全 文 : 收稿日期:2013-03-18
基金项目:海南大学植物学国家级重点学科项目资助
作者简介:尤丽莉(1979-),女,辽宁沈阳人,讲师,从事植物生理与分子生物学研究。E-mail: youlily521@163.com
注: 邹积鑫为通讯作者。E-mail: zourich@163.com
瘤蕨孢子组织培养与快速繁殖(简报)
尤丽莉 1,邹积鑫 2
(1.海南大学 园艺园林学院,海南 海口 570228;2.中国热带农业科学院 橡胶研究所,海南 儋州 571737)
Tissue Culture and Rapid Propagation of Phymatosorus scolopendria
YOU Li-li1, ZOU Ji-xin2
(1.College of Horticulture and Landscape, Hainan University, Haikou 570228, Hainan China;2.Rubber Research Institute,
Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Danzhou 571737, Hainan China)
摘 要:以瘤蕨的孢子为外植体进行组织培养研究。结果表明,瘤蕨的成熟孢子在 1/2 MS培养基上萌发速度
最快,萌发率最高;瘤蕨的原叶体在 1/2MS + 1.0 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA培养基上增殖速度较快,但增殖
过程中不能形成孢子体;在培养基 1/2MS +1.0 m/L AgNO3 + 0.05 mg/L NAA上成功诱导出孢子体;孢子体在培
养基 1/2MS + 0.5 mg/L IAA上可进行分株扩增,最终获得大量孢子无菌苗。
关键词:瘤蕨;组织培养;快速繁殖
Doi: 10.3969/j.issn.1009-7791.2013.03.019
中图分类号:Q949.1;Q943.1 文献标识码:B 文章编号:1009-7791(2013)03-0271-01
1 植物名称与材料类别 瘤蕨 Phymatosorus scolopendria成熟孢子。
2 培养条件 (1)孢子萌发培养基:1/2MS;(2)原叶体增殖培养基:1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA
0.3 mg/L;(3)孢子体诱导培养基: 1/2MS+AgNO3 1.0 mg/L+NAA 0.03 mg/L;(4)孢子体增殖培养基:
1/2MS+IAA 0.5 mg/L。以上培养基均添加 30 g/L蔗糖和 6 g/L琼脂,调 pH至 5.8。培养温度(28±2) ℃,
日光灯光源,光照强度 1000~1500 lx,光照时间 12 h/d。
3 生长情况
3.1 无菌材料的获得 将长有成熟孢子囊的瘤蕨叶片置于洁净、密封的纸袋中,于干燥通风处让孢子
自然散落,10~15 d后收集成熟孢子,用滤纸包好。在超净工作台上,用 75%酒精浸泡 20 s,再用 0.1%
升汞浸泡 5 min,无菌水漂洗 3~4次。然后将消毒的孢子接种于孢子萌发培养基上。经过 1~2周,培
养基中能见到零星的绿色小点,显微镜检验可见孢子萌发;60 d左右可见原叶体形成。经过一段时间,
原叶体簇生成团状,彼此相连,很少见到单个原叶体。
3.2 原叶体增殖 将孢子萌发成的原叶体团分散成小块,每块约 0.5 cm×0.5 cm,含 3~5片原叶体,
接种到原叶体增殖培养基上,原叶体可大量增殖,形成球状绿色紧密簇生的原叶体团,这些原叶体团
会生长连接成片。45~60 d可继代一次,多次继代可得到大量的原叶体。
3.3 孢子体诱导 将原叶体团分割成 1 cm×1 cm大小,接种到培养基(3)上。60 d后可见孢子体产生。
3.4 孢子体增殖 将孢子体分株接种到孢子体增殖培养基上,可诱导产生大量的孢子体新株,继续分株
进行扩增,最终得到大量无菌孢子体。
3.5 炼苗与移栽 将试管生根苗置于室温下放置 3~4 d,去盖,用镊子从培养瓶中取出组培苗,移栽
至腐殖土中,遮阴,湿度保持在 90%左右。移栽后 30 d,成活率可达 90%以上。
4 意义与进展 瘤蕨 Phynatosorus scolopendria为水龙骨科瘤蕨属植物,在我国海南、广东和台湾等
地有分布。附生植物,根状茎长而横走,肉质;叶片通常羽状深裂,少有单叶不裂或 3 裂。除具有观
赏价值外还具有一定的药用价值,彝药,全草治疗跌打损伤、外伤流血、烫伤、尿道辣痛等。通过孢
子组织培养研究瘤蕨快速繁殖途径,可为进一步进行药用成分研究及大规模种苗生产提供技术支持。
2013,42(3):271.
Subtropical Plant Science