全 文 ：2013 年 3 月第 20 卷第 3期 中国中医药信息杂志 ·67·

紫参胶囊质量控制方法研究
李琴 1,王晓玉 1,段贤春 1,魏良兵 1,孟楣 1,肖伟 2
1.安徽中医学院第一附属医院,国家中医药管理局中药制剂三级实验室,安徽 合肥 230031；
2.江苏康缘药业股份有限公司,江苏 连云港 222002
摘要：目的 建立紫参胶囊的质量控制的方法。方法 采用薄层色谱法对方中的白芍、酸枣仁、百合、首乌藤
进行定性鉴别。采用超高效液相色谱法对方中白芍的主要活性成分芍药苷进行含量测定。色谱柱：ACQUITY UPLC BEH
C18(2.1 mm×50 mm,1.7 µm)；流动相：乙腈-水(16∶84)；流速：0.250 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：230 nm。
结果 薄层色谱鉴别斑点清晰,易于鉴别。芍药苷在 0.031～0.248 µg 范围内线性关系良好,r＝0.999 9；平均加样回
收率为 99.30%,RSD＝0.99%(n＝6)。结论 本方法快速、简单,大大缩短了分析时间,可用于紫参胶囊定性定量研究。
关键词：紫参胶囊；薄层色谱法；超高液相色谱法；芍药苷；含量测定
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.03.026
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2013)03-0067-03
Study on Quality Standard of Zishen Capsule LI Qin1, WANG Xiao-yu1, DUAN Xian-chun1, WEI Liang-bing1,
MENG Mei1, XIAO Wei2 (1.The First Affiliated Hospital of Anhui College of TCM, Chinese Medicament Laboratory of
Grade 3, State Administration of TCM, Hefei 230031, China；2.Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co., Ltd., Lianyungang
222002, China)
Abstract：Objective To establish the quality standard of Zishen capsule. Methods Paeoniae Radic Alba,
Ziziphi Spinosae Semen, Lilii Bulbus and Polygoni Multiflori Caulis in Zishen capsule were identified by
TLC. Super high performance liquid chromatography (UPLC) was used to determine the content of
paeoniflorin, the main active ingredient of Paeoniae Radic Alba. The chromatography column was
ACQUITY UPLC BEH C18 (2.1 mm×50 mm, 1.7 µm). The mobile phase was acetonitrile-water (16∶84),
flow rate was 0.250 mL/min, column temperature was 30 ℃, and the detection wavelength was 230 nm.
Results TLC spots were clear and easy to identify. Paeoniflorin showed a linear relationship in the range of
0.031－0.248 µg, r ＝0.999 9. The average recovery rate was 99.30%, and RSD was 0.99% (n ＝6).
Conclusion This method is rapid, simple, and greatly reduces the time of analysis. It can be used as the
qualitative and quantitative research methods of Zishen capsule.
Key words：Zishen capsule；TLC；UPLC；paeoniflorin；content determination
紫参胶囊为国家中医临床研究基地安徽中医学院第一附
属医院的医院制剂,由前期医院制剂紫参颗粒剂型改进而成,
具有温肾填精、双调阴阳功效。前期已对紫参胶囊进行了初步
