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HPLC法测定石楠藤中熊果酸、齐墩果酸的含量
吴建伟，张 瑾(江苏无锡药品检验所 无锡 214021)
摘要:目的 建立石楠藤有效成分的含量测定方法，提高江苏省习用中药材石楠藤的质量标准。方法 采用 HPLC法，以甲醇-0. 1mol·L －1乙
酸铵(85∶15)为流动相，在 210nm处检测石楠藤中的熊果酸、齐墩果酸的含量。结果 熊果酸在 0. 0506 ～ 1. 0120mg·mL －1范围内呈良好的线
性关系(r = 0. 9994，n = 5);加样回收率为 98. 05%，ＲSD 为 1. 8%。齐墩果酸在在 0. 0534 ～ 1. 0680mg·mL －1范围内呈良好的线性关系(r =
0. 9994，n = 5);加样回收率为 98. 68%，ＲSD为 1. 0%。结论 本方法操作简单、精密度、重现性较好，可用于控制石楠藤的质量。
关键词:石楠藤;高效液相色谱;熊果酸;齐墩果酸
中图分类号:Ｒ927. 2;Ｒ282. 71 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2013)-09-0071-03
Determination of the contents of ursolic acid and oleanolic acid in Photinia
serrulata by HPLC
WU Jian-wei，ZHANG Jin(Jiangsu Wuxi Drug verification，Wuxi 214021，China)
ABSTＲACT:OBJECTIVE To establish a method to determine effective components in Photinia serrulata，and to
improve its Quality standard. METHODS Using HPLC with the gradient elution of Methyl alcohol-0. 1mol·L －1
ammonium acetate solution(85∶15)detected the content of ursolic acid and oleanolic acid at 210nm. ＲESULTS
Ursolic acid showed a good linear range in 0. 0506 ～ 1. 0120mg·mL －1(r = 0. 9994，n = 5)，recovery was 98. 05%;
ＲSD was 1. 8%;and oleanolic acid showed a good linear range in 0. 0534 ～ 1. 0680mg·mL －1(r = 0. 9994，n = 5)，
recovery was 98. 68%;ＲSD was 1. 0% . CONCLUSION The method is simple，accurate and repeatable for the
quality control for Photinia serrulata.
KEY WOＲDS:Photinia serrulata;HPLC;Ursolic acid;Oleanolic acid
作者简介:吴建伟。学历:大学。职称:副主任中药师。从事中药材及
中成药检验及标准研究。联系电话:0510-66112799
我省习用中药材石楠藤(石南)，来源为蔷薇科植物石楠
Photinia serrulata Lindl干燥带叶的茎枝。具有祛风止痛、壮筋
骨的功效。常用于风痹疼痛，腰膝酸软无力。为《江苏省中
药材标准》1989 年版收载，且收载项目简单，尚不可全面反映
石楠藤的药材质量。据现代药理学研究表明:石楠叶的有效
成分熊果酸和齐墩果酸具有显著的抗炎、抗肿瘤、促进免疫、
保肝、止疼、强心等药理作用。为更好的控制石楠藤的质量，
本文建立了石楠藤有效成分的含量测定方法，并为提高江苏
省习用中药材石楠藤的质量标准提供参考〔1 ～ 5〕。
1 仪器与试药
METTLEＲ AG-285 电子天平，METTLEＲ XP-6 电子天平，
Agilent1200 液相色谱仪系统。
熊果酸对照品(批号 110742-200518)、齐墩果酸对照品
(批号 110709-200505)由中国药品生物制品检定所提供，均为
含量测定用，纯度均为 100%;甲醇为色谱醇，水为纯化水，乙
醇、乙酸铵均为分析纯。收集样品共 13 批，其名称来源(见表
1)。
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 25 No. 9 2013
表 1 样品信息表
编号 所属科属 样品来源 药材或饮片
1 蔷薇科石楠 Photinia serrulata Lindl. 无锡中天天然药物有限公司 药材
2 蔷薇科石楠 Photinia serrulata Lindl. 宜兴饮片厂 药材
3 蔷薇科石楠 Photinia serrulata Lindl. 宜兴饮片厂 药材
4 蔷薇科石楠 Photinia serrulata Lindl. 采自无锡鼋头渚公园 鲜药材，晾干后供试验用
