全 文 ：·药物研究·
红大戟提取物对结核杆菌的抑制
作用观察
秦海宏1，贾琳钰2，高 阳3
( 1 大连大学护理学院，辽宁大连 116622; 2 大连大学医学部; 3 大连市结核病院)
摘要:目的 探讨红大戟提取物对结核杆菌活性的抑制作用。方法 根据红大戟化合物的极性，采用系统分
离法分别提取其在水、甲醇、醋酸乙酯、氯仿、石油醚 5 种溶剂中的成分并制成提取液。采用体外抑菌实验筛选红
大戟抗结核活性部位，抑菌实验连续观察 4 周，动态观察各提取液对结核杆菌的抑制作用。结果 5 种提取物对结
核杆菌均有不同程度的抑制作用，石油醚、氯仿提取物中的成分抑菌作用较强。结论 红大戟石油醚提取物及氯
仿提取物的抗结核杆菌作用最强。
关键词:红大戟;结核杆菌;石油醚;氯仿
doi:10． 3969 / j． issn． 1002-266X． 2013． 10． 032
中图分类号:R931． 7 文献标志码:B 文章编号:1002-266X(2013)10-0077-02
我国肺结核的发病率居世界第二位。由于抗结
核化学合成药物开发周期长、难度大、易产生耐药
性，且目前临床常用的抗结核药物大多对肝脏、肾脏
有较大的毒性，因此从中药资源中寻找安全有效的
抗结核药物已受到重视。红大戟又名红芽大戟、广
大戟、南大戟，为茜草科植物红大戟的干燥根，具有
泻水逐饮、消肿散结的功效，临床上用于治疗胸腹积
水、二便不利、痈肿疮毒、瘰疬痰核等症［1］，对金黄
色葡萄球菌及绿脓杆菌亦有抑制作用。2008 年 9
月 ～ 2009 年 4 月，我们对红大戟的水、甲醇、醋酸乙
酯、氯仿、石油醚 5 种提取物进行了结核杆菌的体外
抑菌试验，旨在为红大戟的临床应用提供依据。
1 材料与方法
1． 1 材料 标准菌株为强毒人型结核杆菌 H37RV
菌株，由大连市结核病院提供。红大戟购自石家庄
乐仁堂饮片厂。
1． 2 方法
1． 2． 1 红大戟提取物制备 红大戟根晒干后制成
粗粉，取 100 g分别采用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、甲
醇、水提取，将五种提取物回收溶剂后置 4 ℃冰箱中
备用。
1． 2． 2 含药培养基制备 参照文献［2］配制改良罗
氏培养基。阴性培养基采用无药物的罗氏培养基。
阳性培养基采用含 5 mg /mL 利福平的改良罗氏培
基金项目:辽宁省教育厅科研项目(2008044) ;大连市科技计划项目
(2009E14SF002，2009E11SF131)。
养基。取 2． 1 制备的红大戟各组分提取物，分别加
入含 1． 5% Tween-80 的培养基，配置成相当于含生
药 100 mg /mL浓度的培养基;再取 100 mg /mL稀释
的含药培养基 4 mL，加入培养基(不含 Tween-80)4
mL，混匀即成 50 mg /mL 稀释度;同法稀释，分别制
成 25、12． 5、6． 25、3． 125、1． 56、0． 78 mg /mL共 8 个
浓度，每个浓度装 3 个试管，各组培养基高压蒸汽灭
菌后，制成斜面培养基备用。
1． 2． 3 红大戟提取物对 H37RV 的抑制作用观
察［3］ 取在培养基上生长良好的强毒人型结核杆
菌 H37RV，置于盛 Tween-80 生理盐水的试管中，研
磨成混悬液，浓度调整至 106 个 /mL，供接种用。取
该菌液 0． 1 mL，无菌条件下分别接种于阴性培养
基、阳性培养基及不同浓度红大戟提取物的含药培
养基中，放入 37 ℃恒温箱中培养，连续观察 4 周，计
录培养基表面 H37RV生长情况。判断标准:以 3 个
平行样品综合结果为准，结果不一致者为 +，未见菌
落增长为 －，菌落数 1 ～ 2 个为 +、2 ～ 6 个为 + +、7
～ 10 个为 + + +，10 个以上(或液面有菌膜生长)
为 + + + +。
2 结果
培养第 2、3、4 周，当红大戟浓度高于 12． 5 mg /
mL时，5 种提取物对结核杆菌标准菌株 H37RV 生
长均有明显的抑制作用。相同药物浓度下水提取物
的抑菌能力最弱，在 6． 25 mg /mL 浓度下，第 2 周即
出现了由“－”转“+”的现象;其次为甲醇提取物，
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在 3． 125 mg /mL 浓度下第 2 周出现了由“－”转
“+”的现象。石油醚提取物和氯仿提取物作用最
强，且效果相当;高于 1． 56 mg /mL浓度下，第 2 ～ 4
周均未见 H37RV生长，抑菌作用较为稳定。培养第
4 周时，阴性培养基菌落数为 －，阳性培养基为 + +
+ +。见表 1。
表 1 实验第 2 周各提取物对 H37RV生长的抑制作用
培养基
红大戟浓度(mg /mL)
100 50 25 12． 5 6． 25 3． 125 1． 56 0． 78
石油醚提取物 － － － － － － － －
氯仿提取物 － － － － － － － －
醋酸乙酯提取物 － － － － － － － +
甲醇提取物 － － － － － + + +
