全 文 ：大叶钩藤叶子化学成分研究
刘林生１，方　功２，王定勇２＊
（１．佛山市中医院 药剂科，广东 佛山５２８０００；２．广东药学院 药科学院，广东 广州５１０００６）
摘　要：目的：对茜草科钩藤属植物大叶钩藤（Ｕｎｃａｒｉａ　ｍａｃｒｏｐｈｙｌｌａ　Ｗａｌ．）的叶子进行化学成分研究。
方法：用甲醇提取及柱色谱等方法进行分离，薄层色谱跟踪检测，波谱法鉴定结构。结果：从该植物叶子
中共分离鉴定出６个化合物，分别是柯诺辛碱（１）、、异钩藤碱（２）、钩藤碱（３）、熊果酸（４）、表儿茶素（５）、
山奈酚（６）。结论：该实验首次报道了大叶钩藤叶子的非挥发性化学成分。
关键词：大叶钩藤；柯诺辛碱；熊果酸
中图分类号：Ｒ２８４．１　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１６７３－２１９７（２０１４）２１－００１０－０２
收稿日期：２０１４－０７－０３
基金项目：广东省中医药局科研课题（Ｎｏ．２０１３２０３０）
作者简介：刘林生（１９８２－），男，广东省佛山市中医院主管中药师，研究方向为医院药学。
通讯作者：王定勇（１９６７－），男，博士，广东药学院教授，硕士生导师，研究方向为天然药物活性成分。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｄｉｎｇｙｏｎｇ＠
１６３．ｃｏｍ。
Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｌｅａｆ　ｏｆ　Ｕｎｃａｒｉａ　Ｍａｃｒｏｐｈｙｌｌａ　Ｗａｌ．
Ｌｉｕ　Ｌｉｎｓｈｅｎｇ１，Ｆａｎｇ　Ｇｏｎｇ２，Ｗａｎｇ　Ｄｉｎｇｙｏｎｇ２＊
（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｆｕｓｈａｎ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　ＴＭＣ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　５２８０００，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　５１０００６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　ｌｅａｆ　ｏｆ　Ｕｎｃａｒｉａ　ｍａｃｒｏｐｈｙｌａ　Ｗａｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ　ｐｌａｎｔ　ｗａｓ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ
ｂｙ　ＭｅＯＨ，ｔｈｅｎ　ｓｅｐａｒａｔｅｄ　ａｎｄ　ｒｅｐｅａｔｅｄｌｙ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｏｆ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＴＬＣ　ｆｏｒ　ｔｒａｃｋｉｎｇ　ａｎｄ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅｉｒ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ
ｗｅｒｅ　ｅｌｕｃｉｄａｔｅｄ　ｂｙ　ＩＲ，ＭＳ　ａｎｄ　ＮＭＲ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｓｉｘ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｌｅａｆ　ｏｆ　Ｕ．ｍａｃｒｏｐｈｙｌａ　Ｗａｌ．ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ａｓ
ｃｏｒｙｎｏｘｉｎｅ（１），ｉｓｏｒｈｙｎｃｈｏｐｈｙｌｉｎｅ（２），ｒｈｙｎｃｈｏｐｈｙｌｉｎｅ（３），ｕｒｓｏｌｉｃ　ａｃｉｄ（４），ｅｐｉｃａｔｅｃｈｉｎ（５）ａｎｄ　ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ（６）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：
Ｔｈｅ　ｎｏｎ－ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　ｌｅａｆ　ｏｆ　Ｕ．ｍａｃｒｏｐｈｙｌｌａ　Ｗａｌ　ｗａｓ　ｒｅｐｏｒｔｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｔｉｍｅ．
