全 文 ：湖南农业科学· 21
勐海县地处高原山区，海拔高低相差极大，地貌
类型多样，气候类型复杂，气温垂直落差异常显著，其
自然条件非常适宜茶树生长，且大部分茶园为天然生态
茶园。不同地区所产的晒青毛茶在品质上差异较大，
而晒青毛茶是普洱茶的主要原料，它的好坏决定了普
洱茶品质的优劣[1-4]。儿茶素是茶叶中最主要的生物活
性成分之一，占茶叶干重的12%~24%；主要包括没食
子酸（GA）、表没食子儿茶素（EGC）、右旋儿茶素
（C）、表儿茶素（EC）、表没食子儿茶素没食子酸酯
（EGCG）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）等成分[5-6]。
试验采用高效液相色谱法对勐海县普洱茶主要产
区的晒青毛茶儿茶素单体进行测定，以期揭示不同地区
所产晒青毛茶中儿茶素单体成分及含量的差异，为构建
茶叶指纹图谱提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试茶叶样品为2010年春季在勐海县10个主要
产茶乡镇按一芽一叶标准采摘15个古树茶样和10个生
态茶样；试验主要试剂有儿茶素类化合物标样（美
国S I G M A公司）、甲醇（色谱纯）、乙腈（色谱
纯）、乙酸（色谱纯）等；试验主要仪器有超纯水仪
（Millipore公司）、分析天平（Denver公司）、水浴
锅（北京精瑞科技有限公司）、离心机（Beckman公
司）、高效液相色谱仪（Waters公司）。
1.2 试验方法
1.2.1 晒青毛茶样品的前处理 高温杀青晒干，每个茶
样得干茶样约300 g备用。工艺流程为鲜叶→摊青→杀
青→晒干→磨样→分析。准确称取茶粉1.000 0 g，加入
80%（V/V，下同）甲醇100 mL，于30℃水浴中超声提
取20 min，经滤纸过滤，洗涤滤渣3次后合并滤液，定
容至200 mL，用0.45 μm滤膜过滤后备用[7]。茶样由云
南省农业科学院茶叶研究所茶叶加工与检测中心分析检
测。
1.2.2 混合标样的配制 标准储备液：分别称取6种儿
茶素类化合物的固体标样各10 mg，用50%的甲醇水溶
液溶解并定容至10 mL，则6种儿茶素类化合物的标准储
备液浓度均为1 mg/mL。
1.2.3 色谱检测条件 采用GB/T8313-2008中的方法进
收稿日期：2013-11-25
基金项目：西双版纳州科技局项目（YX201104）
作者简介：蔡 丽（1983-），女，云南宣威市人，助理研究员，主要从事茶
叶生理生化分析研究
通讯作者：梁名志
HPLC法测定勐海县晒青毛茶儿茶素单体含量的研究
蔡 丽1,2，梁名志1,2，夏丽飞1,2，杨盛美1,2，李晓霞1,2，陈 枚1,2，李友勇1,2，冉隆珣1,2
（1.云南省农业科学院茶叶研究所，云南 勐海 666201；
2.云南省茶树种质资源创新与配套栽培技术工程研究中心，云南 勐海 666201）
摘 要：以勐海县10个主要产茶乡镇的25个晒青毛茶样品为材料，通过高效液相色谱法进行儿茶素单体主要成分的含量测定，并对样品中儿茶
素单体成分含量的差异进行了统计分析。结果表明：勐海县各乡镇晒青毛茶中儿茶素单体成分的含量差异显著，且在检测中重复性和稳定性较
好。因此，儿茶素单体成分及含量可作为勐海县晒青毛茶HPLC指纹图谱的特征峰，用于鉴定茶叶的来源和品质。
关键词：勐海县；晒青毛茶；HPLC；儿茶素单体；含量
中图分类号：TS272.7 文献标识码：A 文章编号：1006-060X（2014）01-0021-03
Detection of Catechin Monomer Content in Pu-erh Crude
Tea from Menghai County by HPLC Method
CAI Li1,2, LIANG Ming-zhi1,2, XIA Li-fei1,2, YANG Sheng-mei1,2, LI Xiao-xia1,2, CHEN Mei1,2,
LI You-yong1,2, RAN Long-xun1,2
(1. Tea Research Institute, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Menghai 666201, PRC; 2. Yunnan Provincial Engineering Research
Center of Germplasm Resource Innovation and Corresponding Cultivating Techniques of Tea Tree, Menghai 666201, PRC)
Abstract: Taking 25 samples of Pu-erh crude tea from 10 main tea-produce towns (villages) of Menghai County as materials to detect the
contents of main components of catechin monomer by HPLC, and a statistical analysis was conducted to the differences in the contents of
main components of catechin monomer among samples. The results showed that there were signifi cant differences in the contents of main
components of catechin monomer among Pu-erh crude tea samples from each town (village) of Menghai County, and the repeatability and
the stability of the test were great. Therefore, the components of catechin monomer and their contents can be taken as the characteristic
peak of HPLC fi ngerprint to identify the source and quality of Pu-erh crude tea.