水提取物 － － － － + + + + + + + +
表 2 实验第 3 周各提取物对 H37RV生长的抑制作用
培养基
红大戟浓度(mg /mL)
100 50 25 12． 5 6． 25 3． 125 1． 56 0． 78
石油醚提取物 － － － － － － － +
氯仿提取物 － － － － － － － +
醋酸乙酯提取物 － － － － － － － +
甲醇提取物 － － － － － + + + + + + + +
水提取物 － － － － + + + + + + + + + + +
表 3 实验第 4 周各提取物对 H37RV生长的抑制作用
培养基
红大戟浓度(mg /mL)
100 50 25 12． 5 6． 25 3． 125 1． 56 0． 78
石油醚提取物 － － － － － － － +
氯仿提取物 － － － － － － － +
醋酸乙酯提取物 － － － － － － + + + + +
甲醇提取物 － － － － + + + + + + + +
水提取物 － － － － + + + + + + + + + +
3 讨论
目前结核病发病率在全球呈上升趋势［4］，我国
结核病患者人数居世界第二位［5］。造成这种状况
的原因有多方面，但主要是结核杆菌对常用抗结核
药形成了耐药性［6，7］。近年来，应用传统中药治疗
结核病和体外抑制结核杆菌的研究取得了较大的进
展，从传统中药中寻求新的抗结核成分和化合物已
经成为抗结核药物研发的方向之一［8，9］。红大戟是
我国珍稀中药材，以根入药，性味苦寒，归肺脾肾经，
有小毒。《本草纲目》记载，红大戟具有补肝益肾、
滋阴壮阳、利尿消肿、排毒养颜等功效。近年中医临
床研究发现，红大戟治疗癌肿、痈肿、泻水、腹水等症
具有一定的疗效，但目前尚未见到红大戟抗结核活
性的报道。本研究采用系统分离法获得红大戟的
水、甲醇、醋酸乙酯、氯仿、石油醚 5 个极性组分，发
现当红大戟浓度高于 12． 5 mg /mL时，5 种提取物对
结核杆菌标准菌株 H37RV 的生长均有明显抑制作
用，相同药物浓度下水提取物的抑制菌作用最弱，其
次为甲醇提取物，以石油醚提取物和氯仿提取物作
用最强，尤其是当浓度高于 1． 56 mg /mL时，抑菌作
用较为稳定。
现代药物化学研究发现，红大戟具有多种独特
的化学成分［10］。袁珊琴等［11］从红芽大戟中分离得
到 2 个蒽醌类化合物:1，3，5-三羟基-2-乙氧甲基-6-
甲氧基蒽醌(Ⅰ)及 1，3-二羟基-2-乙氧甲基-蒽醌
(Ⅱ) ，且化合物Ⅰ为新成分。王玉波等［12］从红芽大
戟的正丁醇萃取部分分离得到 4 个黄酮醇苷成分，
分别鉴定为槲皮素-7-O-α-L-阿拉伯糖-3-O-β-D-6-乙
酰基吡喃葡糖苷、山奈酚-7-O-α-L-阿拉伯糖-3-O-β-
D-吡喃葡糖苷、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷、槲皮
素-3-O-β-D-6-乙酰基吡喃葡糖苷。但究竟上述哪些
成分发挥了抗结核作用尚不明确。本研究发现，红
大戟石油醚提取物和氯仿提取物的抗结核杆菌作用
最强，为从红大戟中寻找有应用前景的抗结核天然
活性产物和先导化合物提供了实验依据。但本实验
所用药物为粗提物，有待于进一步分离追踪有效成
分。
参考文献:
［1］陆善旦，王建． 红大戟十年走势分析及预测［J］． 中国现代中
药，2008，10(8) :38-40．
［2］黄志强，张日东，吴智龙．新型改良罗氏培养基与罗氏酸基检测
结核分枝杆菌比较［J］．广东医学，2011，32(9) :1152-1153．
［3］李仪奎．中药药理实验方法学［M］． 2 版． 上海:上海科学技术
出版社，2006:753-756．
［4］成诗明． 我国结核病研究概况［J］． 中国防痨杂志，2011，23
(9) :525-526．
［5］李静，聂广．中药抗结核杆菌的实验研究进展［J］．湖北中医杂
志，2010，32(8) :35-37．
［6］石磊．结核分枝杆菌抗原及其研究进展［J］．医学综述，2012，18
(11) :1609-1610．
［7］任丽娟，王丽，文仲书，等．抗结核中药成分的研究［J］．药学实
践杂志，2009，27(1) :15-17．
［8］范君文，于录，马兰芝，等． 29 种中药提取物抗结核药物敏感性
研究［J］．中国农学通报，2009，25(24) :1-7．
［9］吴虢东，王玲．抗结核中药的研究进展［J］．医学综述，2007，13
(6) :475-476．
［10］黄浩，韦鹏霄，岑秀芬． 药用植物红芽大戟研究概况［J］． 热带
农业科技，2005，28(2) :30-33．
［11］袁珊琴，赵毅民．红芽大戟的化学成分［J］．药学学报，2006，41
(8) :735-737．
［12］王玉波，赵静峰，李干鹏，等．红芽大戟化学成分研究［J］．药学
学报，2004，33(6) :439-441．
(收稿日期:2012-11-23)
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