Ｋｅｙ　Ｗｏｒｄｓ：Ｕｎｃａｒｉａ　ｍａｃｒｏｐｈｙｌｌａ　Ｗａｌ．；Ｃｏｒｙｎｏｘｉｎｅ；Ｕｒｓｏｌｉｃ　Ａｃｉｄ
　　大叶钩藤（Ｕｎｃａｒｉａ　ｍａｃｒｏｐｈｙｌｌａ　Ｗａｌ．）为茜草科钩藤
属植物，为常用中药。临床多用于治疗头晕目眩、惊痫抽
搐、全身麻木等心血管和神经系统疾病，现已成为治疗高血
压方剂中常用药物［１］。大叶钩藤的化学成分已有报道：杨
君等［２］对大叶钩藤钩茎进行了化学成分研究；李国成等［３］报
道了大叶钩藤根的化学成分；王冬梅等［４］对大叶钩藤叶的
挥发油进行了ＧＣ－ＭＳ分析，共检出１２７个色谱峰，鉴定了
其中的８５种成分；笔者［５－８］曾对大叶钩藤茎的生物碱和非生
物碱的化学成分、总生物碱的提取方法等进行了研究。作
为大叶钩藤基础研究的一部分，本文对大叶钩藤叶子中非
挥发性成分进行研究，利用现代提取分离和结构鉴定方法，
从中获得６个化合物，分别为柯诺辛碱（１）、异钩藤碱（２）、
钩藤碱（３）。熊果酸（４）、表儿茶素（５）、山奈酚（６）。现报道
如下。
１　仪器与材料
Ｘ－６型显微熔点测定仪（温度未校正，北京泰克仪器有
限公司）。核磁共振用Ｂｒｕｋｅｒ　ＡＭ－５００型核磁共振仪测定
（ＴＭＳ为内标，瑞士Ｂｒｕｋｅｒ公司）；ＥＳＩ－ＭＳ在 Ａｇｉｌｅｎｔ　６１２０
ＬＣ／ＭＳ上测定（美国 Ａｇｉｌｅｎｔ公司）；ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ　Ｓｐｅｃ－
ｔｒｕｍ－１００型红外光谱仪（ＫＢｒ压片，美国 ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ公
司）。层析用硅胶（青岛海洋化工厂），层析用中性氧化铝
（天津市大茂化学试剂厂）。有机溶剂均为分析纯（天津市
富宇精细化工有限公司）。大叶钩藤叶子２０１２年１０月采自
广东省阳春市，由广东药学院中药学院曾令杰博士鉴定为
大叶钩藤（Ｕｎｃａｒｉａ　ｍａｃｒｏｐｈｙｌｌａ　Ｗａｌ．）的叶子。
２　提取与分离
大叶钩藤叶子２．５ｋｇ，粉碎后用甲醇回流提取３次，减
压回收甲醇得浸膏３５０ｇ，然后用３％ＨＣｌ溶液溶解过滤，得
不溶物（Ａ部分）和滤液（Ｂ部分）。Ｂ部分用氨水中和至ｐＨ
９～１０，然后用氯仿萃取５次，回收氯仿得氯仿萃取物
１５．５ｇ。氯仿萃取物经中性氧化铝柱层析，石油醚—丙酮梯
度洗脱，氯仿与丙酮混合溶剂重结晶，得到柯诺辛碱（１，
—０１—
６３ｍｇ）、异钩藤碱（２，３５ｍｇ）和钩藤碱（３，２０ｍｇ）。Ａ部分经
硅胶柱层析，氯仿—甲醇梯度洗脱，甲醇重结晶，得到熊果
酸（４，８５ｍｇ）、表儿茶素（５，６０ｍｇ）和山奈酚（６，３０ｍｇ）。
３　结构鉴定
化合物 １：白色针状晶体 （ＣＨＣｌ３），ｍｐ　１５５．０～
１５７．０℃。ＥＳＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）：３８３．１［Ｍ－Ｈ］－。ＩＲνｍａｘ（ＫＢｒ）
ｃｍ－１：３１７０，３０６０，３０２０，２９３０，２７７８，１７００，１６１５，１２４３，
７５３。１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１８２．２（Ｃ－２），７３．５
（Ｃ－３），５３．８（Ｃ－５），３４．８（Ｃ－６），５７．２（Ｃ－７），１３３．９（Ｃ－８），
１２４．９（Ｃ－９），１２２．０（Ｃ－１０），１２８．１（Ｃ－１１），１０９．６（Ｃ－１２），
１４０．０（Ｃ－１３），２５．４（Ｃ－１４），３９．１（Ｃ－１５），１１１．８（Ｃ－１６），
１６１．２（Ｃ－１７），１２．８（Ｃ－１８），１９．６（Ｃ－１９），４０．５（Ｃ－２０），
５４．６ （Ｃ－２１），１６９．２ （Ｃ－２２），５２．３ （－ＣＯＯＣＨ３），６１．２
（－ＯＣＨ３）。１　ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：９．０２（１Ｈ，ｓ，
ＮＨ－１），２．３７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．４，２．７Ｈｚ，Ｈ－３），３．２１
（１Ｈ，ｍ，Ｈ－５ｂ），２．４２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．７，８．７，８．７Ｈｚ，
Ｈ－５ａ），２．３５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．４，２．０，Ｈ－６ｂ），２．０２（１Ｈ，
ｍ，Ｈ－６ａ），７．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，Ｈ－９），７．０２（１Ｈ，
