全 文 ：［收稿日期］ 20101118(007)
［第一作者］ 叶绿萍，硕士，主管药师，执业药师，主要从事药事
管理及药物分析，0771-5840015，0771-2661131，E-
mail:yelvping. nanning@ gmail. com
赶山鞭中金丝桃苷的 HPLC测定
叶绿萍1，刘小意1，陆海鹏2，廖厚知3，韦作干3
(1. 广西中医学院一附院，南宁 530023;2. 广西民族医院，南宁 530001;
3. 广西汇科药物研究所，南宁 530007)
［摘要］ 目的:建立赶山鞭中金丝桃苷的含量测定方法。方法:采用 VP-ODS C18(4. 6 mm × 150 mm，5 μm)色谱柱，以乙
腈-0. 1%磷酸溶液(14∶ 86)为流动相，流速 1. 0 mL·min － 1，检测波长为 360 nm 为 HPLC 检测条件测量 7 批赶山鞭含量。结果:
赶山鞭中的金丝桃苷含量侧定方法在 0. 099 8 ～ 0. 998 0 时进样量与峰面积的线性关系良好(r = 0. 999 8)，平均回收率为
100. 11%，RSD 1. 20%。结论:所建立的方法准确、灵敏、重复性好，可用于赶山鞭的质量控制。
［关键词］ 赶山鞭;金丝桃苷;高效液相色谱
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2011)07-0078-03
Determination Content of Hyperin in Hypericum attenuatum Choisy
YE Lv-ping1，LIU Xiao-yi1，LU Hai-peng2，LIAO Hou-zhi3，WEI Zuo-gan3
(1. The First Affiliated Hospital to Guangxi Traditional Chinese Medicine University，Nanning 530023，China;
2. Guangxi National Hospital，Nanning 530001，China;
3. Guangxi Huike Institute of Materia Medica，Nanning 530007，China)
［Abstract］ Objective:To establish the determination method of hyperin content in Hypericum attenuatum
Choisy. Method:VP-ODS Cl8(4. 6 mm × 150 mm，5 μm)colmnn was used，the mobile phase was acetonitrile-0. 1%
phosphoric acid water(16 ∶ 84);with the flow rate as 1. 0 mL·min － 1，the detection wavelength was at 360 nm.
Result:The linear relation of hyperin was good in the range from 0. 099 8 to 0. 998 0 μg. The average recovery was
100. 11%，RSD 1. 20% . Conclusion:The method established is accurate，sensitive and good in reproducibility. It
can be applied to the qualitycontrol of H. attenuatum
［Key words］ Hypericum attenuatum Choisy;hyperin;HPLC
赶山鞭 Hyperieum attenuatum Choisy 是藤黄科金
丝桃属植物，为西南地区民间常用的中草药［1］，性味
苦、平，有止血、镇痛、通乳的功效，主治咯血、吐血、
子宫出血、风湿关节炎、神经痛、跌打损伤、乳汁缺
乏、乳腺炎、创伤出血、疔疮肿毒［2］。金丝桃苷
(hyperin)为赶山鞭的有效成分之一，本研究建立了
金丝桃苷的含量测定方法，旨在为赶山鞭的质量标
准制定提供实验依据。
1 材料
岛津 LC-10A 高效液相色谱仪(包括 LC-10AtvP
泵，Rheodyne7725i 进样器，LC-10Avp 紫外检测器);威
玛龙色谱工作站(南宁威玛龙公司);岛津 UV-2450 紫
外分光光度仪，梅特勒-托利多 AB265-S 型分析天平;
SYZ-A 石英亚沸高纯水蒸馏器(江苏信达仪器厂)。
金丝桃苷(中国药品生物制品检定所，含量测定
用，批号 111521-200303)，赶山鞭由广西汇科药物研
究所工程师廖厚知采集并鉴定，采集地点分别为广西
乐业(H1)、龙胜(H2)、南丹(H3)、融水(H4)、凌云
(H5)、那坡(H6)、靖西(H7)。
2 方法和结果
2. 1 色谱条件 岛津 VP-ODS C18柱(4. 6 mm × 150
·87·
第 17 卷第 7 期
2011 年 4 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17，No. 7
Apr.，2011
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2011.07.035
mm，5 μm)，流动相乙腈-0. 1% 磷酸溶液(14 ∶ 86)，
检测波长为 360 nm［3］，流速 1. 0 mL·min － 1，柱温室
