全 文 ：收稿日期:2010-12-20
修回日期:2011-01-15
作者简介:杨 辉(1955-),男 ,高级工程师 ,主要从事分析测试研究与
管理工作。
＊广西科学基金应用基础研究专项(桂科基 0832024), 广西创新能力
建设项目(08-05-01-D)资助。
＊＊通讯作者。
广西科学 GuangxiSciences2011, 18(1):52 ～ 55
1, 8-桉叶素型互叶白千层精油的质量标准研究＊
StudyontheQualityStandardofEssentialOilof1, 8-cin-
eoleRichMelaleucaalternifolia
杨 辉1 ,刘布鸣 2＊＊ ,韦 刚 1 ,林 霄2 ,柴 玲 2 ,莫建光1 ,白懋嘉 3
YANGHui1 , LIUBu-ming2＊＊ , WEIGang1 , LINXiao2 , CHAILin2 , MOJian-guang1 BAI
Mao-jia3
(1.广西分析测试研究中心 ,广西南宁 530022;2.广西中医药研究院 ,广西南宁 530022;3.南
宁万家辉香料有限公司 ,广西南宁 530022)
(1.GuangxiResearchCenterofAnalysisandTesting, Nanning, Guangxi, 530022, China;2.GuangxiIn-
stituteofChineseTraditionalMedicalandPharmaceuticalScience, Nanning, Guangxi, 530022, China;
3.WanJiaHuiSpicesCo., LTD, Nanning, Guangxi, 530022 , China)
摘要:用水蒸气蒸馏法提取 1, 8-桉叶素型互叶白千层精油 , 通过薄层色谱法对其进行定性鉴别 ,并采用气相色谱
测定不同产地精油中的主要成分。结合茶树油标准 , 提出 1, 8-桉叶素型互叶白千层精油的质量标准的建议 ,为
1, 8-桉叶素型互叶白千层精油的开发 、研究提供参考依据。
关键词:精油 互叶白千层 1, 8-桉叶素型 气相色谱法 化学成分 质量标准
中图法分类号:O629.6 文献标识码:A 文章编号:1005-9164(2011)01-0052-04
Abstract:Theessentialoilof1, 8-cineolerichMelaleucaalternifoliawasextractedfromMelaleuca
alternifolialeavesbysteamdistilation.TheTLCmethodwasadoptedtoanalyzeandidentifytheoil
andGC-FIDwasusedtodeterminetherelativecontentofmaincomponentsintheoil.Comparingwith
thestandardofteatreeoil, wegavethequalitystandardproposaloftheoilof1 , 8-cineolerich
Melaleucaalternifolia, whichprovidedreferencesforthedevelopmentandresearchoftheoilof1, 8-
cineolerichMelaleucaalternifolia.
Keywords:oil, Melaleucaalternifolia, 1, 8-cineolerich, GC, chemicalconstituents, qualitystandard
互叶白千层(Melaleucaalternifolia)是桃金娘
科(Myrtaceae)白千层属灌木树种 ,原产于澳大利亚
的新南威尔士州和新西兰的部分地区[ 1] , 20世纪 90
年代 ,我国广东 、广西 、海南 、福建 、云南等地成功引
种 ,并形成一定的种植规模 ,广西南部各地均有种植 ,
资源十分丰富 ,其新鲜枝叶经水蒸汽蒸馏后得到的精
油是极具价值和发展潜力的纯天然植物精油 ,具有良
好的广谱杀菌抑菌保健作用 ,是优良天然芳香剂 、抗
菌剂 、防腐剂 ,主要用于日化 、制药 、食品等行业 。白
千层根据精油化学成分含量不同分为六种类型 [ 2] :
松油醇-4型(通称茶树油 TeaTreeOil)、1 , 8-桉叶素
型 、异松油烯型及三者的中间型 。国内引进的主要有
