全 文 :2009年 2月 第 11卷 第 2期 中国现代中药 ModernChineseMedicine Feb.2009 Vol.11 No.2
■ [基金项目 ] 山东省 2007年科学技术发展计划—白花丹参饮片加工工艺研究与开发(2007GG2NS02069)
[通讯作者 ] *孟国良 , E-mail:mglabc@sina.com
白花丹参多糖的微波提取工艺研究■
孟国良*
(莱芜职业技术学院 ,山东 莱芜 271100)
[摘要 ] 目的:研究白花丹参多糖的提取工艺。方法:采用正交试验法研究了微波萃取白花丹参多糖萃取条件。
结果:萃取时间是影响白花丹参多糖的主要因素 , 其次是粉碎度及液料质量比。结论:微波萃取白花丹参多糖的最
佳工艺条件为:m(水)/m(白花丹参粉)=10, 50目粉碎 , 萃取 3次 , 每次高火萃取 5min。
[关键词 ] 白花丹参多糖;微波萃取;提取工艺
白花丹参 SalviamiltiorhizaBge.f.alba为唇形科
植物丹参 Salviamiltiorhizabge.的白花变型 , 主要
分布于山东境内 , 以莱芜产量最大 , 属珍稀濒危药
用植物 , 具有祛瘀止痛 、 活血通经 、 凉血消肿 、 清
心除烦的功能 , 是中医传统使用的活血化瘀药。丹
参根中提取到的精制多糖用于氨基核苷诱导的实验
性肾病模型和四氯化碳引发的肝损伤模型 , 能减少
尿蛋白的排泄 , 抑制血清胆固醇和脂质过氧化物浓
度的提高 , 改善血清白蛋白与球蛋白的比值 (A/
G), 并能降低肝损伤引起的 ALT升高 [ 1] 。紫花丹参
多糖的提取及含量测定已有研究 [ 2] , 但对于白花丹
参多糖尚未见报道 , 因此本文采用正交试验法研究
白花丹参多糖的提取工艺 。
1 仪器与试药
1.1仪器
WP750型微波炉 (格兰仕微波炉电器有限公
司), 紫外分光光度计 (UV-2102PC), 电子分析天
平(BS110S);旋转蒸发仪 (RE-52A), TDL-5离心
机(上海安亭科学仪器厂), 数显恒温水浴锅 , 真空
泵 , 真空干燥箱(DZF250上海一恒科技科技有限公
司), 容量瓶及其他玻璃仪器。
1.2试药
白花丹参(莱芜苗山白花丹参基地提供), 经莱芜
职业技术学院药用植物学副教授王峰祥鉴定为白花丹
参 , 葡萄糖 、浓硫酸 、苯酚 、无水乙醇等均为分析纯。
2 方法与结果
2.1药材的处理
将白花丹参洗净晾干 , 粉碎 , 分别过 10, 20,
50目筛 。取一定量不同粉碎度的白花丹参粉 , 加
95%的乙醇多次提取直至提取液基本无色为止 , 挥
发去溶剂后收集备用 。
2.2多糖的提取
称取 10g白花丹参粉 , 加入蒸馏水 , 静置 1h以
润湿物料 , 微波高火辐射一定时间 , 过滤。按同样
条件重复萃取 2次。合并萃取液 , 浓缩到原体积的
1 /5, 醇沉后干燥得白花丹参多糖。
2.3多糖的含量测定 [ 3]
2.3.1标准曲线的绘制 精密称取葡萄糖 2mg定容至
50mL容量瓶中 , 即成葡萄糖对照品溶液。精密量取
上述溶液 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6mL分别置于试管中并
加入 4%苯酚溶液 1mL, 摇匀 , 然后加浓硫酸 6mL,
充分摇匀 , 放置 40℃水浴中 30min, 在 490nm测吸光
度 , 记录吸光度 。以对照品浓度(mg·mL-1)为横坐
标 , 吸光度为纵坐标 , 绘制吸光度—浓度标准曲线 ,
得回归方程 Y=0.053 6X-0.004 3, r=0.999 5。表明
多糖在 0.04 ~ 0.012mg·mL-1有较好的线性关系 。
2.3.2多糖的测定 将制得的干燥多糖精密称定后定
容于 250mL容量瓶中 , 再精密吸取 0.5mL定容于
100mL容量瓶中 , 即得样品液。精密吸取 2mL样品
液于试管中并加入 4%苯酚溶液 1mL, 摇匀 , 然后
加浓硫酸 6mL, 充分摇匀 , 放置 40℃水浴中 30min,
在 490nm测吸光度 , 记录吸光度。
2.4精密度试验
取同一浓度的葡萄糖对照品溶液 , 重复试验 5
次 , 测得葡萄糖吸光度 , 结果 RSD=1.26%, 表明
仪器精密度良好 。
2.5稳定性试验
取样品液 , 分别于 1, 2, 3, 4, 5, 6h在
490nm测定吸收度 , 结果 RSD=1.19%, 表明白花
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DOI :10.13313/j.issn.1673-4890.2009.02.013
2009年 2月 第 11卷 第 2期 中国现代中药 ModernChineseMedicine Feb.2009 Vol.11 No.2
丹参多糖溶液在 6h内稳定 。
2.6回收率测定
精密称取自制白花丹参多糖适量 , 加入精制白花
丹参多糖适量 , 按样品液制备和多糖含量测定方法操
作 , 测得多糖平均回收率为 98.6%, RSD=2.36%。
2.7正交试验[ 4]
2.7.1因素水平设计 选取影响多糖提取的 3个主
