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田麻益智颗粒对谷氨酸损伤的原代海马神经元的保护作用



全 文 :第 32 卷 第 8 期
2 0 1 4 年 8 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 32 No. 8
Aug. 2 0 1 4





1968


DOI:10. 13193 / j. issn. 1673-7717. 2014. 08. 055
田麻益智颗粒对谷氨酸损伤的原代海马神经元的保护作用
景昊1,李峰2
(1.北京中医药大学,北京 100029;2.沈阳国医肿瘤研究所,辽宁 沈阳 100032)
摘 要:目的:通过观察田麻益智颗粒含药血清对 GLu损伤的胎鼠海马神经元的保护作用,探讨田麻益智颗
粒对脑损伤神经元的保护机制。方法: 取孕 7 d Wistar 大鼠的胎鼠海马,进行体外培养,并对培养的神经干细胞
进行神经元鉴定。部分细胞开始贴壁,贴壁细胞呈圆形结果培养 24 h后,大部分细胞己经贴壁生长:分化 3 d 后
神经元胞体增大,突起延长并出现分枝,形成稀疏的网络,7d 胞体大,突起长,分枝连接成网,相互联系增多细胞
成熟。MTT结果表明,田麻益智颗粒含药血清保护组与 Glu 损伤模型组相比细胞活性明显升高( P < 0. 05) 。平
均值,田麻益智颗粒中剂量组对 Glu损伤的神经元细胞保护作用与尼莫地平组的保护作用接近,优于正常组及模
型组。说明田麻益智颗粒含药血清对 Glu 损伤海马神经元有保护作用。免疫荧光结果半定量分析结果标记
CAMKII的神经元细胞中,统计分析结果表明正常组平均灰度值为 148. 6 ± 9. 88、保护组灰度值 151. 0 ± 12. 37 低
于 Glu损伤组 171. 5 ± 6. 87( P < 0. 05) ,说明保护组中 CAMKII的含量与正常组接近,并且较 Glu 损伤模型组少,
中剂量组田麻益智颗粒对谷氨酸损伤神的海马神经元的有较好的保护作用。
关键词:海马神经元; CAMKII;免疫荧光
中图分类号:R285. 5 文献标志码:A 文章编号:1673-7717( 2014) 08-1968-04
Tian MaYi Zhi Particles to Protect the Primary Hippocampal Neurons of Glutamate Injury
JING Hao1,LI Feng2
(1. Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100029,China;
2. Shenyang Chinese Medicine Tumor Research Institute ,Shenyang 100032,China)
Abstract:Through the observation of Tilia benefits - wisdom granule of drug - containing serum with GLu damage
the protective effects of fetal rat hippocampal neurons,discusses Tilia benefits - wisdom granule of protective mechanism
of brain injury neurons. Methods:Get fetal rat hippocampus of pregnant 7 d Wistar rat for in vitro culture and identification
of cultivation of neural stem cells are neurons. Some cells begin to stick wall,adherent cells showing rounded result after
cultivating 24 h,most cells have already adherent growth. Differentiation 3 d,increase neuronal cell body,protuberant pro-
long and branch to form the sparse network. 7 d cell body larger,spike length,branch connected into a net,contact each
other cells mature and more. Determined by MTT results showed significantly cell activity increased (P < 0. 05)that Tilia
benefits - wisdom granule drug - containing serum protection group compared with Glu injury model group. For the aver-
age,the protective effect in dose group of Tilia benefits - wisdom granule to Glu injuryand neurons cell is close to that of
nim horizon group,is better than that of normal group and model group. That Tilia benefits - wisdom granule drug - contai-
ning serum has its protects on Glu damage hippocampal neurons. Immunofluorescence results mark CAMKII semi - quanti-
tative analysis of neurons,the statistical analysis results show that the average grey value of 148. 6 ± 9. 88 in normal
group;the protection group set of grey value of 151. 0 ± 12. 37 below Glu injury group 171. 5 ± 6. 87 (P < 0. 05) ,sugges-
ting to protect the content of CAMKII,close to the normal group,and relatively less than Glu injury model group,which
discusses Tilia benefits - wisdom granule of protective mechanism of brain injury neurons.