的质量标准研究[1],但随着技术方法的不断革新及 2010 年版
《中华人民共和国药典》的颁布与实施,迫切需要对紫参胶囊
定性定量的方法进行改进和优化研究,从而提高该制剂质量控
制标准。本研究采用薄层色谱法进一步对紫参胶囊方中首乌
藤、白芍、百合、酸枣仁进行定性鉴别,采用超高液相色谱法
(UPLC)对方中臣药白芍的主要活性成分芍药苷进行含量测定,
以期更好地对该制剂进行分析及相关质量控制,并为以后该制
剂新药临床前研究提供相关基础资料。
1 仪器与试药
Waters Acquity H-Class UPLC 超高效液相色谱仪(美国
Waters 公司),包括四元梯度泵、恒温自动进样器、柱温箱、

基金项目：安徽省康缘中医药科技创新基金(KYCX201011)；中
医学院临床科研基金(2010LC-046B)
Acquity ELSD 检测器以及 Waters Empower2 软件；KQ3200DB
型数控超声波清洗器(江苏昆山超声仪器有限公司)；0.22 µm
微孔滤膜(上海陆纳生物科技有限公司)；SK3200 H 超声仪(上
海科导超声仪器有限公司)；CAMAG 荧光灯(瑞士 CAMAG 公司)；
CAMAG TLCPLATEHEATERⅢ加热板(瑞士 CAMAG 公司)；定量毛细
管(瑞士 CAMAG 公司)；BP211D 十万分之一电子天平(德国塞多
利斯公司)；HH-S 型水浴锅(巩义市英峪予华仪器厂)；薄层硅
胶 G 板(青岛海洋化工集团)；CANON 数码照相机；CAMAG 双槽
展开缸；BCD-277 西门子电冰箱；TF-18 通风橱；D2F-6020 真
空干燥箱。
紫参胶囊(批号 20110512、20110918、20120331,安徽中
医学院第一附属医院制剂中心提供)。酸枣仁对照药材(批号
121100-200702)、百合对照药材(批号 121100-200702)、大黄
素对照品(批号 110756-201010)、芍药苷对照品(批号
110736-201009)均由中国药品生物制品检定所提供。甲醇、乙
腈(色谱纯,美国 Tedia 公司),蒸馏水(购自屈臣氏公司,批号
20111014),其他试剂均为分析纯。
·68· Chinese Journal of Information on TCM Mar.2013 Vol.20 No.3

2 方法与结果
2.1 薄层色谱鉴别
2.1.1 白芍 取本品内容物 5.0 g,加甲醇 50 mL,超声处理
30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇使溶解,定容至 1 mL,作为
供试品溶液。另取芍药苷对照品少量,加甲醇制成每 1 mL 含
1 mg 的溶液,作为对照品溶液。再按处方比例取除白芍外的其
他药材,依本品制备工艺制备,按供试品溶液的制备方法制得
阴性对照品溶液。照薄层色谱法(2010 年版《中华人民共和国
药典》一部附录ⅥB)试验,吸取上述供试品溶液、阴性对照品
溶液各 5 µL,对照品溶液 2 µL,分别点于同一硅胶 G薄层板上,
以三氯甲烷-甲醇-水(14∶6∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,
喷以 5%香草醛硫酸溶液,在 105 ℃加热至斑点显色清晰。结果
供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的
斑点,阴性对照无干扰。
2.1.2 酸枣仁 取本品内容物 5.0 g,加石油醚(60～90 ℃)
50 mL,加热回流 2 h,滤过,弃去石油醚液,药渣挥干,加甲醇
50 mL,加热回流 1 h,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇使溶解,定容
至 2 mL,作为供试品溶液。取酸枣仁对照药材 1.0 g,同供试品
溶液的制备方法,制得对照药材溶液。按处方比例取除酸枣仁
外的其他药材,依本品制备工艺制备,按供试品溶液的制备方
法制得阴性对照品溶液。照薄层色谱法(2010 年版《中华人民
共和国药典》一部附录ⅥB)试验,吸取上述 3 种溶液各 5 µL,
分别点于同一硅胶 G 薄层板上,以水饱和的正丁醇为展开剂,
展开,取出,晾干,置紫外光灯(365 nm)下检视。结果供试品色
谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴
性对照无干扰[2]343。
2.1.3 百合 取本品内容物 5.0 g,加甲醇 50 mL,超声处理
20 min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇使溶解,定容至 2 mL,作为
供试品溶液。取百合对照药材 1.0 g,同供试品溶液的制备方
法,制得对照药材溶液。按处方比例取除百合外的其他药材,
依本品制备工艺制备,按供试品溶液的制备方法制得阴性对照
品溶液。照薄层色谱法(2010 年版《中华人民共和国药典》一
