全 文 ：满山红中总黄酮提取条件的优化
陈　宁
(哈尔滨商业大学 ,生命科学与环境科学研究中心 ,黑龙江 哈尔滨 150076)
摘要: 目的: 优选满山红的提取条件。方法: 采用正交设计法对满山红中总黄酮提取条件进行优化 ,利用高效液相色谱法
测定满山红中总黄酮的含量 ,其中总黄酮含量以杜鹃素含量为指标。结果:满山红中总黄酮最佳提取条件为 60%乙醇 15倍量
回流提取 2次 ,每次提取 2h。结论: 该方法操作简便可行 ,重现性好 ,广泛适用于工业化大规模生产。
关键词: 满山红 ;总黄铜 ;提取条件 ;正交设计
中图分类号: R284　文献标识码: A　文章编号: 1008- 0104( 2012) 04- 0097- 01
　　满山红 ( Rhododendron dauricum L. ) ,又名达子香。为杜
鹃花科杜鹃属植物 ,药用其叶 ,其性味辛、苦温 ,归脾、肺经。
具有止咳、祛痰、平喘作用 ,疗效高 ,副作用小 ,资源丰富。具
有治疗咳嗽气喘 ,及慢性支气管炎的疗效 [1]。满山红主要有
效成分为挥发油 ,杜鹃素、槲皮素等黄酮类成分 [2, 3]。本文在
确定乙醇回流为提取方法的基础上 ,采用正交设计法考察了
乙醇浓度、提取时间、药液比例对总黄酮的影响 ,优选最佳提
取条件 ,为科学生产提供依据。
1　 仪器与试药
1. 1　 仪器
Waters高效液相色谱仪 ( W2695泵、自动进 样器、
W2996DAD检测器、 Empow er工作站 );色谱柱: Lich rospher
C18柱 ( 4. 6mm× 150mm, 5μm)。CP224S型分析天平 (北京赛
多利斯仪器系统有限公司 )。
1. 2　 药品与试剂
满山红药材购自哈尔滨宝丰药业 ,杜鹃素对照品 (批号:
110850- 200303)及满山红对照药材均购自中国药品生物制
品检定所 ,甲醇为色谱纯 ,水为去离子水。
2　 方法与结果
2. 1　 样品制备
所用满山红药材与对照药材分别点于同一以羧甲基纤
维素钠为黏合剂的硅胶 G薄层板上 ,以甲苯 -乙酸乙酯 -甲
酸 ( 7: 2: 0. 5)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷三氯化铝显色
剂 ,置紫外灯 ( 365nm )下检视。样品色谱中 ,在与对照药材色
谱相应的位置上显相同颜色的斑点 ;在与对照品色谱相应的
位置上 ,显相同的蓝色斑点。因此该药材为满山红。将药材烘
干、粗粉 ,精密称取 9份满山红药材 ,每份 10g ,采用乙醇回流
法提取。采用 L9 ( 34 )正交表进行试验 ,按表 1乙醇浓度、提取
时间、药液比 ,固定提取次数为 2次。然后过滤 ,用石油醚萃
取 ,浓缩蒸干。称干燥提取物 0. 05g置容量瓶中 ,精密加入甲
醇 10m L,称定重量 ,超声处理 5min,放冷 ,再称定重量 ,用甲
醇补足减失的重量 ,即得样品溶液。
表 1　满山红中总黄酮提取条件因素水平
水 平 因　　　　　素乙醇浓度 (% ) A 提取时间 ( h) B 药液比 (倍 ) C
1 50 1 9
2 60 2 12
3 70 3 15
2. 2　 满山红总黄酮的含量测定
色谱条件: 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 ;以甲醇
-水 ( 60: 40)为流动相 ;检测波长为 297nm。
对照品溶液的制备 ,精密称取杜鹃素对照品适量 ,加甲
醇制成每 1mL含 0. 25mg杜鹃素的溶液 ,即得。
标准曲线的制备 (图 1) ,精密吸取杜鹃素 0. 25mg /m L对
照品溶液 1、 2、 3、 4、 5μL,分别注入高效液相色谱仪中 ,测定其
峰面积积分值。以质量浓度为横坐标 ,相应峰面积积分值为
纵坐标 ,绘制标准曲线 ,其回归方程为: Y = 4289862. 8X +
165512. 9, r = 0. 999。结果表明 ,杜鹃素在 0. 25～ 1. 25μg与峰
面积有良好的线性关系。