Key words: Menghai County; Pu-erh crude tea; HPLC; catechin monomer;content
生理生化｜遗传育种｜耕作栽培
DOI:10.16498/j.cnki.hnnykx.2014.01.001
22 • HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES
图1 儿茶素类化合物标样色谱图
Fig.1 The chromatogram of catechins compounds standard
分 钟
行检测。流动相：A为甲醇，B为乙腈；流动相的梯度
为从10%的乙腈到 60%的乙腈，流速1 mL/min，在36
min内完成；色谱柱为waters-C18（5 μm，4.6 mm×250
mm）；检测波长280 nm。每次检测完成后，系统平
衡15 min后重复3次进样。所得数据用Empower软件处
理。
2 结果与分析
2.1 标准曲线
从图1中看出，在试验设置的色谱条件下，各种单
体物质的分离度较高，峰形较好。这说明该色谱条件符
合试验要求。其中，Caf为咖啡碱，虽然其不是儿茶素
类，但却是茶叶的主要内含物质；EGC的保留时间为
11.4 min，图1中未有明显峰形，是因为其在茶叶中含
量较少，为了突出其他几种儿茶素单体的峰形，特用
Empower软件对标样色谱图进行了处理。
表1 茶叶样品中6种儿茶素类化合物的含量
Table 1 Content of six kinds of catechin compounds in tea sample
茶样名称 GA EGC C EC EGCG ECG
格朗和乡南糯山石头老寨生态茶 1.118 0.628 4.796 2.212 5.537 5.651
格朗和乡苏湖村生态茶 0.930 0.468 3.821 2.742 4.252 5.139
格朗和乡南糯山半坡老寨古树茶 1.305 0.443 5.955 2.294 5.809 5.919
格朗和乡帕沙村古树茶 1.144 0.521 5.427 2.897 5.160 6.853
布朗山乡老班章古树茶 1.457 0.226 7.620 1.704 5.470 5.496
布朗山乡章家村三队生态茶 0.852 0.560 2.603 2.096 5.829 5.751
布朗山乡班章村老曼娥生态茶 0.975 0.552 2.728 2.496 3.926 6.504
布朗山乡班章村新班章生态茶 1.263 0.563 5.850 2.333 5.944 6.423
布朗山乡勐昂村卫东小组生态茶 0.954 0.558 3.016 2.446 4.767 6.140
勐宋乡蚌龙老寨生态茶 0.809 0.999 2.269 3.083 5.039 5.882
勐宋乡曼吕村那卡古树茶 1.132 0.775 4.283 2.320 5.547 6.529
勐宋乡保塘旧寨古树茶 0.944 0.888 3.544 2.329 5.637 5.775
勐宋乡三迈村南本老寨古树茶 1.120 0.593 4.323 0.902 5.898 5.357
勐宋乡大安村曼西良村古树茶 1.097 0.785 4.720 1.698 5.498 6.852
西定乡曼迈村古树茶 1.044 0.760 4.512 2.287 6.120 5.582
西定乡章朗村古树茶 0.972 0.705 3.037 1.158 5.365 5.684
西定乡曼佤村委会贺松村古树茶 1.259 1.058 4.561 2.559 6.424 5.976
勐混镇贺开曼弄老寨古树茶 1.151 0.401 5.559 1.140 5.866 6.619
勐混镇贺开曼迈古树茶 1.162 0.498 4.675 1.382 5.446 5.668
勐混镇班盆古树茶 1.115 0.525 5.254 1.352 5.273 6.431
