全 文 ：收稿日期:2011-05-27; 修订日期:2011-09-11
基金项目:福建省教育厅资助省属高校科研专项(No． JK2009042)
作者简介:黄晓冬(1973-) ，男(汉族) ，福建南安人，现任泉州师范学院副
教授，硕士学位，主要从事资源植物学研究工作．
* 通讯作者简介:蔡建秀(1957-) ，女(汉族) ，福建莆田人，现任泉州师范
学院教授，学士学位，主要从事资源植物学研究工作．
天竺桂挥发油的毒理学研究
黄晓冬1，蔡建秀2* ，林海鸿2
(1．泉州师范学院湿地研究所，福建 泉州 362000;
2．泉州师范学院·化学与生命科学学院，福建 泉州 362000)
摘要:目的 对天竺桂挥发油(CJO)进行初步毒理学研究。方法 采用以改良寇氏法为根据的 SPF级小鼠一次性腹腔注
射急性毒性实验，小鼠药物过敏反应实验，日本大耳白兔眼结膜法、耳廓法观察药物刺激性实验。结果 CJO对小鼠的半
数致死剂量 LD50为 2． 482ml /kg，一次性给药 1． 842 ml /kg剂量以下被确认为相对安全的体内用药剂量;外用对日本大耳
白兔眼结膜、耳廓均无明显刺激性。结论 CJO体外用药安全，体内用药有低毒性，宜低剂量用药。
关键词:天竺桂挥发油(CJO) ;急性毒性实验; 药物刺激性实验; 药物过敏反应
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 01． 061
中图分类号:R285 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)01-0138-01
天竺桂挥发油(Cinnamomum Japonica volatile Oil，以下简称
CJO)源自樟科樟属天竺桂 Cinnamomum japonicum Sibe 叶，主要
含有冰片、匙叶桉油烯醇等多种化学成分［1，2］，近年来，药理实验
发现该挥发油对大肠杆菌 Escherichia coli、金黄色葡萄球菌 Staph-
ylococcus aureus、枯草杆菌 Bacillus subtilis 普通变形杆菌 Proteus
vulgaris、藤黄八叠球菌 Sarcina lutea以及甘蓝黑腐菌 Xanthomonas
campestris、白菜软腐菌 Erwinia carotorora 等均具有较强的抗菌活
性［1，2］，对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋清致小鼠足跖肿胀、醋酸致
小鼠腹腔毛细血管通透性增加均表现抑制作用，提示出较好的抗
炎活性［3］，但由于毒理学研究的欠缺使其用药安全性尚存质疑。
本研究采用急性毒性实验、药物刺激实验、药物过敏实验等毒理
学试验方法，首次报道该挥发油的毒理学数据，为评价其用药安
全性提供重要参考指标。
1 材料
1． 1 材料 天竺桂 Cinnamomum japonicum Sibe为樟科樟属植物，
采自福建泉州市区。按 2005 年版《中国药典》附录 X． D［4］的水
蒸气蒸馏法提取天竺桂叶挥发油。
1． 2 动物 SPF级小鼠，体质量(19 ± 1． 0)g，由厦门大学动物实
验中心提供，许可证号为 SCXK －(闽)2008 － 0001;健康日本大
耳白兔，体质量(1． 0 ± 0． 2)kg。以上动物试验前均饲养 7d，以适
应实验环境。
2 方法
2． 1 急性毒性试验 参照周绪正等［5］的方法略加修改:采用递
加法预试验确定小鼠死亡率为 0 和 100%的最大耐受剂量 LD0
和绝对致死剂量 LD100，在此区间剂量范围内，将 50 只小鼠随机
分为 5 组即 5 个剂量组，每组 10 只，雌雄各半，相邻组间剂量比