Key words:Hippocampal Neuron ,CAMKII,Immunofluorescence
收稿日期:2014 - 03 - 27
基金项目:北京市自然科学基金项目(7117071) ;北京中医药大学
协同创新建设计划项目(522 /0100604299)
作者简介:景昊(1984 -) ,女(满族) ,辽宁沈阳人,中药师,硕士,研
究方向:中医病证结合的基础研究。
海马是边缘系统的重要组成部分,参与学习、记忆、情
绪反应及植物神经功能等。原代培养的海马神经元对许多
致病因素和化学损害较为敏感,是研究神经元损伤及抗损
伤的理想模型。兴奋性氨基酸含量增高是海马神经元损伤
的原因之一。田麻益智颗粒由天麻、田七、益智仁 3 味中药
组成,以补肾、疏肝、行气活血的方法起到干预记忆力减退
的作用。
1 材料与方法
实验动物均采用新生 24 h 内的 SD 大鼠,由北京维通
利华实验动物中心提供;田麻益智颗粒由北京中医药大学
药学院制剂中心生产。四甲基偶氮唑盐(MTT)、二甲亚砜
(DMSO)、L_多聚赖氨酸、阿糖胞苷为美国 Gibco公司产品;
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胎牛血清为 hyclone公司产品;24 孔 /96 孔板为丹麦 Costar
公司产品;乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒为南京建成生物
工程研究所产品;其他试剂均为国产分析纯。Olympus 倒
置相差显微镜(日本) ,C02培养箱(NAPCO 公司) ,酶联免
疫检测仪(美国 BIO - Tek 公司) ,兔抗大鼠 AchE 抗体(1:
1000)、羊抗兔 IgG(1:200)、ABC及 DAB显色试剂盒(美国
vECTOR公司)。
2 实验动物及分组
2. 1 动物的选择
实验用健康 Sprague - Dawley(SD)同系雄性大鼠(200
± 20)g140 只(备有经筛选不符合条件者) ,八周龄左右。
购自北京维通利华实验动物中心。
2. 2 田麻益智颗粒剂的制备
田麻益智颗粒由益智仁、三七、天麻 3 味中药的颗粒剂
及益智仁颗粒剂购于北京中医药大学药学院。制备:分别
以药物总体积的 8 倍量水浸泡 45 min,煎沸以后改温火煎
1 h,取煎液;继续用药物体积 5 倍量水,先后再煎 2 次;合
并 3 次煎液;滤过,滤液用温火浓缩至药液浓度分别为田麻
益智颗粒 23. 4 g /L(生药量)、益智仁颗粒 14. 1 g /L(生药
量) ,制备成颗粒剂。实验时用双蒸水稀释成不同浓度(益
智仁组低、中、高剂量质量浓度分别为 0. 89、1. 78、3. 56 g·
kg -1·d -1) ,(田麻益智颗粒低、中、高剂量质量浓度分别
为 3. 686、7. 371、14. 74 g·kg -1·d -1) ,依据《中药药理
学》[1]中的方法确定。
2. 3 分组设计
大鼠适应性饲养两天后随机分为 6 组,每组 12 只。各
组大鼠每日灌胃给药 2 mL /次,日 1 次。
A组:正常对照组(只灌喂生理盐水) ;B组:模型组(只
灌喂生理盐水) ;C 组:尼莫地平组(只灌喂尼莫地平) ;D
组:田麻益智颗粒合方高剂量组(只灌喂合方高剂量) ;E
组:田麻益智颗粒合方中剂量组(只灌喂合方中剂量) ;F
组:田麻益智颗粒合方低剂量组(只灌喂合方低剂量) ;G
组:益智仁高剂量组(只灌喂益智仁高剂量) ;H 组:益智仁
中剂量组(只灌喂益智仁中剂量) ;I 组:益智仁低剂量组
(只灌喂益智仁低剂量)。
3 含药血清对谷氨酸损伤的原代培养海马神经元细胞的
保护作用
3. 1 含药血清的制备
将灌胃 7 d 后的 7 组大鼠,水合氯醛麻醉后腹主动脉
取血,3000 r /min,离心 20 min,置备血清然后再取上清液,
以 0. 22 pm微孔滤膜滤过,56 ℃水浴灭活 30 min后冷冻备
用。本实验使用的正常组血清、田麻益智合方血清、益智仁
组血清及尼莫地平组血清均为同种混合鼠血清,短时间内
冻存。
