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满山红药材中总黄酮类成分研究
牛 峰
(哈药集团制药六厂,黑龙江 哈尔滨 150036)
满山红(Folium RhododendriDaurici) 为杜鹃花科杜鹃花属植物
兴安杜鹃 Rhododendron dauricum L. 的干燥叶,俗称映山红、达子
香。始载于《东北常用中草药手册》,其味辛、苦、性寒,具有止咳、祛
痰、平喘的作用,用于治疗急、慢性支气管炎[1]。且具有疗效高,副作
用小,资源丰富等特点。国内外对满山红的研究不多,目前已经从满
山红已分离得到的化学成分主要有黄酮类,香豆素类,有机酸类,挥
发油类等类型[2- 5]。经过药理研究发现这四类化合物中黄酮类化合物
是祛痰止咳的主要的有效成分。所以利用合理的方法检测满山红中
黄酮类化学成分的含量是控制该药材质量的重要手段。
1 主要黄酮成分类型及作用
1.1 黄酮类
槲皮素(quercetin),杨梅树皮素(myricetin),棉花皮素(gossypetin),
金丝桃苷(hyperoside),异金丝桃苷(isohyperoside),山奈酚(kaempfer-
ol), 蓄苷(avicularin)。其中槲皮素改善毛细管脆性作用;杨梅树皮
素具有保肝降酶退黄,增强机体非特异免疫功能和免疫功能低下时
体液免疫功能,因而起到保肝作用;金丝桃苷、异金丝桃苷具有祛痰
止咳作用;山奈酚具有抗菌消炎作用; 蓄苷实验证实有利尿作用。
1.2 二氢黄酮类
二氢槲皮素(dihydroquercetin),杜鹃素(farrerol),8- 去甲杜鹃素
(8- demethyl farrero1),杜鹃黄素(azaleatin),黄杉素(poriol)。以上二氢
黄酮类化合物主要具有祛痰止咳及抗炎的作用。
2 UV法测定总黄酮含量
满山红中总黄酮测定的多用三氯化铝比色法[1]。基于 UV法较
比色法操作简便、测定快速等优点,本实验利用紫外分光光度法测
定满山红中总黄酮含量。实验结果表明,所建立的方法的各项分析
效能指标符合定量要求,可用于满山红中总黄酮的定量,为建立满
山红的现代质量评价体系提供了重要参考价值。
2.1 仪器与试药
仪器:721型紫外分光光度计,电子分析天平(DT100型),超声
清洗仪(KQ- 500型,昆山市超声仪器有限公司)。
试药:三氯化铝,醋酸钾(均为天津试剂二厂产品),乙醇为医用
酒精(黑龙江华润实业有限公司产品)。
药材:产自黑龙江省
2.2 测定条件
温度:室温;检测波长:420nm
2.3 测定方法
2.3.1 对照品溶液的制备:精密称取经五氧化二磷减压干燥至
恒重的芦丁对照品 6mg,置 100ml量瓶中,加 60%乙醇适量使溶解,
并稀释至刻度,摇匀,即得(每 lml含无水芦丁 60μg)。
2.3.2 供试品溶液制备:分别取满山红药材粗粉约 1.0g,精密称
定,置 100mL 具塞锥型瓶中,精密加 60%乙醇 30mL,称定重量,超
声 20min,放冷,再称重量,加 60%乙醇补足损失,摇匀,滤过,精密
量取样品续滤液 5.00mL,置 50mL 量瓶中,加 60%乙醇至刻度,摇
匀。精密量取 2.00mL,置 10mL量瓶中,用于紫外法测定。
2.3.3 标准曲线制备
精密吸取对照品溶液 0.5ml,1.0ml,2.0ml,3.0ml,4.0ml,分别置
10ml量瓶中,加 0.lmol/L三氯化铝溶液 2ml,lmol/L醋酸钾溶液 3ml,
加 60%乙醇至刻度,摇匀,放置 30分钟,同时作空白。照分光光度法
在 420mn的波长处测定吸收度,以吸收度为纵坐标,浓度为横坐
标,绘制标准曲线。Y=0.0327X+0.0007(R2=0.9981)
2.3.4 精密度考察
取约 1.0g,2. 0g,3.0g 的满山红药材粗粉各 3 份,按 2.3.2项制
备供试液,用紫外分光光度法测定吸光度,并通过相应的工作曲线
计算样品中总黄酮的含量,得到精密度 RSD 分别为 1.2%、1. 5%、
1.5%。
2.3.5 重现性考察
精密称取 5 份同一产地满山红药材,每份 1g,依 2.3.2项下的
方法进行处理,分别精密吸取供试品溶液 25ul 进样。结果重现性
的 RSD 为 1.2%。
2.4.4 稳定性考察
取满山红药材样品的粗粉,按 2.3.2项下样品溶液制备方法,制
备紫外法测定的供试液,分别于配制后 0、0.5、1、2、3、4、5 和 6 h,
依紫外分光光度法测定吸光度,结果表明,供试液的吸光度在 6 h
内不发生变化,RSD= 0.5%。
2.4.5 样品测定
取 1、2、3 号 满 山 红 粗 粉 , 每 份 精 密 称 定 分 别 为
1.00259,1.00279,1.00529。将以上三份药材加热回流 1小时,滤过,
精密称取续滤液 5ml,置 25ml量瓶中,加 60%乙醇至刻度,摇匀。精
密量取 lml,置 10ml量瓶中,加 0.lmol/L三氯化铝溶液 2ml,lmol/L醋
酸钾溶液 3ml,加 60%乙醇至刻度,摇匀放置 30分钟,同时作空白。
在 420nm波长下测定吸收度,测定结果如下(见 Table1)所示:
Table1 content of flavone in medicinal material
药材 吸收度(A) 浓度(mg/ml) 含量
1 0.384 0.0133 3.31%
2 0.260 0.0094 2.34%
3 0.374 0.0130 3.24%
2.5结论
利用比色法对满山红中总黄酮的定量,虽可准确测定总黄酮的
含量,但操作较繁杂。用 UV法测定经实验方法学考察具有良好的
精密度、稳定性及重现性,结果可靠且操作简便。另外通过测定结果
可见由于满山红药材产地和存放时间的不同总黄酮含量不同,但一
般都超过 2%。
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].一部,2000:296-297.
[2]刘永 ,傅丰永,谢昌曦等.满山红化学成分的研究(第Ⅰ报)[J].化
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摘 要:结合实际工作,谈谈满山红药材中总黄酮类成分研究。
关键词:满山红;黄酮成分;类亚;作用
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