全 文 ：亮毛杜鹃组织培养技术探索＊
梁晓华 , 　徐成东 , 　谢美华 , 　胡晓安
(楚雄师范学院 ,云南楚雄 675000)
摘　要:　亮毛杜鹃组织培养研究过程中 , 遇到的首要问题是不易成活。因此 , 在前期工作的基础上 , 进
一步研究了不同激素配比及浓度对亮毛杜鹃的成活率及生长势的影响 , 通过在两种激素配比下生长素
种类及浓度梯度 、细胞分裂素种类及浓度梯度 , 在三种激素配比下 BA 浓度梯度的实验 , 得出的结果是
1/10M S+ZT0.5+IAA0.05 培养基比较适合亮毛杜鹃生长。
关　键　词:　亮毛杜鹃;组织培养;激素配比及浓度;成活率;生长势
中图分类号:　S68　　文献标识码:　A　　文章编号:　1007-9793(2006)01-0055-03
　　亮毛杜鹃(Rododendron microphy ton)是杜
鹃花科植物 ,常绿 ,花冠漏斗型 ,蔷薇色有红色或
紫色斑点 ,主要分布在云南气候温凉 、2000-2800
米海拔高度。近年来 ,由于自然生态环境的破坏
危机到这种植物 ,植物组织培养对于保存物种资
源及帮助育种工作增加诱变手段 ,提高选育效率
等方面都有重要的意义。我国杜鹃的组织培养于
1982年杨乃博就作了报导 , 1985年杨志云 、厥国
宁等也作了研究 ,但亮毛杜鹃的组织培养在国内
尚属首次 。
在初始工作中 ,进行了不同 PH 值和基本培
养基的实验 ,发现 PH 值为 5.4—5.5 、培养基为
MS 效果较好 ,因此进一步进行了不同浓度的 MS
培养基的对比实验 ,其结果是 1/10MS 培养基适
合亮毛杜鹃生长 ,但由于不添加任何激素的培养
基外植体不易成活 ,因此 ,在此基础上进一步进行
了不同激素配比及浓度的实验 。
1　材料及方法
1.1 材料
亮毛杜鹃(Rododendron microphy ton):来自
禄丰樟木箐林场 ,腊叶标本贮存于楚雄师院化学
与生命科学系组培实验室 。
1.2 方法
1.2.1灭菌和接种:将茎尖(2-3cm)先用自来水
冲洗 10min ,经初步修剪后再用洗衣粉水涮洗 3
分钟后用自来水冲洗干净 。进一步除去材料不用
的部分 ,然后在超菌工作台上用 0.2%HgCl2浸泡
并搅动 4min ,用无菌水涮洗 10次(每次 3分钟)。
将上述灭菌外植体进行适当切割(3mm 茎尖),切
割后再用无菌水浸泡 1—2分钟(除去褐化物)后 ,
植入培养基表面。
1.2.2用不同生长素及浓度进行对比:在前一阶
段实验的基础上 ,设计了 12组不同生长素及浓度
进行实验(BA 浓度均为 0.5mg/L),用 1/10M S
培养基 ,附加蔗糖 25g/ L 、琼脂为 9g/ L 、PH 值为
5.4-5.5 。每个浓度接种 6瓶 ,每瓶 3个外植体。
光照时间为 12h/d ,培养 20天后进行统计。
1.2.3用不同的细胞分裂素及浓度进行对比:设
计了 15 组不同的细胞分裂素及浓度 , 分别与
IAA 搭配进行实验(IAA 浓度均为 0.05mg/ L),
培养基等同 1.2.2。
1.2.4 三种激素配比下进行 BA 浓度梯度的对
比:设计 11组 BA 浓度梯度 ,分别与 NAA(浓度
均为 0.1mg/L)及 KT(浓度均为 0.2mg/L)搭配
进行实验 ,培养基等同 1.2.2。
　第 26卷第 1期
2006年 1月
云南师范大学学报
Journal of Yunnan Normal U niversi ty
Vol.26 No.1
Jan.2006 　
＊ 收稿日期:2005-07-07
基金项目:云南省教委基金资助项目(02ZY095).