按下列公式求出:1 /k = ［(lgLD100 － lgLD0)/(n － 1) ］式中 1 /k
为相邻两组间剂量比即组距，n为动物分组数。将 CJO加入少量
吐温 － 80(吐温 － 80 剂量控制在不至于使小鼠中毒的剂量
0． 52 g /ml范围内)乳化后，溶于灭菌双蒸水中，采用腹腔注射，等
容量不等浓度给药，每只 0． 4 ml，5 个剂量组分别为 3． 529，3．
000，2． 550，2． 167，1． 842 ml /kg 用药剂量，雌雄分笼喂养。给药
前小鼠禁食不禁水 16 h，自由饮水。给药后即刻观察动物的反应
情况，连续观察 7 d，并记录动物死亡时间和各剂量组动物的死亡
数。根据试验结果，采用改良寇氏法计算半数致死量(LD50) ，
LD50的计算公式如下:LD50 = log
－1［Xm － i(∑P － 0． 5) ］;Sx50 = i
［(∑P － ∑P 2)/(n － 1) ］1 /2;LD50的 95 % 可信限 = log
－1(
lgLD50 ± 1． 96 Sx50)。式中:i －组距，即相邻两组剂量对数剂量之
差;Xm －最大剂量对数值;p －各剂量组死亡率，用小数表示;
∑P －为各组动物死亡率的总和;Sx50 －为 lgLD50的标准误。
2． 2 药物过敏性试验 参照蒋涵［6］等的方法略加修改:取雄小鼠
20 只，按体质量均分为 2 组，每组 10 只，第一组连续 5d皮下注射
CJO 0． 5 ml /kg，末次皮下注射 30 min后，腹腔注射 0． 5 ml /kg，仔
细观察小鼠的反应并做相应记录;第二组连续 10d皮下注射 CJO
0． 5 ml /kg，末次皮下注射 30 min后，腹腔注射 CJO 0． 5 ml /kg，仔
细观察小鼠的反应并作相应记录。
2． 3 药物刺激性实验
2． 3． 1 耳廓刺激实验 参照蒋涵等［6］的方法略加修改:兔 10 只
放于固定箱中，透光观察兔耳廓正常情况。于耳廓近基部血管较
少处皮下注射 CJO 0． 100 ml，另一耳廓于同样部位皮下注射无菌
生理盐水为对照。每隔 10 min 观察记录 1 次，注意是否出现红
肿及其范围，30 min 后，每 1h 观察 1 次，直到给药后 3h，及时记
录。24 h后查看有无组织坏死现象。
2． 3． 2 眼结膜刺激实验 参照蒋涵等［6］的方法略加修改:兔 10
只放于固定箱中，观察记录正常结膜的色泽及血管分布。将下眼
睑拉成环形，压住鼻泪管(以防药液吸收) ，分别于左、右两眼中
滴入 CJO和蒸馏水 0． 100 ml。1 min后放手任药液自然流出。给
药后 30 min内，每隔 5 min检查眼泪分泌情况 1 次。给药 3 h内，
每隔 1 h轻轻翻开眼睑，观察结膜的反应 1 次。并记录。
3 结果与分析
3． 1 CJO对小鼠的急性毒性实验 各组受试小鼠给药后均出现
蜷缩、竖毛、全身颤抖、心跳加快、翘尾、腹部贴地等症状，但出现
的时间不同，剂量越高出现症状的时间越快;高剂量组腹痛症状
明显，表现为两前肢趴在笼壁上或其他动物身上，弓腰缩腹、打
滚、上窜下跳、躁动不安等。随着时间的推移，症状加重，出现呼
吸短促、张口呼吸、侧卧、或躺卧或俯卧，并对惊吓及疼痛等刺激
反应迟钝，出现少动、嗜睡、肌肉麻痹等症状，最后衰竭而死，死前
无明显的挣扎现象。在给药后 2 ～ 15h，受试的 50 只小鼠共死亡
26 只，其中约有 87． 5%死亡小鼠死亡于给药后 2 ～ 6 h 内，且这
些死亡小鼠主要分布在 2． 550 ml /kg以上的剂量组，其余死亡小
鼠在给药 6 ～ 20h 内死亡，且分布在低剂量组 2． 167 ml /kg 与
2． 550 ml /kg，给药后 20 h不再出现死亡现象，耐过的受试小鼠逐
渐恢复正常。
考察剂量与死亡率的关系结果如表 1 所示。当剂量低于