3种[ 3] :松油醇-4型 、1, 8-桉叶素型以及二者的中间
型 ,前二者有较高的经济利用价值 ,中间型则由于成
分含量相对分散 ,利用价值不高 。目前国际上主要应
用互叶白千层精油中的松油醇-4成分 ,国际国内市
场以松油醇-4型茶树油为主 ,自 1996年国际标准化
组织颁布茶树油(TeaTreeOil)标准 [ 4]之后 ,国内相
继制订了互叶白千层精油 ,松油醇-4型(茶树油)广
东省地方标准 [ 5] 及国家行业标准 (QB/T4002-
2010)[ 6] 。白千层植物品种的不同其精油产品主要
成分含量相差很大 ,广西种植的互叶白千层 ,其精油
中多以 1, 8-桉叶素型为主。目前国内外对 1 , 8-桉叶
素型白千层精油的标准研究报道较少 ,本文对 1, 8-
桉叶素型白千层精油进行研究 ,建立分析测定方法 ,
52 GuangxiSciences, Vol.18 No.1, February2011
DOI :10.13656/j.cnki.gxkx.2011.01.006
通过对不同产地 1, 8-桉叶素型互叶白千层精油进行
分析研究 ,确定精油的相关技术指标 ,建立 1, 8-桉叶
油型白千层精油的质量标准 ,为互叶白千层的综合利
用及提高经济价值提供科学依据。
1 实验部分
1.1 仪器和试药
挥发油提取器(购自南宁市精密仪器仪表有限
公司),安捷伦 7890A气相色谱仪 (美国 Angilent公
司), HP-INNOWax(30m×0.32mm×0.5μm)毛细管
色谱柱(美国 Angilent公司)。
互叶白千层枝叶 6批 ,采自广西的邕宁 、兴业 、玉
林 、钦州 、南晓 、南宁 ,得油率分别为 1.6%、 2.0%、
1.7%、1.8%、1.9%、2.2%。甲苯 ,乙酸乙酯 ,无水硫
酸钠均为分析纯 。
1.2 方法与结果
1.2.1 样品制备
将不同产地的新鲜互叶白千层枝叶粉碎成碎片
状 ,分别置于 5000 ml的圆底烧瓶中 ,加水适量 , 按
《中华人民共和国药典 》2005年版一部附录 Ⅹ D中挥
发油测定法甲法水蒸气蒸馏法 [ 7] ,经水蒸气蒸馏 5 h
并用无水硫酸钠脱水得到淡黄色 、有特殊芳香气味的
澄清液体即为 1, 8-桉叶油型白千层精油。
1.2.2 薄层色谱鉴别
取上述 1, 8-桉叶素型互叶白千层精油适量置于
1 ml容量瓶中 ,用乙酸乙酯稀释至刻度 ,混匀即得供
试品溶液 ,按照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一
部附录 Ⅵ B)试验 [ 7] ,用毛细管分别吸取上述溶液适
量点于同一含羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G薄
层板上 ,以甲苯 -乙酸乙酯(9.5∶0.5)为展开剂 ,展
开 ,取出晾干 ,喷以 2 %香草醛硫酸溶液 ,烘干至显
色 。薄层色谱结果(图 1)表明 ,不同产地互叶白千层
油中主要成分基本相同。
1.2.3 主成分定性鉴别
运用气质联用分析并参考相关文献 [ 8] ,结合对
照品的气相色谱图进行比对 ,鉴别出 1 , 8-桉叶素型
互叶白千层油的主要成分为 α-蒎烯 、 β -蒎烯 、月桂
烯 、 α-松油烯 、柠檬烯 、1, 8桉叶素 、对伞花烃 、 γ-松
油烯 、异松油烯 、松油醇-4、 α-松油醇 ,含量占总峰面
积的 95%以上 , GC色谱图见图 2。
1.2.4 气相色谱定量分析
1.2.4.1 色谱条件
HP-INNOWax石英毛细管色谱柱(30 m×0.32
mm×0.50 μm), 检 测器 FID, 高 纯氮气 (>
99.99%),分流比 1 /60, 流速 0.5 ml/min, 进样量
0.2μl,进样口温度 250 ℃,检测器温度 250 ℃,柱温
程序升温 ,升温程序:初温 90 ℃,以 10 ℃/min升至
180 ℃(保持 10 min),最后以 10 ℃/min升至 230℃
(保持 5min)。特征色谱图见图 2。
图 1 薄层层析结果
Fig.1 TLCresult
1.邕宁 , 2.兴业 , 3.玉林 , 4.钦州 , 5.南晓 , 6.南宁 , 7.1, 8-
桉叶素对照品 , 8.4-松油醇对照品。
1.Yongnin, 2.Xingye, 3.Yulin, 4.Qinzhou, 5.Nanxiao, 6.
Nanning, 7.1, 8-cineole, 8.terpinen-4-ol.
