全 文 :藏药迷果芹脂溶性成分分析①
① 浙江省湖州市自然科学基金 ( 2012C50129) ;国家自然科学基金 ( 31070475)
② 联系人 ,手机: ( 0) 13997039273;传真: ( 0971) 6143282; E-mail: pi li@ nwipb. cas. cn
作者简介:皮立 ( 1972— ) ,男 ,江西省樟树市人 ,副教授 ,博士 ,主要从事药物分析和植物化学研究。
韩发 ( 1953— ) , 男 ,青海省湟中县人 ,教授 ,主要从事植物生理生态研究。
收稿日期: 2013-07-11;接受日期: 2013-07-18
皮 立② a,b , c,d 韩 发a,b , c 赵晓辉a ,b, c 李以康a,b , c 王晓虹a ,b, d 邓 黎b
a (中国科学院西北高原生物研究所 西宁市新宁路 23号 810008)
b (中国科学院西北高原生物研究所湖州高原生物资源产业化创新中心 浙江省湖州市红丰路 1366号 313000)
c(中国科学院高原生物适应与进化重点实验室 西宁市新宁路 23号 810008)
d (中国科学院大学 北京市玉泉路 19号 100049)
摘 要 采用气相色谱 -质谱 ( GC-MS)联用技术对藏药迷果芹的脂溶性成分进行分析。从藏药迷果芹
石油醚萃取物中分离鉴定出 26种化合物 ,占其总量的 98. 77%。 在已鉴定的化学成分中 ,含量较高的化学
成分依次为亚油酸 ( 35. 90% )、芹菜脑 ( 23. 98% )、棕榈酸 ( 11. 41% )、亚油酸乙酯 ( 4. 08% )、亚油酸甲酯
( 4. 06% )、U-谷甾醇 ( 4. 40% )。本研究为开发迷果芹资源提供了科学依据。
关键词 藏药 ;迷果芹 ;脂溶性成分 ;气相色谱 -质谱联用 ;芹菜脑
中图分类号: O657. 63 文献标识码: A 文章编号: 1004-8138( 2013) 05-2708-04
1 引言
藏药迷果芹 ( Sphallerocarpus gracilis )系伞形科 ( Umbelliferae)迷果芹属单种植物 ,又名黄参 ,黄
葑 ,野胡萝卜等。主要分布于我国的青海 ,西藏 ,甘肃等地区 [1 ]。迷果芹有几千年的药用历史 ,藏医
将其全草入药 ,有祛风除湿等功效 ,用于治疗风湿性关节痛和病后体弱等症的治疗。近年来国内对
它的药理研究发现 ,迷果芹还具有抗疲劳 ,抗缺氧 ,改善睡眠 ,提高记忆力等功效 [2 ]。 迷果芹是藏药
“五根散”的首药 ,“五根散”主要用于滋补强身 ,抗缺氧 ,干黄水。主治寒性黄水病 ,关节炎 ,腰腿肿
胀 ,心脏病 ,痛风 ,病后体弱等症 [3 ]。 近年来开发的“唐蕃补脑液” 也是以迷果芹作为首药研制而成
的 ,用于抗缺氧 ,抗疲劳和延缓衰老的治疗 [4, 5 ]。目前迷果芹植物化学成分的研究工作主要集中在乙
酸乙酯部分 ,对脂溶性成分的研究工作鲜见报道。本文主要研究迷果芹醇提物的石油醚萃取部分。
采用气质联用的方法首次研究迷果芹的脂溶性成分 ,为迷果芹的综合开发和利用提供理论依据。
2 实验部分
2. 1 试剂与仪器
本实验所用材料迷果芹 , 2012年 9月中旬购于青海省西宁市八一路中藏药材市场 , 经我所卢
学峰副研究员鉴定为迷果芹块根。正己烷 (色谱纯 ,山东禹王实业有限公司 ) ,石油醚 (分析纯 ,天津
百世化工有限公司 )正构烷烃 ( C7-C30,美国 Sigma-Aidrich公司 ) , Agilent7890A /5975C型气相色
谱 -质谱联用仪 ( GC-M S) (美国 Agilent公司 )。
2. 2 实验方法
2. 2. 1 脂溶性成分的提取
称取经 60℃烘干恒重的迷果芹块根 300g ,粉碎过 40目筛 ,置于 2L烧瓶中 , 料液比 1∶ 5加
70%乙醇浸泡过夜 , 70℃热提取 2 h ,将提取液滤出 ,加入适量 70%乙醇继续热提取 2h,合并提取
液 ,回收酒精得到迷果芹的醇提取物。将醇提取物加入适量的热水溶解 ,移入分液漏斗中 ,加入等体
积的石油醚 ( 60— 90℃ )萃取 ,静置 4h,移出石油醚层 ,重新萃取 2次 ,合并石油醚提取液 ,回收石油
醚 ,挥干石油醚残余 ,得到石油醚萃取部分。
2. 2. 2 样品的前处理
迷果芹石油醚萃取部分用正己烷稀释成质量分数为 10%的溶液 ,保留指数测定用经正己烷稀
释成质量分数为 1% 的正构烷烃 ( C7-C30)溶液 ,进样前均用 0. 45μm有机相滤膜过滤 ,同等色谱条
件下进行分析。
2. 2. 3 仪器分析条件
色谱条件: 采用 DB-5M S弹性石英毛细管柱 ( 30m× 0. 25mm× 0. 25μm) ,载气为高纯氦气
( 99. 999% ) ,恒流模式 ,柱流量为 1. 0mL· min- 1 ,汽化室温度为 250℃ ,程序升温 ,柱起始温度 50℃