1． 842 ml /kg时对小鼠不造成急性死亡反应，结合递加法预试验
可初步确定该浓度为最大耐受剂量 LD0，2． 167 ml /kg 剂量时出
现 20%的死亡率，提示该剂量临近最小致死剂量，随着剂量的升
高死亡率也明显增加，3． 000 ml /kg 剂量组死亡率高达 80%，当
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 1 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL． 23 NO． 1
剂量达到 3． 529 ml /kg时，小鼠死亡率为 100%，且均在较短时间
内死亡，提示高剂量的 CJO毒性增加，3． 529 ml /kg剂量为小鼠的
绝对致死剂量。改良寇氏法计算出 CJO 对小鼠的半数致死剂量
LD50为(2． 482 ± 0． 354)ml /kg，其 95% 可信区域为 2． 128 ～
2． 836 ml /kg。
表 1 天竺桂挥发油急性毒性实验结果
组别 剂量 /ml·kg － 1 死亡数量 死亡率(P) LD50 /ml·kg － 1
1 3． 529 10 1． 00
2 3． 000 8 0． 80 2． 482 ± 0． 354
3 2． 550 6 0． 60
4 2． 167 2 0． 20
5 1． 842 0 0
n =10
3． 2 药物过敏性实验 小鼠每次注射 0． 500 ml /kg 剂量的 CJO
后都表现出蜷缩和竖毛等轻度反应，但在较短时间内即恢复正
常，连续 5 d和 10 d注射后，尽管 5d累计注射剂量已达急性毒性
试验中 80%死亡率的 3． 000 ml /kg剂量、10 d累计注射剂量超过
绝对致死剂量 3． 529 ml /kg，但试验过程中并没有发生小鼠死亡
现象，也没有发展出不安、呼吸急促或困难、紫绀、肢无力、腹贴地
爬行等影响日常饮食、活动能力的反应，这说明了 CJO 虽有一定
毒性，但较为低毒，且每次注射后的 CJO 可被小鼠体内生物转化
或排出体外，并没有或较少体内蓄积与富集。
3． 3 药物刺激实验 CJO对日本大耳白兔耳廓与结膜的药物刺激
实验结果分别见表 2、表 3。耳廓刺激实验结果显示对照生理盐水
与 0． 100 ml CJO刺激处理的兔耳廓均无明显刺激反应，24 h后透
光查看发现无组织坏死。眼结膜刺激实验表现为在滴入0． 100 ml
CJO后的兔眼有轻微的流泪反应，但并没有明显的充血、畏光、水
肿等刺激反应。这与蕲艾挥发油的研究较为相似［6］。
表 2 兔耳廓刺激实验结果
用药部位 注射物 注射量 /ml 刺激 －反应现象
左耳 生理盐水 0． 100
多次观察，均未发现有明显的刺激反应，
透光检查发现无组织坏死
右耳 CJO 0． 100
多次观察，均未发现有明显的刺激反应，
透光检查发现无组织坏死
表 3 兔眼结膜刺激实验结果
用药
部位
滴入物
滴入量
/ml
刺激 －
反应现象
左眼 蒸馏水 0． 100 无明显的畏光，流泪等刺激反应的现象
右眼 CJO 0． 100
无明显的畏光等刺激反应的现象，
有轻微流泪的反应
4 结论
急性毒性实验发现天竺桂挥发油给药后小鼠均出现少动、嗜
睡等中毒表现，说明 CJO有一定的毒性，其对小鼠的半数致死剂
量 LD50为 2． 482 ml /kg，低于蕲艾挥发油的 LD50(3． 74ml /kg) ，0．
500 ml /kg剂量持续处理 10 d，小鼠无明显过敏反应和死亡现象，
提示 CJO表现低毒，且药物可被小鼠生物转化或排出体外，并没
有或较少体内蓄积与富集，一次性给药 1． 842 ml /kg 剂量以下被
确认为相对安全的体内用药剂量。此外，药物刺激性实验得知
0． 100 ml CJO对眼结膜和耳廓无明显刺激作用，这说明了 CJO体