图 2 1, 8-桉叶素型互叶白千层精油典型气相色谱
Fig.2 Typicalgaschromatogramofessentialoilof1, 8-cin-
eolerichMelaleucaalternifolia
1.α-蒎烯 , 2.β -蒎烯 , 3.月桂烯 , 4.α-松油烯 , 5.柠檬
烯 , 6.1, 8-桉叶素 , 7.对伞花烃 , 8.γ-松油烯 , 9.异松油烯 , 10.
松油醇-4, 11.α-松油醇。
1.α-pinene, 2.β-pinene, 3.myrcene, 4.α-terpinene, 5.limo-
nene, 6.1, 8-cineole, 7.p-cymene, 8.γ-terpinene, 9.terpinolene,
10.terpinen-4-ol, 11.α-terpineol.
1.2.4.2 精密度及稳定性试验
取产自钦州的互叶白千层精油进样 ,获取色谱
图 ,记录其 11个主要成分的相对含量 ,计算 RSD值
均小于 2 %,表明仪器的精密度及稳定性良好。
1.2.4.3 不同产地互叶白千层精油相对含量测定
按照 1.2.4.1色谱条件分析测定不同产地互叶
白千层精油 ,分析各图谱 ,以归一化法测定不同产地
互叶白千层精油主要共有成分相对含量的结果见
表 1。
53广西科学 2011年 2月 第 18卷第 1期
表 1 不同产地互叶白千层精油主要共有成分相对含量测定结果
Table1 Resultofrelativecontentofcommonconstituentsfromdifferentfields
产地Field
共有成分相对含量 Relativecontentofcommonconstituent(%)
α-蒎烯α-pinene α-松油烯α-terpinene 柠檬烯limonene 1, 8-桉叶素1, 8-cineole γ-松油烯γ-terpinene 异松油烯terpinolene 松油醇-4terpinen-4-ol α-松油醇α-terpineol
邕宁Yongnin 13.70 0.17 5.29 37.96 1.14 0.87 8.76 8.01
兴业Xingye 3.42 0.10 7.71 57.43 1.24 0.09 2.11 13.68
玉林Yulin 11.25 0.07 3.88 53.66 10.62 — 4.42 4.06
钦州Qinzhou 4.07 0.09 4.73 59.59 8.96 — 7.97 4.75
南晓Nanxiao 9.47 2.10 5.93 46.07 1.35 3.06 11.40 6.31
南宁Nanning 3.28 0.10 6.18 57.07 7.08 — 8.58 8.08
2 互叶白千层精油技术指标
根据上述广西不同产地互叶白千层精油的研究 ,
可以确定 1, 8-桉叶素型互叶白千层精油的相关技术
指标及代表性和特征性组分含量范围如见表 2和表
3所示。
表 2 1, 8-桉叶素型互叶白千层精油技术指标
Table2 Technicalindexofessentialoilof1, 8-cineolerich
Melaleucaalternifolia
项目
Item
指标
Index
色状
Colorandcharacter
无色至淡黄色澄清液体
Colorlesstopaleyelowtransparentliquid
香气
Fragrance
具有桉叶素型互叶白千层(精)油的特征香
气
Characteristicflavorof1, 8-cineolerich
Melaleucaalternifolia
相对密度
Relativedensity
(20℃/20℃)
0.878 ～ 0.913
折光指数
Refractive
index(20℃)
1.4500～ 1.4860
旋光度
Opticalrotation
(20℃)
+1°～ +15°
溶解(混)度
Solubility(20℃)
1体积试样在 3体积的 85%(V/V)乙醇中
呈澄清溶液
Itshouldbetransparentwhendisolvedin3
timesof85%(V/V)ethanol
1, 8-桉叶素
1, 8-cineole
>35.0%(毛细管柱气相色谱法 capilary
pilargaschromatography)
4-松油醇
Terpinen-4-ol
>2.0%(毛细管柱气相色谱法 capilarypil-