2. 3　 实验结果
各种提取条件总黄酮含量见表 2。
表 2　 正交设计试验结果
实验
号
因　　素
A B C D(误差 )
评价指标
出膏量 Y1( g )杜鹃素 Y2 (% )
合计
Y1× Y2× 100
1 1 1 1 1 2. 1822 0. 32 70
2 1 2 2 2 2. 4370 0. 33 80
3 1 3 3 3 2. 5114 0. 37 92
4 2 1 2 3 2. 4837 0. 35 87
5 2 2 3 1 2. 7250 0. 42 115
6 2 3 1 2 2. 3445 0. 40 94
7 3 1 3 2 2. 6773 0. 35 93
8 3 2 1 3 2. 4130 0. 34 82
9 3 3 2 1 2. 4806 0. 36 89
Ⅰ 242 250 246 274
Ⅱ 296 277 256 267
Ⅲ 264 275 300 261
R 54 27 54 13
图 1　杜鹃素标准曲线
2. 4　 结果分析
对实验结果进行分析 ,结果见表 3。从中可以看出各因素
对提取效果的影响程度依次是药液比 C> 醇浓度 A> 提取
时间 B,且 C因素有较高显著性。杜鹃素的最佳提取条件是:
A2B2C3 ,即乙醇浓度为 60% ,提取时间为 2h,加醇量为 15倍 ,
提取次数为 2次。 (下转第 98页 )
·97·HEILON GJIANG M EDICIN E AND PHARM ACY Aug. 2012, Vol. 35 No. 4　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
超短波并药物治疗急性盆腔炎 110例疗效观察
姜　蓓
(佳木斯大学附属第一医院理疗科 ,黑龙江 佳木斯 154003)
关键词: 急性盆腔炎 ;超短波
中图分类号: R711. 33　文献标识码: B　文章编号: 1008- 0104( 2012) 04- 0098- 01　　急性盆腔炎是女性内生殖器及其周围结缔组织盆腔腹
膜发生的急性炎症 ,在中、青年已婚妇女中发病率很高 ,还有
一些慢性盆腔炎的急性发作 ,出现下腹隐痛、心率快、发热 ,
阴道有大量脓性分泌物 ,患者病情严重时可有高热、头痛、寒
战、食欲不振等。发病时有下例症状: 月经期发病可出现经量
增多、经期延长 ,非月经期发病可有白带增多。若有腹膜炎 ,
则出现消化系统症状如恶心、呕吐、腹胀、腹泻等。若有脓肿
形成 ,可有下腹包块及局部压迫刺激症状包块位于前方可出
现膀胱刺激症状 ,如排尿困难、尿频 ,如引起膀胱肌炎还可有
尿痛等 ,如包块位于后方可有直肠刺激症状 ,若有腹膜外可
致腹泻、里急后重感和排便困难。不仅如此 ,根据盆腔炎感染
的病原体不同 ,临床表现也有差异。淋病奈氏菌感染起病急 ,
多在 48h内出现高热、腹膜刺激征及阴道脓性分泌物。非淋
病奈氏菌性盆腔炎起病较缓慢 ,高热及腹膜刺激征不明显 ,
常伴有脓肿形成。若为厌氧菌感染 ,则容易有多次复发 ,脓肿
形成 ,患者的年龄偏大 ,往往大于 30岁。沙眼衣原体感染病程
较长 ,高热不明显 ,长期持续低热、主要表现为轻微下腹痛 ,
久治不愈 ,阴道不规则出血。患者呈急性病容 ,体温升高 ,心
率加快 ,腹胀 ,下腹部有压痛、反跳痛及肌紧张 ,肠鸣音减弱
或消失。我科对 2008— 01～ 2010— 12共 110例前来就诊的患
者采用了超短波并药物治疗收到良好的效果 ,现报道如下。
1　资料与方法
1. 1　一般资料
160例均为门诊患者 ,年龄 18～ 58岁 ,平均 32. 4岁 ,病程 1
周～ 2个月 ,均有不同程度的阴道充血 ,并伴有大量脓性分泌
物 ,宫颈压痛 ,活动受限 ,盆腔肿物形成时可触及边界不清的
肿物。随机分为理疗组 110例与对照组 50例。
1. 2　治疗方法
理疗组采用 DL- C- B超短波治疗仪 ,将 15cm× 10cm
的两极板分别置于患者的下腹部和腰骶部 ,输出电流 50～
100ma ,工作频率 40. 68M Hz,每天 1次 , 20分钟 /次 , 10d为 1个