外用药具有较高的安全性。有关 CJO 毒性成分、中毒机理以及
体内的吸收、分布和排泄的药代动力学等有待深入研究。
参考文献:
［1］ 蔡建秀，尤祖卿，黄晓冬，等．天竺桂挥发油化学成分及抑菌活性研
究［J］．热带亚热带植物学报，2006，14(5) :403．
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及体外抗菌活性［J］．中国农学通报，2010，26(4) :182．
［3］ 蔡建秀，吴文杰，陈晓梅．天竺桂叶挥发油的提取及抗炎活性研究
［J］．时珍国医国药，2008，19(8) :1915．
［4］ 国家药典委员会．中国药典［S］．北京:化学工业出版社，2005:附录
XD．
［5］ 周绪正，张继瑜，赵成莹，等．小鼠和大鼠口服氢溴酸槟榔碱的急性
毒性试验［J］．动物医学进展，2007，9:34．
［6］ 蒋 涵，候安继，项志学．蕲艾挥发油的毒理学研究［J］． 中药药理
与临床，2004，20(5) :43．
收稿日期:2011-05-22; 修订日期:2011-09-12
基金项目:山东省重大科技专项资助项目(No． 2006GG110809 － 37)
作者简介:姜红霞(1977-) ，女(汉族) ，山东泰安人，现任泰山医学院讲师，
硕士学位，主要从事中药有效成分提取、活性分析等研究工作．
* 通讯作者简介:聂永心(1977-)，男(汉族)，山东禹城人，现任山东农业大
学讲师，博士学位，主要从事多糖的分离纯化及生物活性分析工作．
黄伞子实体多糖的结构初探及抗肿瘤活性研究
姜红霞1，聂永心2* ，苏延友1
(1．泰山医学院，山东 泰安 271016; 2．山东农业大学作物生物学国家重点实验室，山东 泰安 271018)
摘要:目的 研究黄伞子实体多糖的抗肿瘤活性及其糖醛酸含量、单糖组成和糖苷键的类型。方法 以 S180为模型，检测
体内抗肿瘤活性;间羟联苯法检测糖醛酸含量;HPLC － ELSD法检测单糖组成;红外光谱法分析糖苷键类型、吡喃环或呋
喃环形式等结构信息。结果 黄伞子实体多糖在 50，100，150 mg·kg －1时，对 S180的抑瘤率分别为 27． 97%，30． 36%，
38． 46%;糖醛酸含量为 1． 26%;单糖组成主要由葡萄糖组成;同时含有 α和 β构型糖苷键的葡萄吡喃糖。结论 黄伞子
实体多糖是含有 α和 β构型糖苷键，由葡萄吡喃糖组成的均一中性多糖，具有一定的体内抗肿瘤活性。
关键词:黄伞; 子实体多糖; 单糖组成; 红外光谱; 抗肿瘤
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 01． 062
中图分类号:R73 － 36 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)01-0139-03
真菌多糖是自然界中存在种类较多、生物活性较高的一类活 性多糖，近年来研究发现，真菌多糖具有免疫增强与调节、抗肿
瘤、抗氧化、抗衰老等广泛的生物活性［1 ～ 3］，是公认的安全低毒活
性物质，其成为国内外专家学者关注的焦点。真菌多糖的生物活
性与其结构密切相关，糖醛酸的含量、单糖组成、糖苷键类型直接
决定真菌多糖的活性，支链的类型、聚合度、在多糖链上的分布及
其取代度决定其活性的强弱。
黄伞 Pholiota adiposa又名多脂鳞伞，有研究表明其多糖具有
抑菌［4］、抗氧化［5］、抗肿瘤［6，7］等生物活性，是一种具备较高研究
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL ． 23 NO． 1 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 1 期