要因素:微波萃取时间 (A)、 粉碎度 (B)、 液料质
量比(C), 采用 L9(34)进行了正交试验 , 试验因素
水平表见表 1。
表 1 试验因素水平表
水平 萃取时间(A)/min 粉碎度(B)/目 液料质量比(C)
1 3 10 5∶1
2 5 20 10∶1
3 8 50 15∶1
2.7.2试验结果 结果见表 2。
表 2 正交试验设计及结果
因素 A B C 多糖含量 /g
1 1 1 1 0.374
2 1 2 2 0.412
3 1 3 3 0.705
4 2 1 2 0.985
5 2 2 3 0.762
6 2 3 1 0.890
7 3 1 3 0.683
8 3 2 1 0.475
9 3 3 2 0.902
K1 1.491 2.042 1.739
K2 2.637 1.649 2.299
K3 2.060 2.497 2.150
R 0.382 0.282 0.186
由表 2直观分析可知 , 在所选取的条件中 , 丹
参多糖萃取的影响因素的主次分别为 A>B>C, 萃
取时间对多糖产率影响最为明显 , 其次为粉碎度和
液料质量比 。
表 3 方差分析表
因素 偏差平方和 均方差 F值 P
萃取时间 0.219 0.109 38.373 0.025
粉碎度 0.120 0.06 21.048 0.045
液料质量比 0.056 0.028 9.831 0.092
误差 0.005 7
注:n=2
进一步通过表 3的方差分析可知 , 萃取时间 、粉碎
度对多糖的提取有显著性影响(P<0.05), 液料质量比对
此无显著影响 , 结合实际 , 最佳工艺条件为 A2B3C2 , 即
液料质量比为 10, 粉碎度 50目 , 每次萃取 5min。
3 结果与讨论
由于微波萃取时间比较短 , 因而对多糖的破坏
小 , 再加上微波独特的萃取方式 , 具有省时 、 高效 、
节能等优点 , 从而能降低萃取成本 , 多方面优于传
统的煎煮法 。
虽然粉碎度是影响提取效果的一个非常重要的因
素 , 但在预试验中 , 细粉的提取结果不理想 , 对多糖
的提取效率的影响并不显著 , 而且还增加了粉碎的难
度 , 所以本试验选取不同规格的粗粉作为考察对象。
当液料质量比 10, 粉碎 50目 , 微波高火萃取 3
次 , 每次萃取 5min, 为微波提取白花丹参多糖的最
佳工艺条件 。
参考文献
[ 1] 汪红 , 王强 ,王顺春 , 等 .丹参多糖的提取分离及结构鉴
定 [ J] .中国中药杂志 , 2006, 31(13):1075-1077.
[ 2] 吴从平 , 梁红昌 ,王身相.紫花丹参多糖的提取工艺研究
[ J] .泰山医学院学报 , 2007, 28(4):251-252.
[ 3] 汪红 , 王强 ,罗辉明 , 等 .丹参多糖的含量测定及高效毛
细管电泳法测定其单糖组分 [ J] .中华中医药学刊 ,
2007, 25(4):827-829.
[ 4] 徐天生 , 梁燕 ,江莉华 , 等 .用正交试验法研究超声提取
丹参多糖的最佳工艺 [ J].中成药 , 2008, 30(2):270-271.
(收稿日期 2008-07-14)
StudiesonMicrowave-assistedExtractionTechnologyofSoluble
PolysaccharidesfromSalviamiltiorrhizaBge.f.alba
MengGuoliang
(LaiwuVocationalandTechnicalColege, LaiwuShandong271100, China)
[ Abstract] Objective:ToinvestigatetheextractiontechnologyofsolublepolysaccharidesfromSalviamiltiorhi-
zaBge.f.alba.Methods:Orthogonalexperimentswereadoptedtoanalyzethemicrowave-assistedextraction(MAE)
technologyofpolysaccharidesfromSalviamiltiorhizaBge.f.alba.Results:extractiontimesignificantlyafectedthe
extractionpercentofthesolublepolysaccharides.Conclusion:Theoptimaltechnologywerethattheratioofsolidto
liquidwas1to10 , theherbwascrushedinto50 mesh, thetimesofMAEwasthreetimesandextractiontimewas5
minutes.
[ Keywords] SalviamiltiorhizaBge.f.alba;Polysaccharides;Microwave-assistedextraction;Extractiontechnology
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