全 文 :TROPICAL FORESTRY VOL.41NO.3 Sep.2013
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基金/项目:林业公益性行业专项“华南立体林业经营模式研究与示范”(201004047)
第一作者简介:张弘(1984.4- ),助理工程师
通讯作者:王洪峰(1969-),教授级高级工程师,主要从事珍贵药食植物定向培育研究,E-mail:wanghf@sinogaf.cn
Abstract:Usetiledandverticalinsertedinoculatedmethod,westudiedtheclusterbuddifferentiationedindif-
ferent hormonecombination mediumofKnoxia valerianoides Thorel et Pitard, and studied at theeffect of root
inductionindifferentconcentrationofNAAandABT.Theresultsshowedthatusethetiledinoculatedmethod,
thebestbuddifferentiationmediumisMS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA,andthenumberofclusterbudsis
6.98.Thebestrootinductedmediumis1/2MS+1.0mg/LNAAor1/2MS+0.1mg/LABT,andtherootinduction
ratecanbegetto100%.
Keywords:Knoxia valerianoides Thorel et Pitard,Tissureculture,Rapidpropagation,Rootinduction
林业研究
红芽大戟(Knoxia valerianoides Thorel et Pitard)
为茜草科多年生草本植物,又名红大戟、红芽戟[1~2]。
以块根入药,性味苦寒,归肺脾肾经,有小毒。泻水
逐饮,攻毒消肿散结。用于胸腹积水,二便不利,痈
肿疮毒,瘰疬痰核[3]。主要含蒽醌类化合物。近年来,
中医应用临床发现,其对癌肿、痈肿、泻水、腹水、排
毒散结等症均具有一定的疗效,现被广泛应用。我
国年需求达几十万公斤,但其年产量不足2万kg,
而且原产地云南、广西、广东等省野生资源历经几十
载大肆采挖,濒临枯竭。据业内人士分析,红大戟
10a内难于满足市场需求,成为持续紧俏的中药材
品种。价格也由最初的 5 元 /kg 上涨达目前的
130~135元/kg,且仍有上升的趋势[4]。为了保护我
国这味珍稀天然野生药材,不遭受人类采挖灭绝之
灾,现被国家医药管理局列为一级保护野生中药材,
并且对产区封禁[5]。因此,利用生物技术对红芽大戟
进行组织培养具有重要意义,该文主要研究了红芽
大戟的组培快繁技术 ,以期缓解药源紧张的问题。
1 材料与方法
1.1试验材料
红芽大戟无菌苗,保存于广东省林业科学研究
院生物技术研究所
1.2试验方法
1.2.1丛生芽继代增殖
切取红芽大戟带节茎段分别以竖插和平铺两种
方式分别接种于 MS;MS+0.5mg/LNAA;MS+1.0mg/L
6-BA+0.5mg/LNAA;MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA;
MS+3.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA;MS+4.0mg/L 6-BA+
0.5mg/LNAA;MS+6.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA;MS+8.
0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA8种增殖培养基中,每组
20个重复,于25℃,12h/d散射光下进行继代增殖。
20d后统计芽增殖数及分析芽的长势。
1.2.2诱导生根
切取红芽大戟顶芽(2~3节)分别接种于添加
NAA (0.1 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L) 或 ABT(0.1
mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L)的1/2MS培养基中,进行
红芽大戟的组培快繁技术研究
张弘,侯丽丽,高帅,王洪峰
(广东省林业科学研究院,广东广州 510520)
摘要:采用平铺与竖插的方式,研究红芽大戟在不同激素组合中的芽分化情况,并研究在不同浓度的 NAA 及
ABT对组培苗生根诱导的影响。结果表明:采用平铺的方式,接种于MS+1.0 mg/L 6-BA +0.5 mg/L NAA 中芽增殖数