疗程 ,治疗期间抗生素治疗口服灭滴灵及头孢菌素 (按说明
服用 )。对照组单纯服用抗生素治疗 , 10d为 1个疗程。
1. 3　疗效评价标准
治愈: 临床症状消失 ,一般检查及盆腔检查正常 ,化验室
检查正常。显效: 临床症状消失 ,一般检查正常 ,盆腔仍有肿
块压痛 ,化验正常。好转: 自觉症状有所减轻 ,一般检查及盆
腔检查可略好转 ,化验正常。无效: 临床症状无改善。
2　结果
所有患者 1个疗程后复诊理疗组明显优于对照组
(P < 0. 01)。见表 1。
表 1　两组疗效比较
组别 n 治愈 显效 好转 无效 有效率 (% )
理疗组 110 45 44 8 13 88. 18
对照组 50 6 12 4 28 44. 00
　　组间比较i2 = 10. 46, P < 0. 01。
3　讨论
急性盆腔炎是妇科门诊的常见病 ,如果得不到及时的治
疗会转为慢性盆腔炎 ,增加了治疗难度 ,采用单纯药物治疗
为主效果不甚理想。
当急性盆腔炎治疗不彻底或病程迁延日久之时 ,就会转
为慢性炎症。此时 ,全身症状多不明显 ,炎症发作多为隐性
(当然也有急性发作者 )。有时有低热感 ,有时易感疲劳 ,倘若
病程拖延较长 ,部分患者会有神经衰弱症 ;当有瘢痕黏连及
配盆腔充血时 ,可导致下腹坠胀、疼痛及腰骶部酸痛 ,常在劳
累、性交及月经前后加重。盆腔淤血时 ,会有月经增多症伴
随 ,卵巢功能损害时 ,有月经失调症常发生。由于接触了带有
病菌的物品 ,或者平时不注意清洁 ,都有可能导致盆腔炎。有
些女性经常自行冲洗阴道 ,或是喜欢长时间的盆浴 ,这反而
给病菌以可乘之机。正常情况下 ,分泌物使阴道具有自净和
防御功能 ,而过度冲洗改变了阴道酸碱度 ,反而给病菌繁殖
提供了方便。尽量避免不必要的妇科检查 ,以免扩大感染 ,引
起炎症扩散。盆腔炎易导致身体发热 ,所以要注重多喝水以
降低体温。利用超短波治疗 ,通过其输出的能量 ,在高频电场
的作用下 ,改善深部组织血液循环 ,增加血管的通透性 ,加强
了机体组织的新陈代谢 ,从而达到消炎止痛 ,促进血液循环 ,
增强机体免疫力的治疗目的。与单纯药物治疗 ,理疗组具有
明显优势 ,且无痛苦 ,无副作用 ,值得推广。
(收稿日期: 2011- 09- 02)
作者简介: 姜蓓 ( 1962～ )女 ,黑龙江佳木斯人 ,副主任技师。
(上接第 97页 )
表 3　 方差分析
方差来源 离均差平方和 自由度 F值 F临界值 显著性
A 491. 556 2 17. 417 19. 000
B 150. 889 2 5. 346 19. 000
C 550. 222 2 19. 496 19. 000 *
误差 35. 222 2
　　 F0. 05( 2、 2) = 19
3　 讨论
满山红中总黄酮最佳提取条件为: 60%乙醇回流提取、
15倍药液比、提取时间 2h、提取 2次。本实验选择杜鹃素为对
照品 ,若选用其他对照品进行总黄酮的含量测定 ,总黄酮的
含量可能存在偏差 ,但总黄酮最佳提取条件应相对稳定 ,提
取条件完全可行。
参考文献:
[1 ]付晓丽 ,张立伟 ,林文瀚 ,等 .满山红化学成分的研究 [ J ].中草药 ,
2010, 41( 5): 704- 707
[2 ]梁泰刚 ,孟旭鹏 ,赵承孝 ,等 . HPLC法同时测定不同产地满山红
中 4种黄酮成分的含量 [ J] .药物分析杂志 , 2010, 30( 2): 279- 281
[ 3 ]邹纯才 ,鄢海燕 ,方芳 ,等 .满山红油的高效液相特征色谱考察
[ J] .中国医院药学杂志 , 2008, 28( 19): 1662- 1665
(收稿日期: 2012- 03- 14)
作者简介: 陈宁 ( 1981～ )男 ,黑龙江哈尔滨人 ,博士研究生 ,助理研究员。
·98·　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　黑龙江医药科学　 2012年 8月第 35卷第 4期