3. 2 海马神经元的原代培养
将新生 24 h内的 SD大鼠用 75%酒精灭菌,冰上断头,
快速完整剥离双侧海马;在解剖液中分成体积为 1 mm3 小
块,放入终浓度为 0. 125%的胰酶消化液中,置于 37 ℃、
5% CO2孵箱中消化 25 min;取出消化好的组织,在接种液
中终止消化,机械吹打、悬浮、筛网过滤,制成密度为 1 ×
106 /mL 的细胞悬液,接种于预先用多聚赖氨酸(0. 01
mg /mL)包被的培养板中,放入 37 ℃、5% CO2的培养箱
内进行培养;24 h 后将接种液全部换为维持液,以后隔
天半换液 1 次,每次更换 50%新鲜培养液。倒置显微镜
下观察到 24 h 后海马神经元开始贴壁,48 h 后完全贴
壁伸展,随着培养时间的延长,细胞伸出较多的轴突和
树突,有的相互连接交织成网状,体外培养的海马神经
元在培养 7 d后发育成熟。
3. 3 MTT微量比色法测定海马神经元存活率
3. 3. 1 神经元鉴定 免疫细胞化学染色海马神经元按上
法培养 7 d后,除去培养液,用 0. 01 mol /L PBS 洗涤 1 次,
加入 40 g /L多聚甲醛,室温下固定 15 min,去除固定液,用
0. 01 mol /L PBS室温下洗涤 10 min,共 3 次。用含 50 mL /L
羊血清、含 1 mL /L Triton X - 100 的 PBS液在 37 ℃条件下
封闭 30 min,去除封闭液。滴加一抗(rabbit anti—ACh
monoclonal antibody,1 ∶ 1 000)。4 ℃放置过夜,PBS 洗。滴
加二抗(goat anti—rabbitIgG,1 ∶ 200) ,室温放置 2 h,PBS
洗。实验中设不加一抗的空白对照组,除以 PBS 代替一抗
外,其余步骤同上。DAB 显色,显微镜下观察免疫细胞化
学染色结果,并随机计数 200 个细胞,镜下观察计算阳性细
胞百分率,神经元纯度为 90%以上。
3. 3. 2 海马神经元谷氨酸损伤模型的建立 海马神经元
培养至第 7 d,按实验分组分别加入正常培养液、取在 96 孔
板中体外培养 7 d 后发育成熟的海马神经元。分成正常
组、模型组、尼莫地平组弃掉各孔中的维持液在各组分别加
100 μL /孔的含药血清放入 37 ℃、5% CO2的培养箱内进行
培养;预保护 24 h 后,分别在模型组和尼莫地平组神经元
在不同浓度的(100、150、200、250 和 300 μmol /L)GLU作用
20 min后,每个浓度一列,无菌 PBS洗净 GLU,换为 DMEM
液 37 ℃、5% CO2的培养箱内进行培养 24 h。
3. 3. 3 MTT法对海马神经元的存活率的测定 吸弃 96 孔
板中培养液,每孔加入 MTT工作液(5 mg /mL)10 μL,继续
培养 4 h,吸弃 MTT 工作液,每孔加入 MTT 裂解液 DMSO
150 μL /孔,待蓝色甲瓒结晶完全溶解后 10 min,用 Bio. Rad
ELISA Reader 酶标仪检测各组细胞的 A570 吸光值,以
A570 代表细胞活力,并以空白对照组作为参照,其细胞生
存率为 100%,其余各组生存率 =(各组吸光值 /正常对照
组吸光值)× 100%。
3. 3. 4 含药血清对 GLU损伤的海马神经元的保护作用测
定 原代培养的海马神经元培养按实验分组分别加入正常
培养液、取在 96 孔板中体外培养 7 d 后发育成熟的海马神
经元。分成正常组、模型组、益智仁低中高组、合方低中高
组、尼莫地平组。弃掉各孔中的维持液在各组分别加 100
μL /孔的含药血清放入 37 ℃、5% CO2的培养箱内进行培
养;预保护 24 h 后,在模型组、益智仁低中高组、合方低中
高组和尼莫地平组的神经元中加入 100 μmol /L 浓度的
GLU作用 20 min后,完全吸出液体,换无菌 D - Hank’s 清
洗 GLU三遍,换为 DMEM 液 37 ℃、5% CO2的培养箱内进
行培养 24 h。用 MTT法对海马神经元的存活率的进行测
定,具体方法同前。