最高,为 6.98;红芽大戟最佳诱导生根培养基为 1/2MS+1.0 mg/L NAA 或是 1/2MS+0.1 mg/L ABT,生根率均可达到
100%。
关键词:红芽大戟;组织培养;快速繁殖;生根诱导
中图分类号:S625.5+6 文献标识码:B doi:10.3969/j.issn.1673-0938.2013.03.013
TissueCultureandRapidPropagationofKnoxiavalerianoides
Zhang Hong,HouLili,GaoShuai,WangHongfeng
(GuangdongAcademyofForestry,Guangzhou510520,China)
39
2013 年 9 月 第 41 卷 第 3 期
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 林业研究
生根诱导。每种培养基接种苗数30棵,25d后统计
分析生根率及根的生长情况。
2 结果与分析
2.1丛生芽继代增殖,平铺比竖插接种方式增殖出
的芽数多
将红芽大戟带节茎段接种于前面所述的8种增
殖培养基中均能诱导出芽,而增殖出的芽的数量及
芽的长势在不同的诱导培养基中则表现出不同的形
态。结果如表1及图1。
表1 红芽大戟在不同的增殖培养基中的芽增殖数及芽长势
由表1可看出,不论是在何种诱导增殖培养基
中均能诱导出芽,而平铺的接种方式都要比竖插方
式增殖出的芽数多,故红芽大戟带节茎段应以平铺
方式接入增殖培养基。
红芽大戟带节茎段接种于 MS 及 MS+0.5 mg/L
NAA中,萌发出的腋芽纤细且高,但只是从两边腋芽
处萌发,增殖芽数较少,为2~4个。在加有不同浓度
的6-BA的增殖培养基中,分化的芽数较多,但随着
6-BA浓度的增大,带节茎段逐渐形成浅黄色的愈伤
组织,分化出的芽数也渐少,并且在6-BA浓度高于
4.0mg/L时,形成的芽均很细弱,并伴有玻璃化。而
较低浓度6-BA的增殖培养基,红芽大戟带节茎段分
化出的芽数较多,长势也较粗、较高,而在 MS+1.0
mg/L 6-BA +0.5 mg/L NAA这种增殖培养基中红芽
大戟分化出的芽较多,长势也较好,最高芽增殖数可
达6.98,如图1。故选择MS+1.0 mg/L 6-BA +0.5
mg/L NAA作为红芽大戟最佳增殖培养基。
图1 红芽大戟带节茎段在不同增殖培养基中的生长形态
2.2 诱导生根最佳生根培养基及浓度分析
红芽大戟顶芽(2~3节)接种于含不同浓度NAA
的生根培养基中,10d后,均能从茎段底部长出2~3
条乳白色的根,25d后根增多,约6~7条,根变成浅
黄色,长3~5cm。随NAA浓度的增高,根变得粗壮,
颜色加深。1/2MS+1.0 mg/L NAA培养基中根生长良
好,苗的长势也较好,25d后苗高约7~8cm。
红芽大戟顶芽(2~3节)接种于含不同浓度ABT
的生根培养基中,10d后,插入培养基底端的茎段膨
松,形成浅黄色的愈伤组织,15d后,从浅黄色膨松
愈伤组织处产生出大量浅黄色须根,随ABT浓度的
升高,膨松处也越大,产生的须根也较多,而苗也越
来越矮,仅3~5cm。而1/2MS+0.1 mg/L ABT中苗长
势较好,约4~6cm。如图2所示。
图2 红芽大戟诱导生根
3 小结
红芽大戟组培苗最佳继代增殖培养方式为平
铺,最佳继代增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA +
0.5 mg/L NAA,芽增殖数最高可达 6.98,达到了快
速繁殖的目的。
红芽大戟最佳诱导生根培养基为 1/2MS+1.0
mg/L NAA或是1/2MS+0.1 mg/L ABT,生根率均可达
到100%。
参考文献
[1]全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编(上册) [M].北
京:人民卫生出版社,1975:382~383
[2] 中国医学科学院药物研究所.中药志(第二册)[M].人民
卫生出版社出版,1982:5~6
[3]郭晓庄.有毒中草药大辞典[M].天津科技翻译出版公司
出版,l992:243~425
[4]唐云永.发展红大戟大有前途[J].市场营销,2004(12):60
[5]梁忠纪.红芽大戟前景广阔[J].农村新技术,2002 (8):55
编号
1
2
3
4
5
6
7
8
NAA
0
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
平铺芽增殖数
2.75±0.20
3.27±0.18
6.98±0.08
4.63±0.08
4.62±0.13
4.17±0.13
3.68±0.08
3.08±0.15
6-BA
0
0
1.0
2.0
3.0
4.0
6.0
8.0
竖插芽增殖数
2.47±0.13
3.00± .13
6.32±0.19
4.27±0.10
4.30± .13
3.93±0.03
3.33±0.16
2.67±0.08
芽长势
纤细、高
较细、高
较粗、较高
较粗、稍高
较粗、较低
细弱、玻璃化
细弱、玻璃化
细弱、玻璃化
40