5 蔷薇科石楠 Photinia serrulata Lindl. 采自无锡运河东路 鲜药材，晾干后供试验用
6 蔷薇科石楠 Photinia serrulata Lindl. 采自宜兴苗圃 鲜药材，晾干后供试验用
7 蔷薇科石楠 Photinia serrulata Lindl. 采自宜兴苗圃 鲜药材，晾干后供试验用
8 蔷薇科石楠 Photinia serrulata Lindl. 采自无锡市长广溪湿地公园 鲜药材，晾干后供试验用
9 蔷薇科石楠 Photinia serrulata Lindl. 采自无锡阳光城市花园 鲜药材，晾干后供试验用
2 实验方法与结果
2. 1 色谱条件 以 XBridge C18(5μm，4. 6 × 250mm)为填充
剂;流动相:甲醇-0. 1mol·L －1乙酸铵(85∶15)，流速:1. 0mL·
min －1，柱温:35℃，检测波长 210nm，进样量为 10μL。
2. 2 溶液的制备 对照品溶液的制备:精密称取齐墩果酸和
熊果酸对照品 5mg，置 5mL 量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻
度，作为对照品储备液。供试品溶液的制备:取石楠藤细粉
(过四号筛)1g，精密称定，至回流瓶中，精密加入 95%乙醇溶
液 50mL，回流 2h，过滤，取滤液蒸干，用甲醇溶解并定容至
5mL，过滤，取续滤液，即得。
2. 3 专属性试验 在 2. 1 色谱条件下，熊果酸和齐墩果酸均
峰形良好，保留时间齐墩果酸为 14. 875min，熊果酸为
15. 821min(见图 1、2)。
图 1 熊果酸、齐墩果酸对照品溶液色谱图
图 2 石楠藤样品溶液色谱图
2. 4 标准曲线及线性范围 分别精密吸取对照品储备液适
量，用甲醇稀释成熊果酸浓度分别为 0. 0506、0. 1012、0. 2530、
0. 5060、1. 0120mg· mL －1，齐墩果酸浓度分别为 0. 0534、
0. 1068、0. 2670、0. 5340、1. 0680mg·mL －1的对照品溶液，分别
进样 10μL，记录峰面积，以浓度为横坐标，以峰面积 A为纵坐
标，绘制标准曲线，熊果酸回归方程为 y = 2579. 6x + 27. 272，r
= 0. 9994，齐墩果酸回归方程为 y = 2434. 2x + 36. 228，r =
0. 9994，结果表明熊果酸对照品浓度在 0. 0506 ～ 1. 0120mg·
mL －1范围内呈现良好的线性关系、齐墩果酸对照品浓度在
0. 0534 ～ 1. 0680g·mL －1范围内呈现良好的线性关系(见表
2、3)。
表 2 熊果酸标准曲线
对照品浓度
(g·mL －1) 峰面积 回归方程 相关系数
0. 0506 124. 17
0. 1012 272. 41
0. 2530 732. 36 y = 2579. 6x + 27. 272 r = 0. 9994
0. 5060 1346. 39
1. 0120 2621. 03
表 3 齐墩果酸标准曲线
对照品浓度
(g·mL －1) 峰面积 回归方程 相关系数
0. 0534 117. 62
0. 1068 303. 30
0. 2670 732. 36 y = 2434. 2x + 36. 228 r = 0. 9994
0. 5340 1346. 39
1. 0680 2621. 03
2. 5 精密度试验 精密吸取浓度为熊果酸浓度为 0. 2530mg
·mL －1、齐墩果酸浓为 0. 2670mg· mL －1 的对照品溶液
10μL，按照“2. 1”项下色谱条件连续进样 6 次，记录熊果酸、
齐墩果酸峰面积。结果熊果酸峰面积 ＲSD 为 1. 4%，齐墩果
酸分面积 ＲSD为 1. 0%。表明仪器的精密性较好。
2. 6 重复性试验 取同一份石楠藤样品 6 份，每份 1g，分别
精密称定，按照“2. 2”项下方法制备供试品溶液，按上述高效
液相色谱条件测定。结果熊果酸含量的 ＲSD 为 1. 1%，齐墩
果酸含量的 ＲSD为 1. 4%，表明方法的重复性较好。
2. 7 最低检测限和定量限 将对照品储备液用甲醇进行多
次等倍稀释，信噪比 S /N 为 10 时，熊果酸最低定量限为
0. 0506mg·mL －1，齐墩果酸最低定量限为 0. 0534mg·mL －1。
信噪比 S /N为 3 时，熊果酸最低检测限为 0. 0101mg·mL －1，
齐墩果酸最低检测限为 0. 0107mg·mL －1。
2. 8 稳定性试验 取混合对照品溶液(熊果酸浓度为
0. 2530mg·mL －1、齐墩果酸浓为 0. 2670mg·mL －1)分别在
0、2、4、6、8h进样 10μL。结果熊果酸、齐墩果酸峰面积的 ＲSD
为 0. 9%和 0. 7%，表明混合对照品溶液在 8h内稳定。
2. 9 加样回收率试验 取“1 号样品”6 份，每份 0. 5g，精密
称定，分别精密加入浓度为 2. 0350mg·mL －1熊果酸对照品溶
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海峡药学 2013 年 第 25 卷 第 9 期
液 1mL，0. 6012mg·mL －1 齐墩果酸对照品溶液 1mL。照