保持 6min,以 20℃ /min的速率程序升温至 150℃ ,以 8℃ /min的速率程序升温至 220℃ ,再以
5℃ /min的速率程序升温至 280℃保持 10min。 分流比为 50∶ 1,溶剂为正己烷 ,进样量为 1. 0μL。
质谱条件:电子轰击 ( EI) ,电子能量 70eV,离子源温度 230℃ ;四级杆温度 150℃ ,扫描质量范
围 50— 800amu,全扫描方式 , N IST05质谱库。
3 结果与讨论
按照上述色谱和质谱条件对迷果芹的石油醚萃取部分进行分析 ,各组分均得到了较理想的分
离效果 ,共分离出 28个峰。色谱峰相应的质谱图经 NIST05谱库检索及人工解析 ,结合保留指数共
同确定 ,扣除柱流失后 ,确定其中的 26种化合物 ,用峰面积归一化法计算出各成分的相对百分含
量 ,所鉴定成分占挥发油总量的 98. 77% ,结果见表 1。
结果表明 ,藏药迷果芹脂溶性成分主要含醚类、脂肪酸类、酯类和甾醇等成分。脂溶性成分主要
有芹菜脑 ( 23. 98% )、棕榈酸 ( 11. 41% )、亚油酸 ( 35. 90% )、亚油酸乙酯 ( 4. 08% )、亚油酸甲酯
( 4. 06% )、U-谷甾醇 ( 4. 40% )。含量在 1%— 2%之间的成分有:棕榈酸乙酯 ( 1. 66% )、 5, 8, 11-十七
烷三烯酸甲酯 ( 1. 35% )、 5, 8, 11, 14-二十烷四烯酸甲酯 ( 1. 84% )、维生素 E( 1. 21% )、豆甾醇
( 1. 47% )。
亚油酸是人体必需不饱和脂肪酸 ,具有降血脂、降血压、软化血管、促进微循环的作用 [ 6]。芹菜
脑在迷果芹的脂溶性成分中的含量很高 ,达到了 23. 98%。芹菜脑具有退热 ,解痉 ,通经和杀虫的作
用 [7 ]。据文献报道莳萝芹菜脑具有延长小鼠睡眠的作用 [8 ] ,作为它的同分异构体芹菜脑可能也有相
似的作用。对芹菜脑的进一步药理研究 ,将为揭示迷果芹促进睡眠功能找到直接理论依据。迷果芹
脂溶性成分中还含有少量醚类 ,丁香酚甲醚和肉豆蔻醚。 丁香酚甲醚广泛应用于配制伊兰型、康乃
馨型、紫丁香型等香精 ,在食用香精和烟草香精中亦常使用 [9 ]。研究表明 ,肉豆蔻醚具有抗氧化作用
和延长睡眠的作用 [8, 10 ]。
2709第 5期 皮立等:藏药迷果芹脂溶性成分分析
表 1 迷果芹脂溶性成分的 GC /MS测定结果
保留时间 化合物名称 分子式 分子量 相似度 保留指数 含量 (% )
1 14. 201 丁香酚甲醚 C11H14O3 194 82 1455 0. 091
2 14. 391 肉豆蔻醚 C11H12O3 192 95 1516 0. 089
3 14. 668 榄香素 C12H16O3 208 91 1550 0. 799
4 15. 704 惕各酸香叶酯 C15H24O2 236 87 1635 0. 196
5 16. 225 芹菜脑 C12H14O4 222 94 1705 23. 98
6 16. 790 十一烷基苯 C17H28 232 80 1760 0. 507
7 18. 133 正十五酸 C15H30O2 242 94 1869 0. 194
8 18. 872 棕榈酸甲酯 C17H34O2 270 94 1878 0. 207
9 19. 400 棕榈酸 C16H32O2 256 80 1968 11. 41
10 19. 659 棕榈酸乙酯 C18H36O2 284 92 1978 1. 660
11 20. 227 5, 8, 11-十七烷三烯酸甲酯 C18H24O2 272 80 2030 1. 351
12 20. 920 亚油酸甲酯 C19H34O2 294 94 2093 0. 585
13 21. 725 亚油酸 C18H32O2 280 92 2183 35. 90
14 21. 904 亚油酸乙酯 C20H36O2 308 93 2193 4. 076
15 22. 004 亚麻酸甲酯 C20H34O2 306 99 2201 4. 061
16 22. 605 5, 8, 11, 14-二十烷四烯酸甲酯 C21H34O2 318 80 2308 1. 835
17 24. 314 二十烷酸 (花生酸 ) C20H40O2 312 83 2356 0. 467
18 24. 686 1-( 1-氧代 -7, 10-十六烷二烯基 )-吡咯烷 C20H35NO 305 80 2366 0. 650
19 28. 786 8, 11, 14-二十二烷三烯酸甲酯 C23H40O2 348 81 2499 0. 850
20 28. 929 环己甲酸十五烷基酯 C22H42O2 338 80 2439 0. 892
