力加速了丧失肥力吸收过程。
2.3.3 竹蔸的构造对肥力吸收的影响。竹蔸由秆柄、秆基和
茎节组成。秆柄很小，一般直径为 1 cm，是植株与鞭根系统
养分、水分和生理机能连结的枢纽；秆基膨大，由茎节压缩，
外壁布满根眼，每个根眼长出 1 根略粗竹根，内腔由竹隔紧
密重叠形成一体，是固定和支撑竹株的基础 [1-3]。竹蔸施肥中
有一个用钢钎打通竹隔的环节，从竹蔸结构可知，一般打通
的竹隔仅是竹蔸上部的竹隔，下部的竹隔坚实，打通相当困
难。因此，在施肥之后，根据上述原理又得到一个结论，竹蔸
施肥实质上就是竹蔸存肥。施肥之后，吸收功能迅速丧失，
而竹蔸则成了名符其实的容器，施入的肥料除了一小部分
外，即使要扩散到土壤之中通过根系吸收的可能性较小，因
为竹蔸腐烂需要 3~4 年时间，此时肥力早已失效。
2.3.4 施肥方法对吸收肥力的影响。合理的竹蔸施肥方法
是降低施肥浓度并与适当的溶剂混合后施用 [4-6]。但是作为
竹蔸，其容量有限，在低浓度条件下能提供的肥力也就相应
有限，在施用矿物质肥的前提下，仍不能有效解决竹林对矿
物质肥大量需求的矛盾。因此，竹蔸施矿物质肥是不适宜的，
而微量元素肥一般采用竹腔针注，而不采用竹蔸施用方法。
3 结论
试验结果表明，竹蔸施肥作用有限，有效率仅 5%~10%，
因此是不可行的，作为已经在我国南方广泛推行的竹蔸施肥
存在盲目性并违背科学性，错误地把竹蔸理解成为一个肥
力吸收器和输送器，并已造成巨大人力物力财力损失。希望
本试验结果能为竹业事业提供一些帮助。
4 参考文献
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140.
需要将容器袋沿着其底部纵向隔开、剔除，随后轻轻将幼苗
放进栽植坑中；再次是培土，要用湿度适宜的土进行填充，
并注意一边填土一边将苗木根周围的土按实，但不要按苗
木根部，培土至与容器袋上沿齐平即可，然后在穴面上铺盖
1层细沙用以保持水分；最后是浇水，如果上山造林后，雨水
充足将可不必人工浇水，倘若造林后天气干旱无雨，则考虑
人工浇水至充足，需注意浇水后覆盖 1层细沙以保持水分。
研究实践结果显示，如果在防沙治沙所扎草方格内定
植苗木，其成活率可达 96.2%，保存率高达 90.3%以上。
3 结语
从柠条的育苗到造林系统阐述了该柠条容器育苗及雨
季造林的技术方法与特点，试验结果表明，该项技术具备育
苗周期短、造林时间长、节约土地、成本低、成活率高等优
势，通过容器袋育苗可实现储蓄水分、根系健壮完整的目的，
在北沙窝林场治沙区造林成活率达到 91.6%，保存率高达
86.4%以上，实现了就地育苗和就地造林的效果，为防沙治
沙、人进沙退提供了重要途径。
4 参考文献
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李国才等：柠条容器育苗及其雨季造林技术
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