“2. 2”项下方法制备供试溶液，按上述高效液相色谱条件测
定，计算回收率(见表 4、5)。
表 4 熊果酸加样回收率
取样量
(mg)
样品中所
含熊果酸
的量(mg)
加入的熊
果酸的量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均
回收率
(%)
ＲSD
(%)
0. 5048 1. 7516 2. 0350 3. 7855 99. 93
0. 5005 1. 7367 2. 0350 3. 7745 100. 16
0. 5095 1. 7680 2. 0350 3. 7713 98. 21 98. 05 1. 8
0. 5190 1. 6968 2. 0350 3. 6853 97. 26
0. 5225 1. 7437 2. 0350 3. 7060 95. 83
0. 5228 1. 7447 2. 0350 3. 7255 96. 89
表 5 齐墩果酸加样回收率
取样量
(mg)
样品中所
含齐墩果
酸的量
(mg)
加入的齐
墩果酸的
量(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均
回收率
(%)
ＲSD
(%)
0. 5048 0. 5225 0. 6012 1. 1102 97. 43
0. 5005 0. 5180 0. 6012 1. 1086 97. 94
0. 5095 0. 5273 0. 6012 1. 1183 95. 34 98. 68 1. 0
0. 5190 0. 5372 0. 6012 1. 1364 99. 63
0. 5225 0. 5408 0. 6012 1. 1391 99. 47
0. 5228 0. 5411 0. 6012 1. 1399 99. 56
2. 10 样品测定 分取上述 9 批药材，按照“2. 2”项下方法操
作，提取供试品溶液，注入高效液相色谱仪，进行测定(见表
6)。
3 讨论
3. 1 实验初期曾选择甲醇-水，乙腈-水，甲醇-0. 1mol·L －1乙
酸铵等系统为流动相，结果表明当使用甲醇-0. 1mol·L －1乙
酸铵系统时，齐墩果酸、熊果酸峰型良好，供试品中主峰能与
杂质峰得到基线分离，故选用甲醇-0. 1mol·L －1乙酸铵系统
为流动相。
3. 2 对同一批样品分别使用甲醇、乙醇、乙酸乙酯、80%乙醇
进行提取，试验结果表明，使用乙醇作为提取溶剂时，齐墩果
酸和熊果酸提取回收率较好，且杂质干扰较少，故选用乙醇作
为提取溶剂。提取时间方面，考察了加热回流 0. 5h，1h，2h，
3h结果表明加热回流 2h可将齐墩果酸和熊果酸提取完全。
表 6 熊果酸含量测定
编号 熊果酸峰面积
熊果酸含量
(mg·g － 1)
齐墩果酸
峰面积
齐墩果酸含量
(mg·g － 1)
1 1817. 03 3. 47 541. 12 1. 04
2 1865. 79 3. 56 611. 3 1. 18
3 1815. 92 3. 47 509. 53 0. 97
4 480. 07 0. 88 128. 17 0. 19
5 532. 07 0. 98 128. 93 0. 19
6 851. 12 1. 60 205. 52 0. 35
7 1124. 21 2. 13 282. 14 0. 50
8 805. 31 1. 51 297. 92 0. 54
9 1028. 06 1. 94 334. 97 0. 61
3. 3 石楠叶挥发油中尚含有大量萜类化合物，如 β-月桂烯、
柠檬烯等，可能是其具有抗菌、抗病毒等作用的原因;石楠叶
挥发油的主要成分之一为冰片，能改善血脑屏障(BBB)通透
性，具促进其他物质透过血脑屏障进入脑组织的作用〔6〕，原
先曾考虑对其进行研究，但使用挥发油提取法提取的挥发油
量太少，所以这一方面有待进一步研究。
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作者简介:张 强，男(1978． 12 －)。毕业于安徽中医学院药学系。职称:主管药师。从事临床药学与药品检验工作。联系电话:18955635807，
E-mail:508625@ qq. com
HPLC法测定注射用头孢米诺钠的有关物质及含量
张 强(安徽省安庆市石化医院 安庆 246001)
摘要:目的 建立注射用头孢米诺钠的有关物质及含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法，色谱柱为 Shimpack VP-ODS(4. 6mm ×
250mm，5μm);流动相为醋酸溶液(取10mL冰醋酸，加水980mL)-甲醇-四氢呋喃(990∶5∶5)。检测波长为254nm;柱温25℃，进样量为20μL。结
果 含量平均回收率为 99. 8%，有关物质 3 批样品与市售品均符合规定。结论 本文建立的方法，简便，重现性好，可用于注射用头孢米诺钠
的有关物质及含量测定。
关键词:高效液相色谱;头孢米诺钠;注射液
中图分类号:Ｒ969. 4 文献标识码:B 文章编号:1006-3765(2013)-09-0073-03
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 25 No. 9 2013