全 文 ：* 广西科学研究与技术开发计划课题 (桂科攻 00150448)
1药理学教研室
2第一附属医院药剂科
收稿日期: 2003-03-19
复方六月雪对急性化学性肝损伤的保护作用*
苏洁寒　荣延平 1　蒋伟哲 2　焦　杨 1　黄仁彬1
(广西医科大学公共卫生学院流行病学教研室　南宁　 530021)
摘要　目的: 探讨复方六月雪 ( LYXC)对四氯化碳 ( CCl4 )、对乙酰氨基酚 ( AP)、 D-半乳糖胺 ( D-Ga l)所致小鼠急性化学性肝损
伤的保护作用。 方法: 分别以 CCl4、 AP和 D-Ga l等诱导的小鼠急性肝损伤为模型 ,观察 LYXC对血清 ALT 、 AST活性、肝药
酶 (肝脏细胞色素 P450及细胞色素 b5 )及肝组织病理改变等的影响。 结果: LYXC对 CCl4、 AP、 D-Gal所致小鼠急性肝损伤均
有明显的保护作用 ,能明显地降低 AL T、 AST活性 ,提高肝脏细胞色素 P450( Cy t. P450)及细胞色素 b5 ( Cyt. b5 )的含量 ( P
< 0. 05或 P < 0. 01)。并呈一定的量效关系。结论: LYXC对 CCl4、 AP、 D-Gal所致小鼠急性化学性肝损伤均有明显的保护作
用 ,诱导肝药酶可能与其保肝作用有关。
关键词　复方六月雪 ;化学性肝损伤 ;保肝作用 ;肝药酶 ;小鼠
中国图书资料分类法分类号　 R285. 5
PROTECTIVE EFFECT OF LIUYUEXUE COMPOUND (LYXC) AGAINST ACUTE CHE-
MICAL LIVER INJURIES
Su Jiehan, Rong Yanping, Jiang Weizhe, et al. ( Depar tment of Epidemio logy , Guangxi Medical
Univ ersi ty , Nanning , 530021 China )
Abstract　 Objective: To study pro tectiv e effect and po ssible mechanisms o f LYXC against carbon
tet rachlo ride ( CCl4 ) -, Acetaminophen ( AP) -and D-Galactosamine ( D-Gal ) -induced acute liver injuries in
mice. Methods: The models o f CCl4-, AP-, D-Gal-induced acute liv er injuries in mice w ere used in the
study o f the protectiv e ef fect and po ssible mechanisms o f LYXC on liv er injury. Result: LYXC could
signi ficant ly decrease the eleva tions o f serum ALT and AST activi ties in acute liv er injuries induced by
CCl4-, AP- and D-Gal in mice, lessened the patho log yical damage of liv er, and increase the contents of
hepatic microsomal Cy t. P450 ( cytochrome P450) and Cyt. b5 ( cytochrome b5 ) . The results also showed
that there w as a certain do se-effect relationships of LYX C. Conclusion: LYXC has signi ficant protectiv e
ef fects on the acute liv er injuries induced by CCl4 , AP and D-Ga l in mice. Hepa topro tection of
LYXCmaybe result f rom the induction o f hepa tic microsomal drug-metabo lizing enzymes.
Key words　 Liuyuexue Compound; chemical liver injury; liver protection; hepatic micro samal drug-
metabolizing enzyme; mouse
　　复方六月雪 ( LYXC)是本校药理学教研室根据中医理论
和民间治疗肝炎的经验 ,利用中草药配伍组成的复方制剂 ,
由六月雪 ,白花蛇舌草等组成。主要用于治疗乙型、丙型病毒
性肝炎、肝硬化等。 为科学地证实其治疗作用从而为此复方
的临床应用提供理论依据 ,我们对 LYXC进行临床前药效学
研究 ,观察其对四氯化碳 ( CCl4 )、对乙酰氨基酚 ( AP)、 D-半
乳糖胺 ( D-Ga l)所致的小鼠急性化学性肝损伤的保护作用并
探讨其可能的作用机制。
1　材料与方法
1. 1　动物: 雄性昆明种小鼠 ,体重 ( 20± 2) g;由广西医科大
学实验动物中心提供。