largaschromatography)
表 3 1, 8-桉叶素型互叶白千层(精)油代表性和特征性组分
含量范围
Table3 Contentrangeofcharacteristicconstituentsinthe
oilof1, 8-cineolerichMelaleucaalternifolia
成分Constituent 最低Lowest 最高Highest
α-蒎烯 α-pinene 1 15
α-松油烯 α-terpinene — 8
柠檬烯 Limonene 0.5 10
1, 8-桉叶素 1, 8-cineole 35 —
γ-松油烯 γ-terpinene 1 20
异松油烯 Terpinolene — 5
松油醇-4terpinen-4-ol 2 20
α-松油醇 α-terpineol 1.5 15
3 讨论
(1)薄层色谱鉴别结果显示 ,不同产地互叶白千
层油的色谱带相似 ,斑点位置基本相同 ,表明不同来
源的互叶白千层油的主要成分相同。经多次试验结
果相同 ,薄层色谱的重现性好 ,可以作为互叶白千层
油的定性鉴别方法 。
(2)互叶白千层油中主要共有成分有:α-蒎烯 、β
-蒎烯 、月桂烯 、α-松油烯 、柠檬烯 、1, 8桉叶油素 、γ-松
油烯 、4-松油烯醇 、α-松油醇等 ,共有峰面积占总峰面
积的 95%以上 ,而且色谱行为基本一致 ,这些指标性
成分为建立互叶白千层油的质量标准提供了科学的
参考依据 。
(3)1.8-桉叶素广泛用于食品 、医药 、日用化工等
领域 , 1, 8-桉叶素具有明确的药用价值和一定的消耗
量 ,我国 GB2760-2005中规定用于止咳糖 、人造薄荷
等 ,美国年耗用量约 5700 kg。 1, 8-桉叶素型白千层
54 GuangxiSciences, Vol.18 No.1, February2011
精油 ,主要化学成分为 1, 8-桉叶素 ,其含量最高可到
达 70%,广西有较大面积的 1, 8-桉叶素型白千层品
种种植 ,其得油率略高于松油烯醇-4型白千层品种 ,
开发 1, 8-桉叶素型白千层精油 ,可以满足国内外市
场不同的需求 ,进行互叶白千层精油的质量标准研
究 ,对于充分利用广西互叶白千层资源 ,开发 1 , 8-桉
叶素型互叶白千层精油具有一定的现实意义 。下一
步还可以将不符合松油烯醇-4型茶树油质量标准要
求的产品开发成 1, 8-桉叶素型白千层精油 ,进一步
降低成本 ,以获取最大经济效益 。互叶白千层精油是
一个新兴产业 ,有良好的开发价值和发展潜力 ,加强
互叶白千层精油基础研究和应用研究 ,提高质量标
准 ,开发新产品 ,具有十分重要的意义 。
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究 [ J] .广西植物 , 1995, 15(4):368-370.
(责任编辑:邓大玉)
中国科学家从玉米中提取出抗艾蛋白酶突变体
艾滋病病毒(HIV)存在潜藏机制可以长期潜伏在细胞中而逃逸宿主免疫系统的攻击 ,目前已上市的抗
HIV药物均不能选择性地杀伤感染细胞而根除病毒。核糖体失活蛋白(RIP)具有 RNAN-糖苷酶活性 ,可以阻
遏延长因子 EF-1或 EF-2与核糖体的结合 ,抑制蛋白质的生物合成 ,因此 , RIP具有很高的细胞毒性 ,常常被开
发成为免疫毒素 、抗病毒或抗肿瘤药物。 RIP分为 I型 、I型和 II型 。其中 , II型 RIP以玉米 RIP为代表 ,先
合成无活性的含有一段 25氨基酸的内部失活结构域的前体蛋白(PRO-RIP), PRO-RIP被切除该结构域后才成
为有活性的核糖体失活蛋白。最近中国科学家对玉米 RIP的内部失活结构域进行一系列的结构修饰和改造 ,
获得了对 HIV-1蛋白酶特异识别并激活的玉米 RIP突变体 。经细胞水平实验分析 ,玉米 RIP突变体对未感染
细胞毒性低 ,但是突变体进入 HIV-1感染细胞后则可以被细胞内的 HIV-1蛋白酶识别并切割去除失活结构域
后转变成为活性蛋白 ,从而选择性地杀伤 HIV-1感染细胞。同时 ,增加突变体进入细胞的效率 ,活性蛋白对
HIV-1感染细胞的杀伤力更强。突变体还可以被 HIV-1蛋白酶耐药株的蛋白酶识别并激活 ,对 HIV-1蛋白酶
耐药株感染细胞也有很好的选择杀伤性。该研究成果为研发特异性靶向 HIV感染细胞的新型抗 HIV药物提
供了新思路和新策略 。
(据科学网)
55广西科学 2011年 2月 第 18卷第 1期