作者简介:梁晓华(1964-),女 , 云南省楚雄市人 ,副教授 , 主要从事植物生理方面研究.
2　结果与分析
2.1 用不同生长素及浓度进行对比的结果
(见表 1)
表 1　不同生长素及浓度对成活率及生长势的影响
Tab.1　Effect of different bio s on succe ss ratio and
g row th potential
培养基及生长素种类和浓度 成活率(%) 生长势
⑴1/10M S+BA0.5+IBA0.05 65% ++++
⑵1/10M S+BA0.5+IBA0.1 30% +++
⑶1/10M S+BA0.5+IBA0.2 17% ++
⑷1/10M S+BA0.5+IBA0.5 0
⑸1/10M S+BA0.5+IAA0.05 81% ++++
⑹1/10M S+BA0.5+IAA0.1 65% +++
⑺1/10M S+BA0.5+IAA0.2 30% ++
⑻1/10M S+BA0.5+IAA0.5 0
⑼1/10M S+BA0.5+NAA0.05 67% ++++
⑽1/10M S+BA0.5+NAA0.1 32% +++
⑾1/10M S+BA0.5+NAA0.2 19% ++
⑿1/10M S+BA0.5+NAA0.5 0
　　注:“++++”表示生长速度最快 , “ +++”表示生
长速度较快 ,“ ++”表示生长速度快 , “ +”表示生长速度
慢 ,以下各表同。
实验结果是⑸1/10MS +BA0.5+IAA0.05
培养基的成活率和生长势相对较高 ,为 81%, ⑴
1/10MS +BA0.5 + IBA 0.05 和 ⑼1/8M S +
BA0.5+NAA 0.05培养基的成活率次之;同时还
发现 ,随着生长素浓度的升高 ,成活率逐渐降低 ,
当生长素浓度达 0.5mg/ L 时 ,产生抑制和毒害作
用 ,成活率为零。从结果可以看出在 BA 浓度均
为 0.5mg/L 时 ,较适合亮毛杜鹃的生长素及浓度
为 IA A0.05mg/L。
2.2 用不同的细胞分裂素及浓度进行对比的结果
(见表 2)
从表 2 中可以看出 , ⒁1/10M S +ZT0.5+
IAA0.05培养基的成活率和生长势相对最高 ,为
83%;⑵1/10M S+K T0.1+IAA0.05次之;同时
可以看出 ,当 KT 浓度达到 0.6mg/L 、BA 浓度达
0.3mg/ L 时 ,产生抑制和毒害作用 ,外植体全部
死亡 。实验表明 ,在生长素均为 IAA0.05 mg/L
时 ,较适合亮毛杜鹃生长的细胞分裂素和浓度为
ZT0.5mg/L , 培 养基 为 1/10MS + ZT0.5 +
IAA0.05。
表 2　细胞分裂素种类及浓度对成活率及生长势的
影响生长势
Tab.2　Effect of diffe rent kinin on success r atio and
g r ow th po tentia l
培养基和细胞分裂素种类及浓度 成活率(%) 生长势
⑴1/10M S+KT0.05+IAA0.05 67% + +
⑵1/10M S+KT0.1+IAA0.05 73% ++++
⑶1/10M S+KT0.3+IAA0.05 57% +++
⑷1/10M S+KT0.5+IAA0.05 0
⑸1/10M S+KT1.0+IAA0.05 0
⑹1/10M S+BA0.05+IAA0.05 37% ++
⑺1/10M S+BA0.1+IAA0.05 47% ++++
⑻1/10M S+BA0.3+IAA0.05 57% +++
⑼1/10M S+BA0.5+IAA0.05 17% +
⑽1/10M S+BA1.0+IAA0.05 0
⑾1/10M S+ZT0.05+IAA0.05 17% +
⑿1/10M S+ZT0.1+IAA0.05 27% +
⒀1/10M S+ZT0.3+IAA0.05 57% +++
⒁1/10M S+ZT0.5+IAA0.05 83% ++++
⒂1/10M S+ZT1.0+IAA0.05 56% ++++
2.3 三种激素配比下进行 BA 浓度梯度对比的结
果(见表 3)
表 3　三种激素配比下 BA 浓度对成活率和生长势
