全 文 ：　　文章编号:1671-8151 (2003)03-0292-03
雪 柳 的 组 织 培 养 初 探
李 洁
(山西农业大学 林学院 , 山西太谷 030801)
摘　要:初步探索了雪柳的离体培养过程。从中找出了不同取材时期 , 外植体消毒所需的最佳时间 , 并筛选出最适
培养基。结果表明:在不同阶段中 , 雪柳外植体消毒基本以 0.1% HgCl 7 min +70%乙醇 20～ 40 秒为宜;所用基
本培养基以 B5 为好 , GS 、 MS 次之.激素组合以 6-BA 0.5 mg/ L+NAA 0.01 mg/ L 诱导腋芽效果明显。
关键词:雪柳;组织培养;外植体;消毒;培养基
中图分类号:S723　　文献标识码:A
The Initial Study of Fontaresia Fortunei Carr s Organize Culture
LI Jie
(College of Forestry , Shanxi Agriculture Univercity , Taigu Shanx i 030801 , China)
Abstract:The paper initially studied the process of culture in vitro of Fontaresia fortunei carr.Finding out the optimum ster-
ilizing time that explants need in different months , and selecting out the optimum culture media .The result indicates that.
Fontaresia for tunei explants ` optimum sterilizing conditions are :0.1% mercuric chloride needs 7 minutes and 70% alcohol
needs 20～ 40 seconds.To Fontaresia fortunei ` s organize culture , the best basic media is B5 media , then are GS and MS
media .The best phy tohormone combination fo r inducing axilla bud is 0.5mg/ l 6-BA+0.01mg/ l NAA.
Key words:Fontaresia fortunei;Organize culture;Explants;Sterilizing;Media
雪柳属木犀科落叶灌木 , 较耐寒 , 其既具有广泛的经济价值 (如可用作嫁接砧木 , 其茎皮可作人造
棉 , 其嫩叶可作茶叶用 , 其枝条可编器具等;还可供观赏用 , 更主要的是它作为一个绿化树种 , 在保持
水土 , 防风固沙 , 调解气候方面具有很大优势 。利用试管苗快繁技术可进行雪柳苗木的高效周年化生
产 , 可向外地区 , 尤其是西部地区提供绿化资源 。有关雪柳的组织培养技术在该实验开始进行时未见有
关报道。
1　材料和方法
1.1　材　　料
　　从 4 ～ 9月份以不同的月份采取母株基部当年萌生的嫩茎叶为外植体 。
1.2　方　　法
1.2.1　清洗
将外植体采回后用自来水冲洗干净 , 然后插于自来水中培养一周。接种前将外植体用软刷在洗衣粉
水中刷一遍 , 然后用自来水冲洗 15 ～ 20 min。用剪刀剪去叶片 , 只留叶柄处一小部分 。将外植体剪成 1
cm 左右的小段 , 每段至少带一对腋芽 。
1.2.2　消毒
在超净台里 , 将外植体先用 0.05%或 0.1%的HgCl消毒 , 再用 70%乙醇迅速漂洗 , 期间要不停地
搅动外植体。最后用无菌水洗 3 ～ 5次即可。接种时先切去材料两端少许 , 以防消毒液残留 。然后接种
于 (1) ～ (7)号培养基上。
001804　J .Shan xi Agr ic.Univ.　　山 西 农 业 大 学 学 报
收稿日期:2002-07-17
作者简介:李　洁 (1977-), 女 (汉), 山西翼城人 , 在读硕士 , 主要从事林木生物技术的研究。
DOI :10.13842/j.cnki.issn1671-8151.2003.03.028
1.2.3　培养基和培养条件
所用培养基:
(1)B5+BA 2.0mg/L (单位下同)+NAA0.05;(2)B5+BA0.5+NAA0.01;(3)GS+BA2.0+