ｄｄｄ，Ｊ＝７．５，７．５，０．９Ｈｚ，Ｈ－１０），７．１５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝
７．７，７．７，１．０Ｈｚ，Ｈ－１１），６．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，Ｈ－
１２），１．８０（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１２．９，２．７，２．７Ｈｚ，Ｈ－１４ｂ），
２．７６（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１３．３，３．６Ｈｚ，Ｈ－１５），７．２０（１Ｈ，ｓ，Ｈ－
１７），０．８５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，Ｈ－１８），１．６５（１Ｈ，ｍ，Ｈ－
１９ｂ），１．０５（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１９ａ），１．４８（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝１１．３
Ｈｚ，Ｈ－２０），３．１７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．６，２．１Ｈｚ，Ｈ－２１ｂ），
２．１５ （１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．１，２．１ Ｈｚ，Ｈ－２１ａ），３．５７
（－ＣＯＯＣＨ３，ｓ），３．４９（－ＯＣＨ３，ｓ）。以上数据与文献［５］报
道的柯诺辛碱一致。
化合物２：白色粉末，ｍｐ　１５２．５～１５４．０℃。ＥＳＩ－ＭＳ
（ｍ／ｚ）：３８３．２［Ｍ－Ｈ］－。ＩＲνｍａｘ（ＫＢｒ）ｃｍ－１：３４１８，３０４０，
２９４２，２７８５，１７０３，１７００，１６３４，１６１５，１２４０，７４１。
１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１８０．８（Ｃ－２），７２．８（Ｃ－３），
５４．６（Ｃ－５），３６．４（Ｃ－６），５７．２（Ｃ－７），１３５．２（Ｃ－８），１２５．０
（Ｃ－９），１２２．６（Ｃ－１０），１２７．５（Ｃ－１１），１０９．４（Ｃ－１２），１４０．８
（Ｃ－１３），２９．１（Ｃ－１４），３７．９（Ｃ－１５），１１２．９（Ｃ－１６），１５９．７
（Ｃ－１７），１１．２（Ｃ－１８），２４．５（Ｃ－１９），３８．２（Ｃ－２０），５９．１（Ｃ－
２１），１６９．２ （Ｃ－２２），５１．２ （－ＣＯＯＣＨ３），６１．３ （－
ＯＣＨ３）。１　ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：８．１１（１Ｈ，ｓ，ＮＨ－
１），７．４２（１Ｈ，ｓ，Ｈ－９），７．２１（１Ｈ，ｓ，Ｈ－１７），７．０２（１Ｈ，
ｍ，Ｈ－１０），７．１６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｈ－１１），６．８８（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｈ－１２），３．５６（３Ｈ，ｓ，ＣＯＯＣＨ３），３．７５
（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．３４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．７，１１．０Ｈｚ，Ｈ－
２１ｂ），３．２９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．５，８．５Ｈｚ，Ｈ－５ｂ），２．５１（１Ｈ，
ｄｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１７．３Ｈｚ，Ｈ－５ａ），２．４１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．５，
８．８Ｈｚ，Ｈ－６ｂ），２．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．２，８．８Ｈｚ，Ｈ－６ａ），
１．７８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，Ｈ－２１ａ），１．４９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．９