1. 2　药品与主要试剂: LYXC口服液 ,经水煮醇沉 ,浓缩至
含生药 3 g /ml。 还原型辅酶Ⅱ ( N ADPH)为上海生物工程公
司进口分装 ,批号: 20011217。 CCl4 ,上海试剂三厂产品 ,分析
纯 ,批号: 991021。 D-Gal,广州医药工业研究所合成一室产
品 ,批号: 20000508。 AP,江苏省常熟华港制药有限公司生
产 ,批号: 9912040717。 联苯双酯 ,北京协和制药厂生产 ,批
号: 20001109。
1. 3　仪器与设备: DU-640紫外 -可见光分光光度计 (美国
Beckman公司 )。 FJ-200高速分散均质机 (上海标本模型厂 )。
TDL-5型台式低速大容量离心机 (上海安亭科学仪器厂 )。
TGL-16GA型高速冷冻离心机 (上海安亭科学仪器厂 )。
·497·广 西 医 科 大 学 学 报JOURN AL OF GU AN GXI M EDICAL UNIVERSI TY　 2003 Aug; 20( 4)DOI : 10. 16190 /j . cnki . 45 -1211 /r . 2003. 04. 011
1. 4　实验方法 [1 ]
将 180只小鼠分为 CCl4、 AP、 D-Gal 3种急性肝损伤实
验组 ,每种实验 60只。 再将每种急性肝损伤实验组中的 60
只小鼠随机分为正常对照组、损伤模型组、联苯双酯组和
LYXC低剂量组 ( LYXCL )、中剂量组 ( LYXCM )、高剂量组
( LYXCH ) ,每组 10只 ,除正常对照组和损伤模型组给予相同
容积的生理盐水灌胃外 ,联苯双酯组按联苯双脂 150 mg /
kg、 LYXC低、中、高剂量组分别按 LYXC 15、 30、 60 g /kg ,每
天灌胃 1次 ,连续 5 d。 给药第 5天 ,除正常对照组皮下注射
花生油 10 ml /kg外 ,其余各组或腹腔注射 ( i. p) 0. 1% CCl4
花生油溶液 10 ml /kg或 i. p AP 300 mg /kg或 i. p D-Gal 800
mg /kg ,禁食 16 h后取血测定血清 ALT和 AST ,按文献 [2,
5 ]方法取肝微粒体 ( M S)混悬液并测定蛋白质和肝药酶 [肝
细胞色素 P450( Cyt. P450)及细胞色素 b5 ( Cy t. P450) ]含量 ,
取少量肝左叶以 10%甲醛溶液固定 ,作病理切片检查。
1. 5　统计学处理: 数据用 SPSS 10. 0统计软件进行方差分
析 ( F检验 )。
2　结　果
2. 1　 LYXC对急性化学性肝损伤 ALT、 AS T和肝药酶的影
响: CCl4、 AP、 D-Ga l均引起小鼠急性化学性肝损伤 ,血清
AL T和 AS T活性增高 ,肝药酶含量降低。 低、中、高 3种剂
量的 LYXC对 CCl4、 AP、 D-Ga l所致小鼠急性肝损伤有明显
的保护作用 ,能明显降低 ALT和 AST活性 ,提高肝药酶含
量 ,结果见表 1、表 2、表 3。
2. 2　 LYXC对急性化学性肝损伤病理组织学的影响: 显微
镜下见 3种损伤模型组均呈严重的急性肝细胞损伤 ,表现为
弥漫性肝细胞变性和重度浊肿变性 ,灶状及带状坏死常见 ,
肝内血管充血肿胀、被膜有急性炎症细胞浸润。而 LYXC中、
高剂量组及联苯双酯组以轻度浊肿变性为主 ,伴少量点状坏
死 ,灶状及带状坏死极少 ,低剂量组肝损伤也较损伤模型组
轻。
表 1　 LYXC对 CCl4急性肝损伤 ALT、 AST和肝药酶的影响 ( x-± s,n = 10)
组别 　　 ALT　　 ( U / L)
　　 AST　　 ( U /L)
　 Cyt. b5
(μmo l /g pr o)
Cy t. P450
(μmol /g pro )
正常组 　 89. 20± 28. 05* * 　 245. 50± 114. 77* * 0. 27± 0. 05* 0. 52± 0. 08* *
CCl4组 1 209. 30± 71. 63 1 097. 81± 212. 60 0. 17± 0. 07 0. 22± 0. 06
联苯双酯组 　 675. 58± 57. 26* * 　 637. 05± 92. 82* * 0. 45± 0. 14* * 0. 89± 0. 13* *
LYXCH组 　 658. 83± 73. 86* * 　 614. 66± 171. 14* * 0. 52± 0. 11* * 0. 86± 0. 15* *
LYXCM组 　 690. 31± 75. 54* * 　 683. 69± 99. 06* * 0. 49± 0. 08* * 0. 81± 0. 08* *
LYXCL组 　 727. 55± 55. 66* 　 715. 05± 73. 49* * 0. 45± 0. 08* * 0. 78± 0. 11* *
　　　　注: 与 CCl4组比较 ,* P < 0. 05;* * P < 0. 01
表 2　 LYXC对 AP急性肝损伤 ALT、 AST和肝药酶的影响 ( x-± s ,n = 10)
组别 　　 ALT　　 ( U / L)
　　 AST　　 ( U /L)
　 Cy t. b5
(μmol /g pro )
Cy t. P450
(μmo l /g pro )