4 免疫荧光法测定含药血清预保护的谷氨酸损伤后海马
神经元中 CAMKII的含量
原代培养大鼠海马神经元,将细胞接种于预先用多聚
赖氨酸处理的盖玻片上,细胞爬片生长,培养程序同前。将
海马神经元培养 7 d后,去除原来的培养基,用 D - Hank’s
洗涤细胞 3 次,每次 5 min。各组换含药血清预保护 24 h,
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谷氨酸损伤组,以 D - Hank’s 液配制 1 mmol /L 谷氨酸 20
~ 22 ℃作用于除正常组外的培养细胞 20 min,撤除谷氨
酸,用 PBS液洗涤细胞 3 次,每次 5 min,将长有细胞的盖玻
片捞至干净的培养皿中,PBS 洗 3 次,加人 40 g /L 多聚甲
醛,4 ℃固定 10 min,去除固定液,用 0. 01 mol /LPBS室温下
洗涤 10 min,共 3 次。进行免疫荧光染色并荧光显微镜下
观察照相。
细胞免疫荧光实验过程中设阴性对照组,一抗用抗体
稀释液 PBS代替,其余步骤相同。观察比较各组免疫组化
阳性细胞的数量和面积,用 Image Pro Plus 6. 0 图像分析软
件行细胞灰度值检测,每张爬片随机取 5 个视野,每个视野
随机取 10 个细胞,取其平均值。
5 观测指标数据的处理
数据以均数 ±标准差(珋x ± s)表示。运用 SPSS 10. 0 软
件,多组间比较采用方差分析(ANOVA)进行统计处理,以
P < 0. 05 为差异存在统计学意义。
6 结 果
6. 1 正常神经元的形态观察
接种后 2 h,部分细胞开始贴壁,贴壁细胞呈圆形,直径
6 ~ 9 μm;4 h后,贴壁细胞渐多,个别细胞开始伸出突起;
24 h后,大部分细胞已贴壁,可见光滑的突起,胞体小,折光
性较暗,周围有光晕,有些细胞发生重聚现象;体外培养 24
h大部分细胞己经贴壁生长,培养至 2 d 突起增多,但神经
元突起的联络较少。第 3 d,神经元胞体增大,突起延长并
出现分枝,形成稀疏的网络,神经元以多极神经元为主,胞
体呈三角形或椭圆形,也有双极神经元;第 5 d,神经元胞体
进一步增大,突起增粗增长,末端分叉明显,已交织成网,胞
体和突起晕光明显,立体感强:第 7 d,神经元胞体呈椭圆形
或三角形,胞体周围光晕明显,神经元生长旺盛,胞体大,突
起长,分枝连接成网,相互联系增多,不能辨别来源。见插
页ⅩⅧ图 1。
6. 2 神经元纯度鉴定
取培养 7 天的海马神经元经 NSE染色后,计数 NSE阳
性细胞数占细胞总数的百分数为 90. 69 ± 4. 1%(n = 5)。
故可认为是纯神经元培养。
6. 3 对 Glu诱导海马神经元保护作用的形态学变化
含药血清继续预保护培养 24 h,Glu 作用于神经细胞
20 min,造成神经元损伤,D - Hank’s 清洗后,显微镜下观
察各组细胞形态。发现模型组部分细胞变圆,胞体肿胀,细
胞失去原有形态,突起淡化、减少或消失。细胞内、外出现
较多的黑色颗粒,贴壁不牢,见插页ⅩⅧ图 2。尼莫地平组、
田麻益智颗粒保护组与 Glu 损伤模型组相比,神经元的胞
体较完整,大部分细胞的存在少量的突起。细胞突起存在
少量的联系,突起的数量较正常组减少。
6. 4 MTT法检测各组海马神经元活性
田麻益智颗粒对 Glu 损伤的海马神经元活性 MTT 法
检测各组海马神经元活性均值,见插页ⅩⅨ图 3。结果显示,
与正常组相比,Glu损伤后细胞活性显著下降(P < 0. 001) ;
田麻益智颗粒保护组与 Glu损伤组相比细胞活性明显升高
(P < 0. 05)。平均值,田麻益智颗粒中剂量组对 Glu 损伤
的神经元细胞保护作用与尼莫地平组的保护作用接近,优
于正常组及模型组。说明田麻益智颗粒保护组对 Glu损伤
海马神经元有保护作用。
6. 5 免疫细胞荧光染色结果镜下结果
可见荧光染色神经元细胞,免疫荧光阴性对照组未见
荧光。阳性神经元呈现三角形、椭圆形或圆形,突起明显。
阳性反应物主要分布在细胞胞浆中,细胞核及突起着色较
