全 文 ：试验研究 2012.10
大叶冬青（Ilex latifolia Thunb）系冬青科冬青属
常绿乔木，树干通直，枝叶繁茂，树形优美，酷似广玉
兰。 叶、花、果色相变化丰富，萌动幼芽及新叶呈紫红
色，正常生长叶为青绿色，老叶呈墨绿色；5 月花为黄
色，秋季果实由黄色变为橘红色，挂果期长，具有较
高观赏价值[1]。 大叶冬青又是制作苦丁茶的重要植物
资源。 据研究, 大叶冬青叶内含有多种游离氨基酸、
Vc 、黄酮类、芦丁、杨梅酮、槲皮素等有益的药用成
分，对人体具有多种重要保健功能 [2－5]。 因此，大叶冬
青又是优良的药用保健树。 大叶冬青有很强的生态
适应性，不仅耐低温、耐土壤瘠薄，还有一定的耐盐
碱性和耐干旱能力。 大叶冬青还具有良好的水土保
持功效[6]，该树适应性强，较耐寒，少病虫害，耐荫、萌
蘖性强,生长较快，是适用于城市园林绿化的优良观
赏树种 [1]。 近年新引进开发的绿化新树种，目前还处
于种苗繁育阶段，仅有少量种苗供应市场，尚没有大
规格的苗木供园林应用， 远远满足不了城市建设发
展的迫切需求。 我们主要对大叶冬青的组培进行详
细的研究， 为大叶冬青的工厂化育苗提供一条新的
道路。
1 材料与方法
1.1 试验材料与培养条件
5～6 月份选取健康生长的大叶冬青当年萌发的
带芽枝条，去掉大叶，在自来水下冲洗干净，剪成 2～
3 cm带芽茎段，在超净工作台上，先用 70%的酒精处
理 45 s， 无菌水冲洗 2～3 次， 再用 0.1%升汞消毒
7 min，无菌水冲洗 3～4次，将茎段接种于启动培养基
上。 各培养基均加入白砂糖 30 g/L、琼脂 6.5 g/L、调
pH值 5.8。培养温度（25±1）℃，光照 14 h/d，光照强度
2 000 lx。
1.2 启动培养
启动培养基以 MS 为基本培养基， 附加细胞分
裂素 BA 的浓度为 0.4 mg/L、 0.7 mg/L、 1.0 mg/L、
1.3 mg/L，生长素 NAA 的浓度为 0.2 mg/L，每瓶接种
1 个芽，每处理 20 瓶，重复 3 次，生长 30 d 调查芽的
诱导率。
1.3 增殖培养
将启动培养诱导的芽，接种到以 MS 为基本培养
基， 附加 BA 的浓度为 0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L
和 2.0 mg/L，IBA 的 浓 度 为 0.1 mg/L、0.3 mg/L、
0.5 mg/L。 每瓶接种 5个芽，每处理 20瓶，重复 3次，
生长 30 d后调查增殖系数和平均株高， 筛选最佳增
殖组合。
1.4 生根培养
无菌条件下切取丛生芽中 3 cm左右的壮苗转接
至 1/2MS生根培养基上， 设置 IBA 浓度为 0.5 mg/L、
1.0 mg/L，1.5 mg/L 3 种 浓 度 水 平 ，NAA 浓 度 为
0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.3 mg/L，研究最佳生根激素配比
及浓度。 每处理 20 瓶，每瓶 5 株，重复 3 次，生长
30 d后调查平均每株生根数、平均根长和生根率。
大叶冬青组培快繁技术研究
基金项目：郑州市创新团队子课题：林木种质资源创新及新品种选育（096SYJH17090）。
作者简介：王慧瑜（1972-），女，研究员，研究方向：植物的组织培养技术。 电话：0371-67883836,E-mail：abf1232@163.com
王慧瑜 张晓申 赵海红 李晓青
（河南省郑州市农林科学研究所 郑州 450005）
摘要：以大叶冬青的当年生嫩枝茎段为外植体进行组织快繁试验。 结果表明：大叶冬青的最佳诱导
培养基为 MS +BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L，增殖培养基 MS+BA 1.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L，生根
培养基为 1/2MS+IBA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L，生根率达到 98.7%。
关键词：大叶冬青；组织培养；快速繁殖
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2012.10 试验研究
2 结果与分析
2.1 启动培养
不同培养基对大叶冬青启动培养的影响 （见表
1），在大叶冬青启动培养中，保持生长素 NAA 不变，
不同浓度的细胞分裂素 BA 对芽的启动影响较大，
BA 浓度为 0.7 mg/L 与 1.3 mg/L 的成芽率差异不显
