全 文 ：地锦草槲皮素提取工艺研究
周玉平 ,吴玉娣＊ ,张纪兴 (广东药学院 药科学院 ,广东 广州 510006)
摘要:目的 对地锦草的提取工艺进行研究。方法 采用正交试验法 , 以槲皮素的含量为考察指标进行试验。结果 用地锦草重
量 10倍量的体积分数为 75%的乙醇作为提取溶剂 ,提取 2h,共提取 3次为最佳方案。结论 提取方法操作简单 、方便 ,为地锦
草槲皮素提取工艺的进一步研究提供了依据。
关键词:地锦草;槲皮素;提取工艺;正交试验
中图分类号:R284.1　文献标识码:A　文章编号:1006-8783(2008)01-0028-02
OptimizedextractionconditionsfortriterpeneacidsofHerbaeuphorbiaeHumifusaebyorthogonaltest
ZHOUYu-ping, WUYu-di, ZHANGJi-xing
(DepartmentofPharmacy, GuangdongColegeofPharmacy, Guangzhou, Guangdong510006, China)
Abstract:ObjectiveOptimumextractiontechnologyoftriterpeneacidsofmedicineHerbaeuphorbiaeHumifusaewasstudiedwith
orthogonaltest.MethodTheexperimentdesignoftriterpeneacidsofherbaeuphorbiaehumifusaewasmadeusingorthogonalfromL9
(34).Thefourfactors, thedataofalcoholconcentration, extractivetime;addingsolventvolumeandextractivetimeswereselected, and
thethreelevelsfromeachofthefourfactorswerechosen.ResultsTheexperimentresultsshowedthatoptimumextractivetechnologyof
coarsepowderofherbaeuphorbiaehumifusaeaddingten-timevolumeof75% ethanolandthenrefluxextractingfor2.0handextracting
3 timeswasthebest.ConclusionThemethodissimple, convenient, andthisextractionprocedureishelpfulforfurtherstudyof
extractiontechnologyoftriterpeneacidsofHerbaeuphorbiaeHumifusae.
Keywords:HerbaeuphorbiaeHumifusae;triterpeneacids;extractivetechnology;orthogonaltest
＊广东药学院 2007届本科毕业生
作者简介:周玉平 ,女 , 大学本科 , 助理实验师 ,从事化学教学
工作。
　　地锦草 HerbaeuphorbiaeHumifusae为大戟科双
子叶一年生草本植物 ,全草入药 ,具有凉血止血 、清
热止痢 、通乳汁 、清热解毒 、利湿退黄 、凉血止血等功
效 ,用于治疗痢疾 、外伤出血 、乳汁不足 、肠炎 、咳血 、
便血 、崩漏等症 [ 1] 。地锦草主要含槲角素甙及素 、
山素甙及素 、地锦草素的黄酮类化合物 [ 2] ,药理研
究证实槲皮素 、山柰素等黄酮类化合物是地锦草抗
菌 、止血 、抗氧化的主要有效成分 ,地锦草煎剂 、醇提
取液及地锦草素均有抗菌止血等作用 [ 3] 。为研究
地锦草的有效成分 ,探索地锦草槲皮素提取的最适
条件 ,本文以槲皮素为考察指标 ,采用正交试验方法
对地锦草槲皮素提取工艺进行了研究 。
1　仪器与试药
高效液相色谱仪:LC-10Avp紫外检测器 , LC-
10ATvp泵(日本岛津公司);FA1104N型电子分析
天平(上海精密科学仪器有限公司);数显恒温水浴
锅(金坛富华仪器有限公司);GZX-9240MBE型电
热恒温鼓风干燥箱(上海博迅实业有限公司医疗设
备厂)。
槲皮素对照品(008129304,中国药品生物制品
检定所);地锦草 ,为 HerbaeuphorbiaeHumifusae的
干燥全草;乙腈为色谱纯 ,水为重蒸馏水 ,其余试剂
均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　正交试验设计
依据对地锦草醇提工艺的预实验情况及槲皮素
的理化性质 [ 4] ,确定以提取溶剂乙醇的体积分数 、
提取时间 、提取溶剂乙醇用量以及提取的次数为考
察因素 ,每个因素设立 3个水平(见表 1)。采用 L9
(34)正交试验设计表 ,以地锦草提取物中槲皮素的
含量为考察指标进行试验。
2.2　样品溶液的制备
取地锦草药材粗粉精密称取 9份 ,每份 5.0 g,
按 L9(34)组合试验条件进行加热回流提取 ,合并滤
液 ,备用。
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第 24卷第 1期 广　东　药　学　院　学　报 Vol.24 No.1