勐阿镇曼短村生态茶 1.149 0.524 3.945 2.073 6.264 6.050
勐海镇曼短村生态茶 0.965 0.540 3.817 0.920 5.044 5.169
勐满镇城子村委会坝老僾尼生态茶 1.097 0.650 2.339 0.971 5.809 5.170
勐往乡曼糯大寨古树茶 1.235 0.532 3.363 2.508 6.531 6.554
打洛镇曼夕村古树茶 1.058 0.546 4.163 2.105 5.259 4.593
（%）
样品分类
含量均值 变异系数
GA EGC C EC EGCG ECG GA EGC C EC EGCG ECG
总 体 1.092 0.612 4.247 2.000 5.509 5.911 13.56 30.22 30.08 32.21 11.08 9.93
古树茶 1.150 0.620 4.730 1.910 5.690 5.990 11.34 34.21 24.09 32.16 7.33 10.65
生态茶 1.010 0.600 3.520 2.140 5.240 5.790 14.01 24.43 32.95 32.63 14.65 8.78
表2 古树茶与生态茶儿茶素单体成分统计分析
Table 2 The statistical analysis of catechin monomer compositions in old-plan and ecological tea （%）
2.2 勐海县晒青毛茶儿茶素单体HPLC指纹图谱
由表1可知，各乡镇晒青毛茶的儿茶素单体成分的
含量差异显著。其中，布朗山乡老班章古树茶的没食
子酸（GA）和右旋儿茶素（C）的含量远远高于其他
乡镇茶叶的含量，而表没食子儿茶素（EGC）和表儿
茶素（EC）的含量却稍低于其他乡镇茶叶的含量；而
EGC、EC、EGCE、ECG含量最高的分别是西定乡曼佤
村委会贺松村古树茶、格朗和乡苏湖村生态茶、勐往乡
曼糯大寨古树茶、格朗和乡帕沙村古树茶。
由表2可知，各茶叶样品的出峰时间及出峰顺序均
较稳定，各种儿茶素单体在勐海县产茶区的古树茶和生
态茶中的含量差异显著。其中，EGC、C和EC的总变异
数超过30%，这在同地区茶叶化学成分检测上是比较罕
见的现象，值得进一步研究。
3 讨 论
试验结果表明：勐海县各乡镇晒青毛茶中儿茶素
单体成分的含量差异显著。这从理论上解释了勐海各茶
区茶叶感官差异显著的主要原因，也为勐海县晒青毛
茶的指纹图谱建立提供了理论依据。在HPLC检测过程
中，儿茶素单体成分均有稳定的出峰时间和峰面积，因
此儿茶素单体成分及含量可作为勐海县晒青毛茶HPLC
指纹图谱的特征峰，用于鉴定茶叶的来源和品质，有望
成为勐海晒青毛茶的化学条码，这在茶叶的质量监督和
生化成分检测中具有重要意义。根据25种晒青毛茶的儿
茶素单体成分含量不同，可制定全县各乡镇茶叶开发计
划，有针对性地开发利用特有的茶树资源，为实现勐海
生理生化｜遗传育种｜耕作栽培
湖南农业科学· 23
县“中国茶叶第一县”的目标提供指导。
茶叶中各种成分含量是相辅相成、互相影响的，
对茶叶品质起着决定性的。HPLC指纹图谱的识别技术
与模型构建是茶叶鉴定的关键步骤，也是目前学者关注
较多的研究领域[8]。由于茶叶成分绝大多数可在液相色
谱上进行检测分析，且具备分离效能好、选择性强、检
测灵敏度高、分析速度快、应用范围广以及可用作实验
室小量制备等优点，使得液相色谱法成为茶叶指纹图谱
技术的首选方法[9-12]。目前，茶叶的指纹图谱研究的普
及力度远不及中药材的指纹图谱研究，但是随着茶叶消
费水平以及人们对自身健康关注度的不断提高，茶叶品
质评价体系有待于进一步科学化、合理化。在这一过程
中，指纹图谱研究必然将发挥其重要作用。
参考文献：
[1] 宁井铭，张正竹，谷勋刚，等. 云南晒青毛茶HPLC指纹图谱的
研究[J]. 食品与发酵工业，2009，35（9）：36-40.