著； BA为 1.0 mg/L 时，成芽率最高，并与其他浓度差
异显著。 因此， 大叶冬青启动培养的最佳培养基为
MS+ BA 1.0 mg/L+ NAA 0.2 mg/L， 诱导率平均为
72.5%。
2.2 不同浓度 BA与 IBA 对大叶冬青增殖系数和生
长量的影响
不同浓度激素组合对大叶冬青增殖情况 （见表
2）， 增殖倍数和平均芽高在 BA 浓度为 1.5 mg/L 和
IBA浓度为 0.5 mg/L组合与其他浓度组合差异显著，
在 IBA浓度不变情况下，增殖倍数随 BA浓度的增高
先升高后降低， 在 BA为 1.5 mg/L 时增殖倍数最高。
MS+BA 1.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L 作为增殖培养基效果
最佳。
2.3 不同浓度 IBA 和 NAA 对大叶冬青试管苗生根
的影响
当丛生芽长到 2.5 cm 左右时， 可以接入生根培
养基中， 从表 3 可看出， 平均生根数和平均生根率
1/2MS+IBA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L 与其他组合差异
显著；平均根长 2.6 cm 与 2.3 cm 差异不显著，但以
2.6 cm 较好。 综合考虑， 选 1/2MS+IBA 1.0 mg/L+
NAA 0.3 mg/L 培养基作为大叶冬青生根的最佳培养
基。
3 小结
通过试验对大叶冬青当年生茎段进行组培快繁
技术研究，大叶冬青在 MS 基本培养基附加不同浓度
BA 与 NAA 激素配比下 ， 启动诱导率平均可达
72.5%， 增殖系数最高为 4.2， 生根培养基为 1/2MS+
BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L，生根率达到 98.7%。
参考文献
[1]曹健康,方乐金.大叶冬青资源的开发利用与发展前景 [J].资
源开发与市场，2008,24（2）:157-159.
[2]文永新,陈秀珍,金静兰,等.苦丁茶化学成分的研究[J].广西植
物,1990,10（4）:364-368.
[3]刘祖生,徐月荣,梁月荣,等 .苦丁茶化学成分的研究-黄酮类
化合物的 HPLC 分离鉴定 [J]. 浙江农业大学学报 ,1992,18
（5）:66-69.
[4]刘祖生,梁月荣,徐月荣,等 .苦丁茶化学成分的研究-游离氨
基酸分析[J].浙江农业大学学报,1991,17（1）:71-74.
[5]郁建平 .贵州苦丁茶植物资源及化学成分分析 [J].植物资源
与环境,1997,6（2）:22-251.
[6]张正海,方向京,孟广涛,等.苦丁茶水土保持功能与经济效益
分析[J].水土保持研究,2006,13（6）∶215-217.
表 1 不同培养基对大叶冬青启动培养的影响
组合号 BA（mg/L） NAA（mg/L） 成芽率（%）
1 0.4 0.2 23.4c
2 0.7 0.2 46.8b
3 1.0 0.2 72.5a
4 1.3 0.2 47.6b
注：表中同列不同小写字母表示 5%差异显著。 下同。
表 2 不同浓度 BA 与 IBA 组合对大叶冬青增殖的影响
处理 BA（mg/L） IBA（mg/L） 增殖系数 平均株高（cm）
1 0.5 0.1 1.7f 2.4g
2 0.5 0.3 2.3de 2.7f
3 0.5 0.5 2.4d 3.1de
4 1.0 0.1 2.3de 2.3g
5 1.0 0.3 3.1bc 3.1de
6 1.0 0.5 3.3bc 3.7c
7 1.5 0.1 2.8cd 2.8f
8 1.5 0.3 3.6b 3.5cd
9 1.5 0.5 4.2a 4.6a
10 2.0 0.1 2.8cd 2.7f
11 2.0 0.3 3.2bc 3.2de
12 2.0 0.5 3.5bc 4.3ab
表 3 不同浓度 IBA 和 NAA 对大叶冬青试管苗生根的影响
IBA
（mg/L）
NAA
（mg/L）
平均生
根数（条）
生根率
（%）
平均根长
（cm）
0.5 0.1 1.4f 38.5g 1.1e
0.5 0.2 1.8e 58.4f 1.3de
0.5 0.3 2.2de 63.6e 1.5cde
1.0 0.1 2.1de 37.8g 1.6cd
1.0 0.2 2.4cd 74.3d 1.8c
1.0 0.3 3.7a 98.7a 2.6a
1.5 0.1 3.1b 95.3b 2.3ab
1.5 0.2 2.7c 94.7b 1.9bc
1.5 0.3 3.2b 92.8c 1.8c
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