正常组 87. 25± 42. 10* * 260. 46± 144. 46* * 0. 27± 0. 04* * 0. 52± 0. 08* *
AP组 523. 64± 83. 31 901. 62± 200. 55 0. 18± 0. 07 0. 21± 0. 07
联苯双酯组 270. 17± 64. 82* * 588. 22± 90. 06* * 0. 48± 0. 07* * 0. 91± 0. 11* *
LYXCH组 275. 58± 95. 36* * 608. 21± 106. 21* * 0. 48± 0. 06* * 0. 89± 0. 17* *
LYXCM组 321. 05± 83. 56* * 634. 59± 88. 93* * 0. 47± 0. 07* * 0. 87± 0. 15* *
LYXCL组 327. 82± 60. 81* * 669. 33± 83. 02* * 0. 45± 0. 08* * 0. 80± 0. 13* *
　　　　　　注: 与 AP组比较 ;* * P < 0. 01
表 3　 LYXC对 D-Gal急性肝损伤 AL T、 AST和肝药酶的影响 ( x-± s,n = 10)
组别 　　 ALT　　 ( U / L)
　　 AST　　 ( U /L)
　 Cy t. b5
(μmol /g pro )
Cy t. P450
(μmo l /g pro )
正常组 91. 72± 37. 46* * 257. 73± 75. 29* * 0. 41± 0. 08* 0. 50± 0. 05* *
D-Gal组 604. 49± 108. 20 903. 69± 186. 66 0. 25± 0. 09 0. 23± 0. 08
联苯双酯组 298. 59± 56. 74* * 469. 59± 58. 96* * 0. 84± 0. 13* * 0. 91± 0. 12* *
LYXCH组 301. 15± 69. 90* * 526. 23± 124. 39* * 0. 79± 0. 15* * 0. 92± 0. 14* *
LYXCM组 341. 11± 46. 97* * 557. 25± 127. 81* * 0. 77± 0. 24* * 0. 86± 0. 17* *
LYXCL组 347. 29± 47. 98* * 569. 38± 139. 97* 0. 72± 0. 21* * 0. 82± 0. 09* *
　　　　　　注: 与 D-Gal组比较 ,* P < 0. 05;* * P < 0. 01
3　讨　论
LYXC由多种中草药组成 ,其中的六月雪早在《本草拾
遗》中就有记载: 能活血、凉血、疏肝泻湿、消肿止痛。 主要用
于急慢性肝炎 ,黄疸等 [6 ]。 它具有抗病毒及保护肝细胞的作
用 [7] ,民间中常用来治疗肝炎 [8 ]:白花蛇舌草可清热解毒 ,消
瘀消肿 ,兴奋网织内皮细胞系统 ,增强白细胞的吞噬能力 [9 ]。
通过本次动物实验 ,证实 LYXC对 CCl4、 AP、 D-Gal 3种化学
·498· 广西医科大学学报　 2003 Aug; 20( 4)
物质所致的小鼠急性化学性肝损伤有明显的保护作用。
CCl4引起肝损害的机制是 CCl4经 Cy t. P450的激活 ,产
生了自由基 CCl3· 及 Cl· ,这些自由基可与肝细胞内大分
子发生共价结合 ,使肝细胞损伤 。 大剂量 AP进入体内经肝
Cy t. P450代谢后 ,生成毒性中间产物 N-乙酰 -对 -苯醌亚胺
自由基 ( NAPQI) ,使肝内 GSH耗竭 ,另外 ,过多的 N APQI
还可与肝细胞大分子如蛋白质等共价键结合 ,两方面的因素
共同作用 ,引起肝细胞坏死。 D-Gal所致肝损伤模型的肝组
织病理学特征与人类病毒性肝炎极为相似 ,且有极好的重现
性和一定的可逆性。 D-Gal可与二磷酸尿嘧啶核苷 ( UDP)结
合生成 UDP-半乳糖胺 ,阻止 RNA和蛋白质合成 ,妨碍糖和
粘多糖代谢 ,造成细胞膜损伤和 Ca2+ 超载。 3种肝毒剂均可
诱导肝损伤 ,导致肝细胞变性坏死或肝细胞膜通透性增加 ,
故检测血清中的 ALT、 AS T活性可反映肝细胞的损伤程度。
本实验结果表明: LYXC对 3种肝毒剂诱导的急性肝损伤引
起的 ALT、 AST升高均有明显的降低作用并有一定的量效
关系。病理学检查也显示 LYXC能明显减轻肝组织的实质性
损伤。
Cy t. P450、 Cy t. b5等组成的肝药酶能催化大多数内源性
和外源性化合物及药物的氧化还原反应 ,促进药物、毒物等
的代谢。 上述 3种肝毒剂均可致肝微粒体 Cyt. P450和
Cy t. b5含量降低 ,而 LYXC能明显减轻这种降低作用。提示
LYXC能在一定程度上诱导 Cyt. P450和 Cy t. b5的产生或
者可以对抗肝毒剂对 Cyt. P450和 Cy t. b5产生损伤的某些
环节 ,从而提高肝脏的代谢能力 ,促进肝药酶对毒物的清除 ,
起到保护肝脏的作用。 LYXC由多种中草药组成 ,成分比较
复杂 ,在体内的作用机制可能存在诸多靶点 ,其药理效应和
作用机制也应该是多方面的 ,有待进一步研究。
参　考　文　献
1　张均田主编 . 现代药理实验方法 . 北京 :北京医科大学、
协和医科大学联合出版社 , 1998. 1 397-1 400.