的影响
Tab.3　Effect o f BA densities three ho rmone com-
po se on succe ss ra tio and g row th po tential
培养基
(1/ 10MS)
6-BA
(mg/ L)
NAA
(mg/ L)
KT
(mg/ L)
成活率
(%) 生长势
⑴ 0.1 0.1 0.2 0
⑵ 0.2 0.1 0.2 33 ++
⑶ 0.3 0.1 0.2 17 +
⑷ 0.4 0.1 0.2 0
⑸ 0.5 0.1 0.2 0
⑹ 0.75 0.1 0.2 0
⑺ 1.0 0.1 0.2 0
⑻ 2.0 0.1 0.2 0
⑼ 3.0 0.1 0.2 0
⑽ 4.0 0.1 0.2 0
⑾ 5.0 0.1 0.2 0
　　从表 3中可以看到 ,三种激素和浓度搭配后
培养的效果不佳 ,成活率极低 ,仅(2)、(3)培养基
中有部分外植体成活 。其结果是在 NAA 均为
0.1mg/L ,K T 均为 0.2mg/L 的条件下 ,随着 6-
BA 浓度的增加 ,对外植体产生毒害作用 ,成活率
逐渐降低 , 培养基 (2)1/10MS +BA0.2 +
·56· 云南师范大学学报(自然科学版) 第 26 卷　　
NAA0.1+KT0.2的成活率相对较高为 33%。
从总的实验结果看 ,较适合亮毛杜鹃生长的
细胞分裂素为 ZT 、生长素为 IAA ,最适培养基为
1/10MS+ZT0.5+IAA0.05。
参　考　文　献:
[ 1] 　谭文澄 , 戴策刚.观赏植物组织培养技术[ M] .北
京:中国林业出版社 , 1991.
⑵　丁兰 , 梁桂霞 , 傅华龙.卡特兰的组织培养与快速繁
殖的研究[ J] .四川大学学报(自然科学版), 2001 ,
38(1).
⑶　雷远成 ,吴俊 , 骞宇 ,等.油菜萝卜胞质雄性不育与诸
葛菜属间杂种回交一代(BC1)的快速繁殖及生根
[ J] .四川大学学报(自然科学版), 2003 , 40(2).
⑷　葛屹松 , 赵晓琴 ,李冠.新疆甜瓜组织养的优化及抗
病转基因研究[ J] .新疆大学学报(自然科学版),
2003 , 20(1).
Explores into the tissue culture technology of rododerdron microphyton
LIANG Xiao-hua , XUCeng-dong , XUE Mei-hua , HU Xiao-an
(Department of Computer Science , Yunnan Normal Unive rsity , Kunming 650092 , China)
ABSTRACT:　In the course of ti ssue culture of rododendron microphy ton , The fir st question w as not
lived.So more study effect of dif fe rent ho rmone compose and densities on success ratio and grow th
po tential o f rododerdron microphy ton basic last w o rk ,Tests different kind and densi ties of bio s wi th
tow hormone compose , dif ferent densi ties of BA with three hormone compose.The result show ed that
the sui table medium fo r rododendron microphy ton is 1/10M S +ZT0.5+IAA0.05.
KEYWORDS:　rododerdron microphy ton;ti ssue culture;hormone compose and densities;success
ratio;g row th po tential
·57·　第 1 期 梁晓华 , 等:　亮毛杜鹃组织培养技术探索