温。理论板数按金丝桃苷不低于3 000，此条件下金
丝桃苷与其他成分分离度不低于 1. 5。
2. 2 溶液的配置
2. 2. 1 对照品溶液的配置 精密称取金丝桃苷对
照品适量，加甲醇配制成 30 mg·L － 1的溶液，即得。
2. 2. 2 样品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)
约 0. 5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 60%
乙醇 25 mL，称定质量，加热回流 1 h，放冷，再称定
质量，用 60%乙醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取
续滤液，即得。
2. 3 测定方法 分别精密吸取对照品溶液、样品溶
液各 20 μL，注入高效液相色谱仪，按确定的色谱条
件测定，金丝桃苷与其他成分分离良好，见图 1。
图 1 赶山鞭液相色谱图
A. 对照品;B. 供试品;1. 金丝桃苷
2. 4 线性关系的考察 精密称取金丝桃苷对照品
9. 98 mg，置 100 mL 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻
度，摇匀，精密量取对照品溶液 0. 5，1，2，3，4，5 mL
分别置 10 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。按
上述色谱条件，分别进样 20 μL，测定，结果以进样
量为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲
线，得回归方程 Y = － 13 334 + 4 698 515. 6X(r =
0. 999 8)，可见，金丝桃苷进样量在 0. 099 8 ～ 0. 998
0 μg 线性关系良好。
2. 5 精密度试验 精密吸取同一样品溶液 20 μL，
按上述色谱条件，连续进样 6 次，测定色谱峰面积，
计算 RSD 0. 85%，表明仪器精密度良好。
2. 6 稳定性试验 精密吸取同一批样品溶液 20
μL，按样品溶液制备方法制备样品溶液，在 2，4，6，
8，24，48，72 h 进行分析，测定色谱峰面积，计算 RSD
0. 82%，表明样品溶液制备后 72 h 内稳定。
2. 7 重复性试验 取同一批号样品 6 份，按样品溶
液制备方法制备样品溶液，测定含量进行分析，结果
平均质量分数为1. 275 2%，RSD 2. 12%，表明本测
定方法重复性好。
2. 8 加样回收率试验 取已知准确含量(1. 275 2
mg·g － 1)的样品 6 分，每份取 0. 25 g，精密称定，置
50 mL 量瓶中，精密加入 3 mL 金丝桃苷对照品溶液
(0. 099 8 g·L － 1)，挥去甲醇，按样品溶液制备方法
制备，分别注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件下
测定金丝桃苷峰面积，计算回收率，结果见表 1。
表 1 金丝桃苷回收率试验
取样量
/ g
样品中
量 /mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
0. 251 7 0. 321 0 0. 299 4 0. 614 8 0. 293 8 98. 14
0. 249 3 0. 317 9 0. 299 4 0. 621 6 0. 303 7 101. 43
0. 253 3 0. 323 0 0. 299 4 0. 620 9 0. 297 9 99. 50 100. 11 1. 20
0. 250 8 0. 319 8 0. 299 4 0. 618 7 0. 298 9 99. 83
0. 249 6 0. 318 3 0. 299 4 0. 620 0 0. 301 7 100. 77
0. 251 5 0. 320 7 0. 299 8 0. 623 4 0. 302 7 100. 96
2. 9 样品的含量测定 取赶山鞭 7 批，按上述方法
测定，7 批 样 品 含 量 分 别 为 0. 127%，0. 232%，
0. 187%，0. 106%，0. 078，0. 169，0. 126%。表明不
同产地的赶山鞭中金丝桃苷的含量在 0. 078 ～ 0. 232
之间，平均含量为0. 146 4。
3 讨论
在药材的提取上曾采用甲醇超声提取、乙醇回
流及超声提取、40%乙醇回流提取、80%乙醇回流提
取，结果甲醇提取及乙醇提取杂质峰多，难以分离;
40%乙醇提取不完全，80%乙醇回流较 60%乙醇回
流峰杂质多，故采用 60%乙醇回流提取。在流动相
的选择上探讨过乙腈-0. 1%磷酸水溶液［3］(16∶ 82)，
结果分离度未能达到要求，换成本方法后，分离度大
于 1. 5 以上达到实验要求。
［参考文献］
［1］ 张俊松，王晓利，罗谦，等 . HPLC 测定贯叶连翘及提取
物中伪金丝桃素和金丝桃苷的含量［J］.中成药，2006，
28(5):709.
［2］ 胡君萍，杨建华 .反相高效液相色谱法同时测定新疆贯
叶连翘中芦丁和金丝桃苷的含量［J］. 药物分析杂志，
2003，23(5):363.
［3］ 中国药典 .一部［S］. 2005:159.
［责任编辑 蔡仲德］
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叶绿萍，等:赶山鞭中金丝桃苷的 HPLC 测定方法