Ｈｚ，Ｈ－１４ｂ），１．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，Ｈ－１４ａ），０．８２
（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，Ｈ－１８）。以上数据与文献［５］报道的异
钩藤碱一致。
化合物３：白色针晶（ＣＨＣｌ３），ｍｐ　２０２．０～２０３．０℃。
ＥＳＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）：３８３．２［Ｍ－Ｈ］－。ＩＲνｍａｘ（ＫＢｒ）ｃｍ－１：３４１０，
３０４０，２９４０　２７８５，１７２３，１７００，１６３０，１６１０，１２３８，７４５。１３
ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１８０．５（Ｃ－２），７６．８（Ｃ－３），
５５．６（Ｃ－５），３５．４（Ｃ－６），５６．８（Ｃ－７），１３５．５（Ｃ－８），１２４．２
（Ｃ－９），１２２．９（Ｃ－１０），１２８．５（Ｃ－１１），１０９．５（Ｃ－１２），１４２．８
（Ｃ－１３），３１．１（Ｃ－１４），３８．９（Ｃ－１５），１１２．８（Ｃ－１６），１６０．７
（Ｃ－１７），１１．８（Ｃ－１８），２４．６（Ｃ－１９），４０．２（Ｃ－２０），５８．６（Ｃ－
２１），１６９．５ （Ｃ－２２），５１．３ （－ＣＯＯＣＨ３），６１．８ （－
ＯＣＨ３）。１　ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：９．０６（１Ｈ，ｓ，ＮＨ－
１），７．２８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，Ｈ－９），７．３１（１Ｈ，ｓ，Ｈ－１７），
７．１５（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１１），７．０２（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１０），６．８４（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｈ－１２），３．７４（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．５６（３Ｈ，
ｓ，ＣＯＯＣＨ３），３．２５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．８，１２．０Ｈｚ，Ｈ－２１ｂ），
３．２２（１Ｈ，ｍ，Ｈ－５ｂ），２．４５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８，２．２Ｈｚ，Ｈ－
５ａ），２．３６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８，４．４Ｈｚ，Ｈ－６ｂ），１．９７（１Ｈ，
ｍ，Ｈ－６ａ），１．６２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，Ｈ－２１ａ），１．９４（１Ｈ，
ｍ，Ｈ－１４ｂ），０．９５（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１４ａ），０．７９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３
Ｈｚ，Ｈ－１８）。以上数据与文献［５］报道的钩藤碱一致。
化合物 ４：白色针状晶体 （ＭｅＯＨ），ｍｐ　２８５．６～
２８７．０℃。ＥＳＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）：４５５．２［Ｍ－Ｈ］－；ＩＲνｍａｘ（ＫＢｒ）
ｃｍ－１：３４３５，２９６４，２９２８，２８７１，１６８８，１４５６，１３８７，１０３２，
９９８，９５１，８７５，８５０，８２１，６６０。１３　ＣＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ，
ＣＤＣｌ３）δ：３８．３（Ｃ－１），２６．９（Ｃ－２），７６．８（Ｃ－３），３８．７（Ｃ－
４），５４．８（Ｃ－５），１８．０（Ｃ－６），３２．７（Ｃ－７），３９．０（Ｃ－８），４０．
１（Ｃ－９），３６．５（Ｃ－１０），２２．８（Ｃ－１１），１２４．５（Ｃ－１２），１３８．１
（Ｃ－１３），４１．６（Ｃ－１４），２７．５（Ｃ－１５），２３．８（Ｃ－１６），４６．８（Ｃ－
１７），５２．３（Ｃ－１８），３８．５（Ｃ－１９），３８．４（Ｃ－２０），３０．２（Ｃ－