2008年 2月 JOURNALOFGUANGDONGCOLLEGEOFPHARMACY Feb.2008
2.3　槲皮素的含量测定方法
表 1　正交试验因素水平表
Tab.1　Factorsandlevels
水
平
因素
A
乙醇体积分数 /%
B
提取时间 /h
C
溶剂用量 /倍
D
提取次数 /次
1 60 1 6 1
2 75 1.5 8 2
3 90 2 10 3
2.3.1 　色谱条件　岛津 ODS色谱柱(4.6 mm ×
150mm, 5 μm);流动相:乙腈-20.4 %磷酸(体积比
40∶60),流速 1.0mL· min-1 ,检测波长 370nm。
2.3.2 　对照品溶液制备　精密称定槲皮素对照品
适量 ,加甲醇溶解 ,制成每 1 mL含 0.1 mg槲皮素
的对照品贮备液 。精密吸取 1mL贮备液 ,置 10 mL
容量瓶中 ,加甲醇定容至刻度 ,即为对照品溶液 。
2.3.3　标准曲线的绘制　取对照品溶液分别进样
3、6、9、12、15、18 μL,测定峰面积 ,以峰面积积分值
为纵坐标 ,槲皮素进样量为横坐标绘制标准曲线 ,得
回归方程为:Y=3815.96X-5.61, r=0.9996。槲皮
素的质量浓度在 0.03 ～ 0.18 μg/mL范围内具有良
好的线性关系[ 5] 。
2.3.4　样品测定　取上述按 L9(34)组合试验条件
进行试验所制备的样品液 ,过滤 ,取滤液用高效液相
法进行测定 ,并计算各种提取条件下槲皮素的含
量 [ 6] 。
2.4　试验结果
地锦草药材粗粉按 L9(34)组合试验条件进行
提取处理 ,其正交试验设计及结果分析见表 2。
表 2　正交试验设计及结果分析
Tab.2　Orthogonaltestandresults
NO A B C D w(槲皮素)/%
1 1 1 1 1 0.000 3
2 1 2 2 2 0.001 8
3 1 3 3 3 0.118 0
4 2 1 2 3 0.090 0
5 2 2 3 1 0.139 8
6 2 3 1 2 0.101 0
7 3 1 3 2 0.093 0
8 3 2 1 3 0.094 0
9 3 3 2 1 0.073 4
K
1 0.120 1 0.183 3 0.195 3 0.213 5
K2 0.330 8 0.235 6 0.165 2 0.195 8
K3 0.260 4 0.292 4 0.350 8 0.302 0
Rj 0.070 2 0.036 4 0.061 9 0.035 4
　　对正交设计试验结果进行分析 ,结果表明:提取
溶剂乙醇的浓度体积分数和提取溶剂用量对比提取
时间以及提取的次数对试验结果的影响要大一些 ,影
响地锦草提取物中槲皮素含量提取水平的次序由大
到小的排列依次为:A2﹥ C3﹥ B3﹥ D3 ,即以地锦草
重量 10倍量的体积分数为 75%的乙醇为溶剂 ,每次
提取 2h,提取 3次为最佳提取工艺。
3　讨 论
地锦草中含有水溶性有效成分和脂溶性有效成
分 ,槲皮素属黄酮类为脂溶性有效成分 ,用乙醇作为
提取剂效果较好[ 7-10] 。从预试验结果可知连续回
流法结果要优于浸渍法 ,这可能是由于浸渍法溶剂
加倍量不足引起的 ,但若增加溶剂量又会提高成本。
此外 ,由于连续回流法内外浓度差大 ,更有利于提
取 ,而浸渍法内外浓度差则很快会达到平衡。另一
方面 ,连续提取法具有减少溶剂消耗 ,提高浸出效
率 ,提取较为安全等优点。故采用连续提取法优选
最佳提取条件较好 。
有关大戟科双子叶一年生草本植物地锦草中有
效成分最佳的提取方法考察研究和优选工艺还有待
于进一步的深入研究和探讨 。
参考文献:
[ 1] 朱英.地锦草的研究进展 [ J] .现代中药研究与实践 ,
2003, 17 (5)∶62.
[ 2] 褚小兰 ,廖万玉 , 楼兰英 ,等.地锦类中草药的药理作用
研究 [ J] .时珍国医国药 , 2001, 12 (3):193.
[ 3] 韩广轩.中药地锦草的研究概况 [ J] .药学实践杂志 ,
2001, 19 (5)∶308.
[ 4] 仲兆金 ,许先栋.茯苓三萜化学成分及其光谱特征研究
进展 [ J] .中国药物化学杂志 , 1997, 7 (1):71.
[ 5] 邢俊波 ,水彩虹 , 刘 云.高效液相色谱法测定地锦草中
槲皮素的含量 [ J] .中国中药杂志 , 2002, 27(10):758 -
760.
[ 6] 孙毓庆.分析化学:下册 [ M] .4版.北京:人民卫生出版
社 , 1996:62.
[ 7] 巴根那 ,赵贤芳 ,白玉霞 , 等.蒙药地锦草总黄酮提取工
艺研究 [ J] .时珍国医国药 , 1999, 10 (4):252.
[ 8] 李宝山 , 乌日娜 , 张昕原 , 等.5种蒙药材清除自由基作
用比较 [ J] .时珍国药研究 , 1997, 8 (4):308.
[ 9] 李苑 ,张敏.中草药中总黄酮化合物提取工艺的研究概
况 [ J] .广东药学 , 1999, 9(2):4-6.
[ 10] 邸铁锁 , 马紫亮 , 原计成.地锦片制备工艺和质量控制
方法的研究 [ J] .实用中西医结合杂志 , 1991, 4 (12):
750.
(收稿日期:2007-12-08;修回日期:2008-02-18)
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第 1期　周玉平 ,地锦草槲皮素提取工艺研究