NAA0.5;(4)GS+BA4.0+NAA0.1;(5)Knop+BA2.0+NAA0.5;(6)Knop+BA3.0+NAA0.5;
(7)MS+VB1 0.3+BA2.0+NAA0.05+CH50mg+Vc5mg ;(8)1/2M S+NAA0.5 (其中 , 蔗糖浓度
为 30%;琼脂浓度为 0.6%;pH 值为 5.8左右。)
培养条件:培养温度 (25±5)℃;光照度 1000 ～ 2000 lx;光照时数 14 h/d。
2　试验结果与分析
2.1　从消毒情况可以看出 , 每个阶段所用的消毒时间越长 , 污染率就越低 , 但同时外植体的成活率也
降低 , 而且腋芽萌动迟缓 。每个阶段的最适消毒时间为:
四月下旬 , 0.05%HgCl 7 min+70%乙醇 20秒;五月下旬 , 0.1% HgCl 7 min+70%乙醇 30秒:
七月下旬 , 0.1%HgCl 7 min+70%乙醇 40秒:九月下旬 , 0.1%HgCl 7 min+70%乙醇 20秒 。看来在
所研究阶段中 , 外植体最适消毒时间差别不大 , 这一点与一般随着外植体生长老化所需的消毒时间也应
增加的规律略有不同 。
2.2　接种 1周后观察 , 5月 25日接种的雪柳 , 由于外植体采前已带有较大腋芽 , 所以一周后在培养基
(2)、 (3)、 (4)中腋芽已开始萌动 , 而其余的要在 10 ～ 15 d后才开始萌动 。接种三周后观察:活了的
外植体大部分都萌发出腋芽 , (2)中最多 , (5)、 (6)最差 , 其余次之 , 而且 (7)中有少量绿色愈伤组
织产生。其中 5月 25日接种的雪柳腋芽已明显生长约 0.4 cm 。50天后 , 最长的腋芽已经长至 1 cm多 。
将长度超过 0.5 cm 的腋芽切下 , 移至新的相同的培养基上 。大约两周后 , 继代的植株又萌发出新的腋
芽。如此继代至一定阶段转入生根培养基 (8)进行生根培养 (如图 1)。经观察 , 其基本培养基以 B5
为好 , GS 、 MS次之.激素组合以 BA0.5 mg/L +NAA0.01 mg/L 诱导腋芽效果明显 。
2.3　从试验结果可以看出 , 即使用相同的激素组合 , 所用基本培养基不同 , 其腋芽的生长分化情况也
是不同的 。如培养基 (1)与 (7)中激素组合相同 , (7)中产生了愈伤组织 , 而且将该愈伤组织在 (7)
中继代 , 很快就会膨大 、 较松软 (如图 2)。而培养基 (1)中则无此现象。
图 1　继代过程中已出现根原基的雪柳幼苗
Fig.1　Seedling o f Fontaresia fortunei with the
root primordia
图 2　在雪柳的组织培养过程中产生的愈伤组织
Fig.2　Callus of Fontaresia fo rtunei during the
course of culturing
2.4　新生长的腋芽要长至一定长度才能继代 , 否则不易成活。
2.5　由于茎尖组织比较嫩 , 所以消毒时最好将茎尖与茎段分开 。
2932003　　　　　　　　　　　　　　　　　　李　洁:雪柳的组织培养初探
3　讨　　论
3.1　大多有关资料认为:高浓度的细胞分裂素与低浓度的生长素配比 , 有利于芽的分化 。但在本试验
中则是以较低浓度的 6-BA (0.05 mg/L)和低浓度的 NAA (0.01 mg/L)诱导腋芽效果较好。推测这
可能与所用基本培养基不同有关 , 也可能是外植体内有一定的内源激素。
3.2　转入生根培养基 (8)后 , 根原基出现的较晚 , 生根状况不太好 , 尚待深入研究。考虑可用试管外
生根法进行生根 。
参　考　文　献
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膨润土作为饲料添加剂不仅可使畜禽生长发育健康 , 产蛋率 、 体重增长 , 并可获得明显的经济效
益。膨润土对土壤中难溶性磷的释放机制 , 对土壤中钾的释放机制 , 膨润土对铵的吸附性等 , 都是今后
对膨润土研究应考虑的问题。这些问题的研究对膨润土的农用推广有着十分重要的意义 。
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快开发利用 , 一定能促进山西农业的发展 , 取得良好的社会效益和经济效益。
参　考　文　献
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