２１），３６．３（Ｃ－２２），２８．２（Ｃ－２３），１５．２（Ｃ－２４），１６．０（Ｃ－
２５），１６．８（Ｃ－２６），２３．２（Ｃ－２７），１７８．１（Ｃ－２８），１６．９（Ｃ－
２９），２１．０（Ｃ－３０）。１　ＨＮＭＲ （５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：５．１３
（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１２－Ｈ），３．７５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．４，４．６
Ｈｚ，３－Ｈ），０．６８（３Ｈ，ｓ），０．７５（３Ｈ，ｓ，Ｍｅ），０．８７（３Ｈ，
ｓ，Ｍｅ），０．８９（３Ｈ，ｓ，Ｍｅ），１．０５（３Ｈ，ｓ，Ｍｅ），０．８０
（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，Ｍｅ），０．９２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，Ｍｅ）。
以上数据与文献［６］报道的熊果酸一致。
化合物５：淡黄色结晶（ＭｅＯＨ），ｍｐ　２２８．０～２２９．５℃。
ＥＳＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）：２９１．１［Ｍ＋Ｈ］＋。１３　ＣＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ，
ＣＤ３ＯＤ）δ：１５８．３（Ｃ－７），１５７．８（Ｃ－９），１５０．８（Ｃ－５），１４６．２
（Ｃ－３’），１４６．１（Ｃ－４’），１３２．６（Ｃ－１’），１１９．７（Ｃ－５’），１１６．
２（Ｃ－６’），１１５．６（Ｃ－２’），１００．４（Ｃ－１０），９６．７（Ｃ－６），９６．２
（Ｃ－８），８０．２（Ｃ－２），６７．８（Ｃ－３），２９．５（Ｃ－４）。１　ＨＮＭＲ（５００
ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：２．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．８，３．０Ｈｚ，Ｈ－４），
２．８５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．８，４．７Ｈｚ，Ｈ－４），４．１７（１Ｈ，ｂｒ．ｓ，
Ｈ－３），４．８１（１Ｈ，ｂｒ．ｓ，Ｈ－２），５．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，
Ｈ－８），５．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，Ｈ－６），６．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
８．２Ｈｚ，Ｈ＝５’），６．７８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．８Ｈｚ，Ｈ－６’），
６．９８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，Ｈ－２’）。以上数据与文献［９］报道
的表儿茶素一致。
化合物６：黄色针状结晶（ＭｅＯＨ），ｍｐ　２　７　５．０～
—１１—
双黄连注射剂中黄芩苷抗原合成及抗血清制备分析探讨
叶厚春
（赣县人民医院，江西 赣州３４１１００）
摘　要：目的：对双黄连注射剂中黄芩苷抗原的合成以及抗血清成分的制备情况进行分析探讨，为今后
药物研究工作提供可靠的参考依据。方法：将黄芪苷与牛血清白蛋白采用高碘酸钠法进行交联，鉴定方
法为紫外扫描和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法；经黄芩苷与牛血清白蛋白复合物对新西兰兔进行免疫产生抗血清，采
取ＥＬＩＳＡ法进行检测。结果：经紫外扫描和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法证实黄芩苷与牛血清白蛋白发生了交联，
ＥＬＩＳＡ法在新西兰兔体内检测出黄芩苷与牛血清白蛋白复合物的抗血清，抗血清效价为１∶８　０００。结
论：经高碘酸钠法黄芩苷抗原合成成功，其为黄芩苷单克隆抗体的制备以及ＥＬＩＳＡ法快速检测黄芩苷
提供了可靠的依据，值得关注。
关键词：双黄连注射剂；黄芩苷抗原；药物合成；抗血清；鉴定
中图分类号：Ｒ２８４　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１６７３－２１９７（２０１４）２１－００１２－０２