淡。PI标记的细胞核成红色,插页ⅩⅨ图 4。
在 CAMKII标记的细胞中:正常组荧光颜色较浅,尼莫
地平组、田麻益智颗粒组相比较荧光较接近,Glu 损伤组细
胞明显加深,插页ⅩⅨ图 5。
6. 6 对免疫荧光结果进行半定量分析
结果发现在标记 CAMKII 的神经元细胞中,正常组细
胞的平均灰度值为(148. 6 ± 9. 88) ,Glu损伤组细胞的平均
灰度值为 171. 5 ± 6. 87,田麻益智颗粒保护组平均灰度值
为(151. 0 ± 12. 37) ,尼莫地平组平均灰度值为(153. 0 ±
12. 37)。统计分析结果表明正常组灰度值低于 Glu损伤组
(P < 0. 01) ,保护组灰度值低于 Glu 损伤组(P < 0. 05) ,正
常组、田麻益智组、尼莫地平组灰度值较接近,无统计学差
异(P > 0. 05) ,说明保护组中 CAMKII 的含量与正常组接
近,并且较 Glu损伤模型组少。
7 讨 论
谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统最重要的兴奋性氨基
酸类神经递。兴奋性毒素一谷氨酸的过度释放在缺血性脑
损伤中占有很重要的地位,它作用于 NMDA 受体,使 Ca2 +
内流增加,造成细胞内 Ca 超载,触发一系列病理反应。神
经细胞内的 Ca聚集可能是缺血后工作记忆障碍的一种因
素。[3]本研究在成功培养原代鼠胚神经细胞的基础上,建
立了谷氨酸损伤模型,并利用中药血清药理学方法,发现田
麻益智颗粒方可显著降低神经细胞凋亡率,提高其存活率,
起到保护神经细胞的作用。
田麻益智颗粒对 GLU损伤的海马神经元有保护作用,
而且对中枢神经系统损伤有较好的修复作用。研究表明该
药物可明显起到对 Glu 损伤的海马神经元起到保护作用;
可显著降低细胞外兴奋性氨基酸神经递质 Glu 的浓度。
Glu是哺乳动物脑内含量最高的兴奋性氨基酸之一。许多
中枢神经系统疾病可引起 Glu 的过度释放,从而产生严重
的神经兴奋毒性,引起神经元损伤或死亡。海马是脑内对
缺血、缺氧最为敏感的部位之一。海马神经元易纯化而且
含有高密度的 Glu受体[4]。原代培养细胞比细胞株更接近
生理状态的生物学特性,选用其探讨药物的作用机制具有
实际意义。因此,本研究选用原代培养大鼠海马神经元,模
拟体内高浓度 Glu 条件,研究田麻益智颗粒对抗 Glu 兴奋
性毒性作用,以探讨田麻益智颗粒保护神经元损伤的可能
机制。本实验结果表明,田麻益智颗粒可以保护 Glu 诱导
的神经元损伤。在细胞培养过程中,田麻益智颗粒保护组
神经元的胞体接近正常培养状态下的细胞形态,细胞贴壁
情况较 Glu损伤组明显改善。同时,MTT结果表明,田麻益
智颗粒保护组细胞活性明显得到提高,降低 Glu 引起的神
经细胞死亡率。
免疫荧光法测定含药血清预保护的谷氨酸损伤后海马
神经元中 CAMKII实验结果讨论。
CaMKⅡ是突触后致密物 (postsynaptic densitied,PSD)的
主要成分,占 PSD组分蛋白总量的 20% ~ 30%。CaMKⅡ是
一种多功能的蛋白激酶,该酶具有 30个磷酸化位点,其磷酸
化状态用于控制酶的活性,参与学习记忆过程的调控。
0791
收稿日期:2014 - 03 - 03
基金项目:湖北省教育厅科学技术研究项目(Q20121215) ;大学生
创新创业训练计划项目(2012347)
作者简介:黄江荣(1977 -) ,男,湖北潜江人,副教授,博士,研究方
向:中医药防治内分泌代谢性疾病研究。
CaMKⅡ的激活对学习记忆、基因表达及神经元的可塑性都
起着重要的作用[5 - 6]。在 LTP过程中,内流的 Ca2 +作为第
二信使触发 CaMKⅡ,引起下游一系列生化反应,包括突触
后膜 AMPA受体的上调。所以,CaMKⅡ可通过不同的信号
转导通路和不同的大脑部位,参与了不同的学习和记忆过
程。其中,Ca2 + - CaM - CaMKⅡ信号途径调控紊乱可能是
神经系统损害的一个重要病理生理基础。神经元受 GLu
损伤后使 Ca2 +内流增加,造成细胞内 Ca 超载,所以 CaMK
