全 文 ：·药品检验· 2012 年 12月第 9卷第 34期
中国医药导报 CHINA MEDICAL HERALD
山芝麻为梧桐科植物山芝麻 Helicteres angustifolia L.的
干燥根，其味苦、性寒，归肺、大肠经，可解表清热、解毒消肿，
用于感冒发热、痄腮、麻疹、咳嗽、泄泻痢疾、痈肿 [1-2]。 山芝麻
为民间常用的中药，始载于《生草药性备要》，是广东凉茶的
主要原料，也是多种中药制剂的原料[3]。山芝麻为广东地方特
色中药材，其研究水平较低，相关报道也较少，严重制约了该
药材的开发利用。 近年来对其化学成分的研究逐渐深入开
展，植物化学研究表明，山芝麻中含有有机酸、三萜、甾体和
倍半萜内酯类等有效成分[4-9]。由于中药饮片主要采用水煎煮
的方式服用， 研究其水提取液的化学成分具有重要的意义。
本文采用水为溶剂加热回流提取山芝麻的活性成分，提取液
采用高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MSn）分析，研究结果
将为山芝麻药材的开发利用及其质量控制提供理论依据。
1 仪器与试药
Agilent 1100 HPLC-MSD 高效液相色谱离子阱质谱联用
仪（美国 Agilent 公司）；色谱柱：Zorbax-SB C18高效液相色谱
柱（150.0 mm × 2.1 mm，5 μm，美国 Agilent 公司）。 乙腈为色
谱纯（美国 Burdick & Jackson），水为 Milli-Q 超纯水。 山芝麻
药材购自广州大参林药店，经鉴定为山芝麻（Helicteres an-
gustifolia L.）。
2 方法与结果
2.1 样品提取
取山芝麻药材粉碎，称取 10 g 置圆底烧瓶中，加 100 mL
水，加热回流提取 2 h，提取液冷却后转移至 100 mL 的容量
瓶中，定容后过 0.45 μm 滤膜，待分析。
2.2 色谱及质谱条件
2.2.1 色谱条件 Zorbax-SB C18高效液相色谱柱（150.0 mm ×
2.1 mm，5 μm）；流动相 A 为 0.5%的甲酸，B 为乙腈，梯度洗
脱 ：0～5 min，98%A+2%B；5～25 min，2%~12%B；25～55 min，
12%～25%B；55～70 min，25%～95%B；后运行 10 min，98%A+
2%B。 流速为 0.5 mL/min，进样量为 5.0 μL，柱温为 25℃，二
极管阵列检测器（DAD）扫描波长为 190～400 nm。
2.2.2 质谱条件 电喷雾（ESI）离子源，负离子检测模式；雾化
N2 压力 345 kPa，干燥 N2 气流速 10 L/min，干燥 N2 气温度
350℃；毛细管电压 3 500 V；质谱扫描 ：m/z 50～1 000，Auto
MSn 模式，自动选择丰度最高的三个离子进行二级和三级质
谱分析。
高效液相色谱串联质谱法鉴定山芝麻水提取液的
化学成分
宋伟峰 1 罗淑媛 1 李瑞明 2 梁耀荣 2
1.中山大学附属第三医院，广东广州 510630；2.中山大学附属第一医院，广东广州 510080
[摘要] 目的 鉴定山芝麻水提取液的化学成分。 方法 采用水为溶剂加热回流提取法提取山芝麻药材， 提取液采用
高效液相色谱串联质谱法鉴定其中的化学成分。 结果 从山芝麻水提取液中共分离得到 10 个主要的化学成分，并
采用多级质谱对其进行了结构鉴定，其中 8 个化学成分通过对照品得到了确证，分别为奎尼酸、柠檬酸、新绿原酸、
绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸 C、异绿原酸 A 和异绿原酸 B。 结论 本实验为该药材的开发和利用提供了科学基础。
[关键词] 山芝麻；水提取液；化学成分；高效液相色谱串联质谱法
[中图分类号] R284.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2012）12（a）-0108-02
Identification of the major components from the water extract of Helicteres
angustifolia L. by high -performance liquid chromatography coupled with
tandem mass spectrometry
SONG Weifeng1 LUO Shuyuan1 LI Ruiming2 LIANG Yaorong2
1.The Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangdong Province, Guangzhou 510630, China; 2.The First
Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangdong Province, Guangzhou 510080, China
[Abstract] Objective To identify the major components from the water extract of Helicteres angustifolia L.. Methods The
Helicteres angustifolia L. was extracted by reflux extraction using water as solvent, and the extract was analyzed by high-
performance liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry. Results 10 major components were separated,
and their chemical structures were identified by tandem mass spectrometer. Among them, quinic acid, citric acid,
neochlorogenic acid, chlorogenic acid, cryptochlorogenic acid, isochlorogenic acid C, isochlorogenic acid A and isochloro -
genic acid B were confirmed by a comparison of MSn information with those of the reference substances. Conclusion The
method provides the scientific basis for the exploitation and utilization of Helicteres angustifolia L..