部附录ⅥB)试验,吸取上述供试品溶液、阴性对照品溶液各 5 µL,
对照药材溶液 10 µL,分别点于同一硅胶 G薄层板上,以石油醚
(60～90 ℃)-乙酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂,
展开,取出,晾干,喷以 10%磷钼酸乙醇溶液,加热至斑点显色
清晰。结果供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,
显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰[2]123。
2.1.4 首乌藤 取本品内容物 5.0 g,加甲醇 40 mL,超声处理
30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加水 30 mL 使溶解,再加盐酸 1 mL,
加热回流 30 min,冷却,用乙醚振摇提取 2次,每次 20 mL,合并
乙醚提取液,蒸干,残渣加三氯甲烷使溶解,定容至 1 mL,作为
供试品溶液。取大黄素对照品少量,加甲醇制成每1 mL 含 0.5 mg
的溶液,作为对照品溶液。按处方比例取除首乌藤外的其他药
材,依本品制备工艺制备,按供试品溶液的制备方法制得阴性
对照品溶液。照薄层色谱法(2010 年版《中华人民共和国药典》
一部附录ⅥB)试验,吸取上述供试品溶液、阴性对照品溶液各
5 µL,对照品溶液 2 µL,分别点于同一硅胶 G 薄层板上,以正己
烷-乙酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5)为展开剂,展开,取出,晾干,
置紫外光灯(365 nm)下检视。结果供试品色谱中,在与对照品
色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰[2]249。
2.2 芍药苷的含量测定
2.2.1 色谱条件 色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×
50 mm,1.7 µm)色谱柱；流动相：乙腈-水(16∶84)；流速：
0.250 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：230 nm；进样量：
5.0 µL[3]。
2.2.2 供试品溶液的制备 取胶囊内容物 2.0 g,精密称定,
精密加入甲醇 50 mL,密塞,称定重量,超声处理(频率 53 kHz,
功率 150 W)30 min,放冷,再称定重量,加甲醇补足减失的重量,
摇匀,滤过,取续滤液 30 mL,蒸干,加甲醇使溶解,定容至 10 mL,
作为供试品溶液[4]。
2.2.3 阴性对照溶液的制备 根据处方组成,按本品制备工
艺制成缺白芍的阴性制剂,再按“2.2.2”项下方法制得阴性对
照溶液。
2.2.4 对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品,加甲醇
制成 0.031 mg/mL 的溶液,作为芍药苷对照品溶液[5]。
2.2.5 系统适用性试验 分别吸取对照品溶液、供试品溶液、
阴性对照品溶液各 5.0 µL,在上述色谱条件下,用 UPLC-PDA 测
定,结果供试品溶液色谱中芍药苷的保留时间与芍药苷对照品
保留时间一致,与其他物质峰分离度大于 1.5,理论塔板数均
在 2 000 以上,被测定成分色谱峰的紫外光谱与各自对照品的
紫外光谱一致；阴性对照品溶液色谱中与供试品中芍药苷相应
的保留时间处无色谱峰出现。色谱图见图 1。








A B








C
注：A.对照品；B.供试品；C.阴性对照
图 1 紫参胶囊中芍药苷 HPLC 图
2.2.6 线性关系考察 分别准确吸取 1、2、4、6、8 µL 对照
品溶液,按“2.2.1”项下色谱条件进样,测定,以对照品溶液的
体积为横坐标,峰面积值为纵坐标,绘制标准曲线,计算回归方
t/min
3.
25
2
3.
23
8
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程 Y ＝50 714X －37 376,r ＝0.999 9。结果表明,芍药苷在
0.031～0.248 µg 范围内,芍药苷进样量与峰面积呈良好的线
性关系。
2.2.7 精密度考察 取芍药苷对照品溶液(0.031 mg/mL)2 µL,
按“2.2.1”项下色谱条件连续进样 6 次,测定峰面积,芍药苷
对照品峰面积值的 RSD＝0.11%,结果表明仪器的精密度良好。
2.2.8 稳定性试验 取同一批号(20120331)供试品溶液,分
别于 0、2、4、8、12、24 h 进样 2 µL,注入液相色谱仪,测定
并记录芍药苷的峰面积值,计算 RSD＝1.96%,结果表明芍药苷
在 24 h 内稳定。
2.2.9 重复性试验 取同一批号(20120331)供试品 6 份,按