[2] 夏丽飞，梁名志，王 丽，等. 勐海晒青茶品质化学研究[J]. 中
国农学通报，2012，28（16）：239-244.
[3] 梁名志，夏丽飞，张 俊，等. 老树茶与台地茶品质比较研究[J].
云南农业大学学报，2006，21（4）：493-497.
[4] 陈继伟，梁名志，罗正飞，等. 南糯山古树红茶香气化合物的组
分研究[J]. 安徽农业科学，2010，38（33）：18734-18736.
[5] 康海宁，陈 波，张 巍，等. HPLC法测定茶叶水提液中五种
儿茶素和咖啡碱及其用于茶叶分类的研究[J]. 分析测试学报，
2007，26（2）：211-215.
[6] 廖夫生. HPLC法同时测定茶叶中4种儿茶素类成分[J]. 中国茶
叶，2008，30（9）：24-25.
[7] 倪 倩，佟 玲，高 钧，等. 高效液相色谱-质谱法及模式识别
法用于鉴别普洱生茶与熟茶[J]. 理化检验（化学分册），2012，
48（2）：171-181.
[8] 刘 英，吴曙光，尹 州，等. 指纹图谱技术在茶叶研究上的应
用[J]. 茶叶科学，2013，33（1）：13-20.
[9] Zhang L，Li N，Che Y Y，et al. Development of the fi ngerprints of
crude Pu-erh tea and ripened Pu-erh tea by high-performance liquid
chromatography[J]. Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences，
2011，（4）：352-359.
[10] 郝志龙，金心怡，江丽萍，等. 化学指纹图谱在茶叶品质鉴定与
控制上的应用[J]. 亚热带农业研究，2009，5（1）：60-63.
[11] 李 倩，王 玉，丁兆堂，等. 崂山绿茶儿茶素组分含量变化分
析[J]. 西南农业学报，2010，23（3）：670-673.
[12] 夏丽飞，蔡 丽，韩 丽，等. 晒青茶与烘青茶品质比较研究[J].
茶叶科学技术，2010，（3）：17-19.
（责任编辑：成 平）
对策[J]. 中国棉花，2013，（2）：12-15.
[2] 陈荣江，孙长法，包东娥，等. 棉花高产优质育种数量性状选育
模式参数的研究[J]. 西北农业学报，2013，22（9）：74-81.
[3] 眭书祥，李爱国，朱青竹，等. 黄河流域棉花形态育种探讨[J].
河北农业科学，2012，16（7）：75-77.
[4] José Marcelo Soriano Viana，The parametric restrictions of the
Gardner and Eberhart diallel analysis model: heterosis analysis[J].
Genetics and Molecular Biology，2000，23（4）：869-875
[5] 陈世明，胡秉民. 双列杂交分析中亲本特殊配合力方差的计算[J].
生物数学学报，1994，9（2）：69-73
[6] 焦明臻，许 琦. 陆地棉丰产品系与转Bt基因棉双列杂交配合力
研究[J]. 中国棉花，2000，27（3）：10-11.
[7] 纵瑞收. 优良棉花亲本的筛选创新利用[J]. 金陵科技学院学报，
2007，23（3）：61-64.
（责任编辑：成 平）
肯定这些性状全部是由遗传因素决定的。
3 结 论
试验结果表明，棉花的农艺性状、经济性状及产
量等的遗传力均达极显著水平，这说明这些性状在杂交
过程中对后代的影响均较明显；而GCA的方差值要远
远大于SCA的方差值，表明在遗传效应中加性遗传效应
占主导地位。因此，棉花杂种优势利用是切实可行的，
可通过对后代群体主要性状的筛选来有目的性地选育棉
花新品种。
此外，试验过程中发现，有时亲本的性状均较优
良，但正反交之后子代在该性状上的遗传表现差异较
大。这说明在杂交过程中亲本的组配方式对后代的遗传
表现有较大的影响力，值得在杂交育种过程中注意。
参考文献：
[1] 彭海兰，邹 勇，李明昊，等. 长江流域棉花生产现状及其育种
（上接第20页）
生理生化｜遗传育种｜耕作栽培