收稿日期：２０１４－０４－０１
作者简介：叶厚春（１９７３－），男，江西省赣州市赣县人民医院主管药师，研究方向为临床药理。
　　目前在临床上中药注射剂具有不可替代的作用，在疾
病的治疗中发挥重要的价值，减轻了患者的痛苦。然而注
射剂不良反应的存在也对其发展产生了一定的阻碍作
用［１］。本次实验对双黄连注射剂中黄芩苷抗原的合成以及
抗血清成分的制备情况进行分析探讨，分别采取高碘酸钠
法合成、紫外扫描和 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ 法进行鉴定，并采取
ＥＬＩＳＡ法对抗血清进行检测，具体情况报道如下。
１　实验材料
１．１　仪器
ＡＲ１１４０／Ｃ型电子天平，ＴＵ－１９００型双光束紫外可见分
光光度计，ＤＥ－１型磁力搅拌器，透析袋，高速冷冻离心机，
ＣＭ－２３０超纯水系统，ＶＥ－１８０型电泳槽，ＥＰＳ３００型电泳仪，
ＴＹ－８０Ａ型脱色摇床，ＴＨＡ－３５６０Ｃ高压灭菌锅，核酸蛋白分
析仪，微量移液器，ＢＩＯ－ＴＥＫＥＬＸ－８００酶标仪，ＤＺＦ－６０５０型
恒温干燥箱，ＭＡ１１０型电子天平，超声波清洗器，可调电
炉，无菌注射器，酶标板，封口膜。
１．２　实验动物与试剂
本次实验中实验动物为健康新西兰大白兔；试剂包括：
黄芩苷单体，蒸馏水，牛血清蛋白，ＤＭＦ（分析纯），高碘酸
钠，乙二醇（分析纯），吡啶，二乙基氨基乙基纤维素，生理盐
水，β－巯基乙醇，Ｔｒｉｓ丙烯酰胺，甲叉双丙烯酰胺，

过硫酸铵
２７６．５℃。ＥＳＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）：２８５．２［Ｍ－Ｈ］－。１３　ＣＮＭＲ （１２５
ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δｐｐｍ：１７６．２（Ｃ－４），１６４．２（Ｃ－７），
１６１．５（Ｃ－９），１６０．５（Ｃ－４’），１５６．０（Ｃ－５），１４６．２（Ｃ－２），
１３５．９（Ｃ－３），１３０．３（Ｃ－２’，６’），１２３．０（Ｃ－１’），１１６．３（Ｃ－
３’，５’），１０３．０（Ｃ－１０），９８．７（Ｃ－６），９３．５（Ｃ－８）。１　ＨＮＭＲ
（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δｐｐｍ：１２．４５（１Ｈ，ｓ，５－ＯＨ），
８．０１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ－２’，６’），６．９１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝
８．７Ｈｚ，Ｈ－３’，５’），６．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，Ｈ－８），６．２１
（１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，Ｈ－６）。以上数据与文献［１０］报道的山奈酚
一致。
参考文献：
［１］　国家药典委员会．中国药典［Ｓ］．北京：化学工业出版社，
１９９５：２２５．
［２］　杨君，宋纯淸，胡之璧．大叶钩藤的化学成分研究［Ｊ］．中国
中药杂志，２０００，２５（８）：４８４－４８５．
［３］　李国成，伍俊妍，刘韬．大叶钩藤根的化学成分研究［Ｊ］．中
国现代应用药学，２０１０，２７（１３）：１１９３－１１９５．
［４］　王冬梅，黄林芳．大叶钩藤叶挥发油成分气相色谱－质谱联
用分析［Ｊ］．药物分析杂志，２０１３，３３（２）：２３４－２４０．
［５］　郑嘉宁，王定勇．大叶钩藤生物碱类化学成分研究［Ｊ］．中医
药导报，２００９，１５（１）：８０－８１．
［６］　伍俊妍，李国成，王定勇．大叶钩藤非生物碱部分的化学成
分研究［Ｊ］．南方医科大学学报，２００７，２７（２）：２２６－２２７．
［７］　李维锋，姜建国，王定勇，等．大叶钩藤总生物碱提取溶剂的
研究及钩藤碱的纯度测定［Ｊ］．食品科技，２００７（８）：１５６－１５８．
［８］　陈淸霞，徐祖疆，王定勇，等．大叶钩藤中柯诺辛碱对照品
的制备及鉴定［Ｊ］．中药材，２０１２，３５（９）：１４４８－１４４９．
［９］　丁丽丽，王顺春，王峥涛．猫人参化学成分的研究［Ｊ］．中国
中药杂志，２００７，３２（１８）：１８９３－１８９５．
［１０］　雷军，肖云川，王文静，等．糯米藤中黄酮类化学成分研究
［Ｊ］．中国中药杂志，２０１２，３７（４）：４７８－４８２．
（责任编辑：宋勇刚）
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