2　 Yang CS. The effec t o f temperatur e on monooxygenase
r eac tions in micr osoma l membrane. Biochem Biophys
Acta, 1977, 465: 362-372.
3　 Low ry OH, Rosebrough N J, Fa rr AL , et al. Pro tein men-
surement w ith the folin phenol reagent. J Bio l Ch em,
1951, 193: 265-273.
4　 Omura T , Sa to R. The Ca rbon monox ide binding pigment
of liv er mic rosomes. J Bio ch em, 1964, 239: 2 370-2 385.
5　 Omura T, Takesue S. A new method for simulataneous
purifica tion o f cy to chrome b5 and N ADPH-cy tochrome c
reductase from ra t liv er micro somes. J Biochem, 1970, 67
( 2): 249-257.
6　徐国钧 ,徐珞珊 ,金蓉鸾 ,等 . 中国药材学 . 北京: 中国医
药科技出版社 , 1996. 1 600.
7　王少芬 ,李广义 ,杨国华 ,等 . 六月雪化学成分的研究 .
中国中药杂志 , 1989, 14( 9): 33.
8　王正芊 ,袁　莉 . 民族医对六月雪应用的比较 . 中国民
族医药杂志 , 1996, 2( 4): 32.
9　高玉明 . 生血养荣丸治疗癌症化疗后 WBC减少症 50例
. 陕西中医 , 2000, 21( 11): 484.
广西医科大学学报　 2003 Aug ; 20( 4)
* 本项目受广西青年科学基金资助 ( 9912022)
1广西工学院
收稿日期: 2003-04-03
计算机辅助设计共同性外斜视手术疗效观察*
吴西西　向　宇 1　董塔健 1
(广西柳州市中医院眼科　柳州　 545001)
摘要　目的: 探索一种有助于斜视手术设计的方法。 方法:将影响手术结果的诸因素作为依据和参数 ,通过计算机训练—智能
化的软件 ,用于指导手术设计。 结果:该软件能协助手术医生进行手术设计 ,取得较好疗效。 结论: 可根据手术医生需要 ,设计
相应的软件 ,满足不同类型斜视手术设计 ,积累经验 ,提高手术成功率。
关键词　计算机 ;斜视 ;手术
中国图书资料分类法分类号　 R770. 5
COMPUTER ASSISTANT DESIGN( CAD) IN STRABISMUSOPERATION
Wu Xixi , Xiang Yu, Dong Tajian. ( Liuzhou Hospi tal o f Traditional Chinese M edicine, Liuzhou, 545001
China )
Abstract　 Objective: To explore a method that will be helpful fo r st rabismus opera tion design.Methods:
W e used the facto rs, which w ould inf luence the resul t of the operation, as pa rameters to t rain a intelligent
sof twa re, which w ould help docto rs to design st rabismus operation. Results: The intelligent so f tw are is
v ery helpful fo r the docto rs to design the opera tion and increase the curativ e ef fect. Conclusion: From the
test, the docto r could to design dif ferent sof t w ares to meet his demand, w hich could help his operation
design to sa ti sfy dif ferent kinds opera tion.
Key words　 Computer Assistant Design ( CAD) ;
st rabismus; operation
·499·苏洁寒 ,等 . 复方六月雪对急性化学性肝损伤的保护作用