Ⅱ含量增加,根据免疫荧光半定量分析。说明田麻益智颗
粒组对较正常组、田麻益智组、尼莫地平组灰度值较接近,
说明保护组中 CAMKII 的含量与正常组接近,并且较 Glu
损伤模型组少。可见田麻益智颗粒对 GLU 损伤的海马神
经元起到保护作用。补肾、活血、疏肝法对记忆减退起到干
预保护作用[7]。
参考文献
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中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 32 No. 8
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1971


DOI:10. 13193 / j. issn. 1673-7717. 2014. 08. 056
温阳化瘀方对糖尿病周围神经病变大鼠神经生长因子、
胰岛生长因子和神经传导速度的影响
付小忍1,李永发1,陈婷1,杜亚明2,李祥华2,黄江荣2
(1.长江大学中西医临床 11101 班,湖北 荆州 434023;2.长江大学医学院,湖北 荆州 434023)
摘 要:目的:探讨温阳化瘀方对糖尿病周围神经病变大鼠 NGF 和 IGF - 1 及神经传导速度的影响。方法:
取 SPF级雄性大鼠,随机分为正常对照组,高脂高糖( 模型) 组,弥可保组,二甲双胍( 降糖) 组,温阳化瘀方( 试
药) 大、中、小剂量组。除正常对照组外,各组大鼠禁食 12 h,按 60 mg /kg剂量尾静脉一次性快速注射链脲佐菌素
( STZ) 制备动物模型,并以高脂高糖饲料,于模型制作当日各给药组大鼠分别 ig给予药物治疗,每日 1 次,连续 12
周,其中降脂组给予立普妥 1. 25 mg·kg -1,降糖组给予二甲双胍 670 mg·kg -1,试药大剂量组给予温阳化瘀方浓
缩液 18 g·kg -1,试药中剂量组给予温阳化瘀方浓缩液12 g·kg -1,试药小剂量组给予温阳化瘀方浓缩液 6 g·
kg -1。正常对照组、模型组给予同样量的生理盐水。每 10 d称量各组动物体重 1 次;给药最后 1 d取血测定空腹
血糖; 取血清采用酶联免疫吸附分析方法测大鼠血清 NGF和 IGF - 1。坐骨神经神经传导速度测定,用刺激电极
法。结果:温阳化瘀方对 DPN大鼠血清 NGF、IGF - 1 有一定调节作用,与模型组比较,大、中、小 3 个剂量组均显
示有非常显著的差异( all P < 0. 01) 。温阳化瘀方对 DPN模型大鼠所致坐骨神经传导速度减慢组有明显的治疗
作用,与模型组比较,小剂量组在前 6 周有显著差异( P < 0. 05) ,但从第 9 周开始有非常显著的差异( P < 0. 01) ;
而大剂量组从第 3 周开始,就显示具有非常显著的差异( P < 0. 01) 。结论:温阳化瘀方能促进 NGF、IGF - 1 的增
长,改善 DPN所致传导速度。显示本方对 DPN有一定治疗作用。
关键词:温阳化瘀方;糖尿病周围神经病变;神经生长因子;神经传导速度
中图分类号:R285. 5 文献标志码:A 文章编号:1673-7717( 2014) 08-1971-03
Effects of Wenyang Huayu Decoction on Nerve Growth Factors,
Insulin Growth Factor - 1 and Motor Nerve Conduction Velocity in
Diabetic Peripheral Neuropathy Rats
FU Xiaoren1,LI Yongfa1,CHEN Ting1,DU Yaming2,LI Xianghua2,HUANG Jiangrong2
(1. Medical School of Yangtze University,Jingzhou 434023,Hubei,China;
2. Medical School of Yangtze University,Jingzhou 434023,Hubei,China)
1791