[Key words] Helicteres angustifolia L.; Water extract; Components; High-performance liquid chromatography coupled with
tandem mass spectrometry
[基金项目] 广东省科技计划项目（项目编号：2011A080300004）。
[作者简介] 宋伟峰（1972，4-），男，主管药师；研究方向：医院药学。
[通讯作者] 李瑞明（1974，7-），男，主管药师；研究方向：医院制剂。
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2012 年 12月第 9卷第 34期
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·药品检验·
2.3 成分分析
山芝麻药材水提取液的 HPLC-MSn 分析总离子流色谱
见图 1，色谱图上有 10 个明显的色谱峰，表明山芝麻水提取
液中含有 10 个主要的化学成分。 对每个化学成分进行多级
质谱分析，并结合相关的文献报道，对这 10 个色谱峰进行了
鉴定，相关信息见表 1，图 2 给出了异绿原酸 A 的多级质谱
裂解途径。 异绿原酸（m/z 515）为双咖啡奎宁酸衍生物，多级
质谱失去 1分子咖啡酰基，得到单咖啡奎宁酸衍生物（m/z 353），
m/z 353 再失去 1 分子咖啡酰基得到 m/z 191 的碎片。
通过与对照品的保留时间、一级质谱和多级质谱信息进
行比较，色谱峰 1、2、3、5、6、8、9 和 10 分别确证为奎尼酸、柠
檬酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸 C、异绿原酸 A
和异绿原酸 B。 化合物 4 由于缺乏相关的文献报道和对照
品，故结构未能鉴定，有待进一步分析。 化合物 7 与化合物
8、9 和 10 的一级质谱相同，显示具有相同的分子量，而它们
的多级质谱碎片信息也非常相似， 提示它们具有相似的结
构，因此推测化合物 7为异绿原酸的异构体。
图 1 山芝麻水提取液的总离子流图
图 2 异绿原酸 A 准分子离子的多级质谱裂解途径
3 讨论
山芝麻作为岭南常用中药，资源极为丰富，常用于治疗
感冒发热、痄腮、麻疹、咳嗽、泄泻痢疾和痈肿等症。 HPLC-
MSn 具有高选择性、 高灵敏度和能提供结构信息的特性，在
中药化学成分鉴定中起着非常重要的作用。本实验通过对山
芝麻水提取液进行 HPLC-MSn 分析， 研究了其水溶性化学
成分， 山芝麻水提取液主要成分为咖啡酰奎尼酸类化合物。
咖啡酰奎尼酸类化合物具有广泛的抗菌、抗炎、抗氧化等活
性，是山芝麻水提取液的药效物质基础[10-11]。本实验为山芝麻
药材的药效作用研究和合理开发利用提供了实验依据。
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（收稿日期：2012-06-05 本文编辑：卫 轲）
表 1 山芝麻水提取液的化学成分分析
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
1.26
2.51
21.11
22.55
26.51
27.57
32.56
47.04
48.15
53.58
191
191
353
359
353
353
515
515
515
515
85，173，127，93，111
111，173
191，179，135
197，181
191，179，135
173，179，191
353，335，173
353，173，191
353，191，179
353，203，173
C7H12O6
C7H12O6
C16H18O9
-
C16H18O9
C16H18O9
C25H24O12
C25H24O12
C25H24O12
C25H24O12
奎尼酸
柠檬酸
新绿原酸
未鉴定
绿原酸
隐绿原酸
异绿原酸异构体
异绿原酸 C
异绿原酸 A
异绿原酸 B
色谱
峰
保留时
间（min）
一级质谱
（m/z）
多级质谱（m/z） 分子式 化合物
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