21 31. 391 增塑剂 0. 444
22 56. 096 3, 5-二烯豆甾烷 C29H48 396 85 2525 0. 411
23 57. 918 维生素 E C29H50O2 430 91 3149 1. 208
24 59. 583 菜油甾醇 C28H48O 400 82 3153 0. 444
25 60. 397 豆甾醇 C29H48O 412 90 3228 1. 473
26 61. 912 U-谷甾醇 C29H50O 414 94 3234 4. 403
4 结论
本文通过对迷果芹乙醇提取物石油醚萃取部分的气质联用分析 ,得到了 28个成分 ,鉴定了其
中的 26个成分。 发现迷果芹的脂溶性成分主要由醚类 ,脂肪酸类 ,酯类和甾醇类 4类化合物组成。
其中含量最高的是亚油酸 ( 35. 90% ) ,其次是芹菜脑 ( 23. 98% ) ,棕榈酸的含量居第三位 ( 11. 41% ) ,
其他的含量较高的化合物依次为:U-谷甾醇 ( 4. 40% ) ,亚油酸乙酯 ( 4. 08% ) ,亚油酸甲酯 ( 4. 06% )。
本文首次对藏药迷果芹的脂溶性成分进行了 GC /M S分析研究 ,为揭示藏药迷果芹抗缺氧 ,改善睡
眠和抗炎等作用的物质基础和活性成分的深入研究提供了理论依据 ,为更好的开发迷果芹的医疗
保健功能提供了基础数据。
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Analysis of Fat-Soluble Components of Traditional Tibetan
Medicine Sphallerocarpus gracilis
PI Li
a,b ,c,d HAN Faa,b ,c ZHAO Xiao-Huia,b ,c LI Yi-Kanga,b ,c
WAN G Xiao-Hong
a ,b, d DENG Lib
a (Northwest Institute o f Plateau B iology ,CAS ,X inin g 810008, P. R. China )
b( Huzhou Plateau Biological Resource Centre of Innovat ion , Northwest Plateau Institute of Biolog y,
CAS , Huzhou , Zhej iang 313000, P. R.China)
c(Key Laborator y of Adaptation and Evolution of Plateau Biota , Northwest Institute of Plateau Biolog y,
CAS ,X ining 810008, P. R. China )
d (Graduate University Chinese Acad emy of Science,Beijing 100049,P . R.Ch ina )
Abstract The fat-soluble components of Sphal lerocarpus gracilis was separated by capillary GC,
the chemical consti tuents were determinaed by no rmalization and w ere identi fied by M S. 26
compounds w ere identified, w hich comprised more than 98, 77% fat-soluble components . The major
compound w ere linolic acid ( 35. 90% )、 apiole ( 23. 98% )、 palmic acid ( 11. 41% )、 ethyl linoleate
( 4. 08% )、 methyl linoleate( 4. 06% )、U-sitosterol( 4. 40% ) etc. The results can provide scientific basis
for exploi tation of resource of Sphallerocarpus gracilis.
Key words Traditional Tibetan Medicine; Sphallerocarpus gracilis; Fat-Soluble Components;
GC /M S; Apiole
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①引自 h ttp: / /www . w anfangdata. com. cn
2711第 5期 皮立等:藏药迷果芹脂溶性成分分析