“2.2.2”项下方法制成供试品溶液,分别进样 2 µL,测定芍
药苷峰面积,结果样品中芍药苷的平均含量为 0.097 0 mg/g,
RSD＝0.46%(n＝6)。结果表明本方法重复性良好。
2.2.10 加样回收率试验 取已知芍药苷含量的同一批样品
(批号 20120331)6 份,每份精密称取 1.0 g,分别精密加入芍药
苷对照品溶液 3.2 mL(0.031 mg/mL),按“2.2.2”项下方法制
成供试品溶液,按“2.2.1”项下色谱条件测定,进样 2 µL,计
算回收率,结果芍药苷平均回收率为 99.30%,RSD＝0.99%,表
明回收率良好。结果见表 1。
表 1 芍药苷加样回收率试验结果
取样量
(g)
样品中含
量(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
1.084 2 0.105 3 0.099 2 0.204 1 99.60
0.995 7 0.096 7 0.099 2 0.196 7 100.81
1.053 2 0.102 3 0.099 2 0.201 1 99.60
99.30 0.99
0.998 4 0.096 9 0.099 2 0.194 6 98.49
1.035 8 0.100 6 0.099 2 0.199 1 99.29
1.014 3 0.098 5 0.099 2 0.195 7 97.98
2.2.11 样品含量测定 取 3 批紫参胶囊(批号 20110512、
20110918、20120331)各 2.0 g,精密称定,按“2.2.2”项下方
法制成供试品溶液,进样 2 µL,按“2.2.1”项下色谱条件测定,
计算紫参胶囊中芍药苷的含量。结果见表 2。
表 2 样品含量测定结果
批号 芍药苷含量(mg/g)
20110512 0.097 4
20110918 0.097 9
20120331 0.097 1
3 讨论
在薄层色谱鉴别中,参照 2010 年版《中华人民共和国药
典》(一部)首乌藤的薄层鉴别方法,采用乙醇进行提取,以石油
醚(30～60 ℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开
剂,无对应斑点,分析得知,由于乙醇极性不够大,而本药采用
水提工艺制备,含脂溶性成分很少,故改为极性更大的甲醇提
取,结果斑点清晰无干扰。
在芍药苷含量测定过程中,供试品溶液制备方法分别考
察了不同浓度乙醇、甲醇等溶剂进行回流、超声等方法[6],结
果表明,以甲醇超声提取效率较高、提取效果较好。本试验比
较了甲醇-水、乙腈-水、甲醇-磷酸溶液、乙腈-磷酸溶液等
比例及梯度洗脱等条件下对样品中芍药苷分离度的影响,结
果发现,采用乙腈-水(16∶84)洗脱时芍药苷即能得到良好的
分离。
参考文献：
[1] 刘晓闯,梁文珍,孟楣,等.紫参胶囊质量标准研究[J].中国实验方剂学
杂志,2008,14(4)：9-10.
[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科
技出版社,2010.
[3] 周小平,蒋玉梅,周围,等.超高效液相色谱测定前列安通片中的芍药苷
含量[J].中国卫生检验杂志,2008,18(1)：8-9.
[4] 王宛,王建明.HPLC法测定颈通茶中葛根素和芍药苷的含量[J].中国中
医药科技,2010,17(6)：529.
[5] 孙小玲.HPLC 法测定追风透骨片中芍药苷的含量[J].中国药师,2010,
13(6)：819.
[6] 谢文健.HPLC 法测定莪棱胶囊中芍药苷的含量[J].中国药师,2010,
13(4)：592-593.
(收稿日期：2012-08-22,编辑：陈静)

清热消炎宁可减轻
流感病毒引起的肺损伤
暨南大学中药与天然药物研究所与广药集团广州白云
山敬修堂药业股份有限公司合作的研究项目成果“九节茶提
取物对拘束应激小鼠感染流感病毒所致肺炎的保护作用”受
邀在世界中医药学会联合会中药药理专业委员会第五届学
术年会上发布。来自北京大学、复旦大学、同济大学、香港
中文大学、澳门大学、长崎国际大学、日本庆应义塾大学、
北里大学和韩国庆熙大学等境内外中西医结合药理研究领
域众多专家学者高度肯定了该研究成果。
该项研究结果显示,口服清热消炎宁胶囊能减少病毒感
染应激小鼠的发病率和死亡率,并显著延长感染的平均存活
时间；通过对感染小鼠的肺组织病理学研究发现,给予清热
消炎宁能明显减轻流感病毒感染引起的肺损伤；研究结果还
显示,清热消炎宁能显著减少肺组织中的病毒量,上调易感
性相关基因肺表面活性蛋白(SP)-A,SP-D及干扰素诱导跨膜
蛋白 mRNA 的表达水平,血清中的一氧化氮水平也得到了控
制,抑制核因子-κB 向核内聚集,明显降低了肺组织中前炎
因子诱导型一氧化氮合酶、白细胞介素-1 和肿瘤坏死因子
mRNA 的表达。研究结果表明,清热消炎宁对感染流感病毒的
应激小鼠及其继发性肺炎具有保护作用,其机制可能与降低
机体对流感的易感性和抗炎作用有关。
(杜德安)