全 文 ：科技信息 2007年 第17期SCIENCE&TECHNOLOGYINFORMATION
科
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HPLC法测定满山红中金丝桃苷的含量
牛 峰 1 周媛媛 2
(1.哈药集团制药六厂 黑龙江 哈尔滨 150056;2.黑龙江中医药大学 黑龙江 哈尔滨 150040)
摘要:目的:建立满山红中金丝桃苷的高效液相色谱分析法。方法:采用C18柱,流动相为甲醇:水:0.1%磷酸=35:20:45,检测波长为260nm。
结果:精密度和稳定性良好,金丝桃苷在0.2ug～1.0ug范围内呈现良好的线性关系。结论:本方法简便、专属、重现性好,可有效控制满山红药材
的质量。
关键词:满山红;金丝桃苷;高效液相色谱法;含量测定
DeterminationofhyperosideinRhododendrondauricum
NIUFeng,ZHOUYuan-yuan
(1.HarbinPharm.Groupthesixthpharmaceuticalfactory,Harbin150056,China;2.ColegeofPharmacy,HeilongjiangUniversityof
Chinesemedicine,Harbin150040,China)
ABSTRACT:OBJECTIVE:TodeterminethecontentofhyperosideinRhododendrondauricum.METHODS:HPLCwasused.Thestationary
phasewasC18;themobilephaseconsistedofmethanol-water-0.1%phosphonicacid=35:20:45;anddetectionwavelengthat260nm.RESULTS:Linear
rangeofdeterminationofhyperosidewas0.2ug～1.0ug.CONCLUSION:Themethodisconvenient,selectiveandreproducibleforcontentdetermination
ofRhododendrondauricum.
KEYWORDS:Rhododendrondauricum;hyperoside;HPLC;contentdeternination
满山红(RhododendrondauricumL.)为杜鹃花科杜鹃属植物,药用
其叶,具有止咳、祛痰、平喘作用,用于治疗咳嗽气喘,及慢性支气管炎
等疾病[1,2]。据报道曾以杜鹃素为指标成分控制满山红药材的质量,但
该成分含量低导致此方法灵敏度低,重现性差。为了能更好的控制满
山红药材的质量,改用药材中另一有效成分金丝桃苷作为考察指标。
实验表明,该方法测定结果准确、灵敏度高。
1.仪器与试药
仪器:LC2010AHT型高效液相色谱仪;N2000色谱工作站;
KromasilC18色谱柱 (200mm×4.6mm,5μm)
试药:甲醇(色谱纯),磷酸(分析纯),水(超纯水)
供实验用药材采集于伊春。
对照品:金丝桃苷(自制)
2.实验方法与结果
2.1色谱条件 色谱柱:KromasilC18色谱柱 (200mm×4.6mm,
5μm),流动相为甲醇-水-0.1%磷酸(35:20:45),流速为 0.5ml/min,检
测波长为 260nm,柱温:25℃,理论塔板数以金丝桃苷为准不低于
4,000。
2.2对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的金丝桃苷
1.000mg,置 10ml容量瓶中,加甲醇溶解,并定容至刻度,制成浓度为
0.1mg/ml的对照品溶液。
2.3供试品溶液的制备 取满山红药材,精密称取 1.0014g,加入
甲醇50ml超声40min,滤过后,滤渣再用甲醇50ml超声30min,合并两
次滤液,蒸干用25ml甲醇溶解,待用。
2.4标准曲线制备 精密吸取对照品溶液 2、4、6、8、10μl,按上述
色谱条件测定峰面积,以对照品进样量为横坐标,峰面积积分值为纵
坐标。经计算求得回归方程为Y=438860X+283728(r=0.9997)且表明
金丝桃苷在0.2ug～1.0ug范围内呈现良好的线性关系。标准曲线见图
1。
图1
2.5精密度考察 吸取金丝桃苷的对照品溶液,连续进样5次,每
次6μl,测定金丝桃苷的峰面积值,金丝桃苷峰面积的RSD为1.21%。
2.6重现性考察 精密称取5份同一产地满山红药材,每份 1g,
依“供试品溶液制备”向下的方法进行处理,分别精密吸取供试品溶液
25ul进样。结果金丝桃苷峰面积的RSD为0.45%。
2.7稳定性考察 取一份满山红提取物供试品溶液,分别在 0、1、
2、4、8、14、24h检测,测定时,分别精密吸取供试品溶液 25ul进样,
RSD为1.34%。
2.8回收率试验 精密称取 5份药材,每份 1g,同时分别精密吸
取2ml、4ml、6ml、8ml、10ml,浓度为0.010mg/ml的对照品溶液加入到
药材中,再用 80ml甲醇超声 40min提取药材,过滤,滤渣用甲醇超声
30min,合并滤液后蒸干,用 25ml甲醇定容,摇匀后用微孔滤膜过滤,
以25ul量进样。测定结果见表1.
表1 加样回收率试验(单位:mg)
2.9样品测定 取满山红药材粗粉,每份做三个平行试验,从供试
品溶液中,精密吸取25μl进样,测定HPLC图谱如图2,结果见表2。
图2
表2 药材中金丝桃苷含量测定结果(n=3)
3.讨论
1.流动相的选择:据文献报道,采用 MeOH:3%HOAc=1:1,在进行
含量测定时分离样品效果不好,因此改变溶剂系统,改为 MeOH:H2O:
0.1%H3PO4=35:20:45[3]。
2.方法学考察表明用金丝桃苷作为指标成分控制满山红质量,方
法准确度高、精密度好,可作为该药材理想的质控方法。
参考文献
[1]宋立人.洪恂主编,现代中药大辞典下册[M].北京:人民卫生出版社.
[2]中国科学院药物研究所,满山红治疗慢性气管炎的临床和实验研
究资料(3～4)[J],1971:38～88.
[3]卢文彪,HPLC法测定紫花杜鹃胶囊中槲皮素的含量[J],湖南中医药
导报,2002,8(3),133～134.
样品含量 对照品加入量 加后样品测定值 测定差值 RSD
1 0.0465 0.0200 0.0662 0.0197
2 0.0463 0.0400 0.0853 0.0390
3 0.0460 0.0600 0.1053 0.059 1.82%
4 0.0461 0.0800 0.1255 0.0794
5 0.0509 0.1000 0.1457 0.0948
编号 含量 RSD(%)
1 0.26
2 0.269 1.36
3 0.267
○科教视野○
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