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分光光度法测定野西瓜苗中总黄酮的含量



全 文 :No.9.2007
野西瓜苗(HibiscustrionumL.),又叫香铃草[1]、小
秋葵、打瓜花[2],锦葵科(Malvaceae)木槿属(HibiscusL.)
一年生草本植物。据新疆中草药记载:野西瓜苗 “味,
甜,性,甘”,具有清热解毒、祛风除湿、止咳、利尿
功能,用于风湿痹痛、感冒咳嗽、腹泻痢疾、还用于
水火烫伤、疮毒[3]。而据宁夏中药志记载,野西瓜苗
同样具有上述功能,除此之外,其种子具有润肺止
咳﹑补肾功能,用于肺痨咳嗽、肾虚头晕、耳鸣耳
聋等[4]。目前对野西瓜苗化学成分研究很少,关于野
西瓜苗黄酮类成分未见报道。因此本文对野西瓜苗
不同部位不同季节黄酮类成分进行提取和测定,以
期对其进一步药理研究和资源的开发利用提供理论
参考依据。
1 材料、试剂与仪器
1.1 材料
野西瓜苗根、茎、叶、果实随机分别于 2006年
6月、7月、8月、9月、10月上旬采自新疆玛纳斯,
在自然条件下干燥粉碎,贮藏于广口瓶备用。
1.2 试剂
芦丁:中国药品生物制品检定所;乙醇、亚硝酸
钠、硝酸铝、氢氧化钠:分析纯。
分光光度法测定野西瓜苗中
总黄酮的含量
胡开峰, 阿不都拉·阿巴斯 *
(新疆大学生命科学与技术学院,乌鲁木齐 830046)
摘要:采用分光光度法测定野西瓜苗中总黄酮的含量,以芦丁为对照品,检测波长为500nm。结果表
明:野西瓜苗叶中总黄酮含量最高,为0.7%~1.98%,以8月份含量最高;平均回收率为97.67%,相对
标准偏差为(RSD)2.62%。此法操作简便、快速、准确,可作为检测野西瓜苗中总黄酮含量的一种方法。
关键词:分光光度法;野西瓜苗;黄酮;含量测定
中图分类号:TS207.3 文献标志码:A 文章编号:1005-9989(2007)09-0221-02
Determinationoftotalflavonein
hibiscustrionumL.byspectrophotometry
HUKai-feng,AbdulaABBAS﹡
(ColegeofLifeScienceandTechnology,XinjiangUniversity,Ulumuqi830046)
Abstract:ToanalyzethetotalcontentofflavonoidsinHibiscustrionumbyspectrophotometry.Rutinwasused
asreferenceandthedetectingwavelengthwas500nm.Thedeterminationresultshows:thetotalcontentof
flavonoidswashighestinleaves,thecontentrangefrom0.7%~1.98%,whichthepeakwasinaugust.The
averagerecoveryofthismethodwas97.67%,andtherelativestandarddeviationwas2.62%.Thisanalysis
methoddevelopwassimple,fast,andaccurate.Itprovidesamethodfordeterminationofthetotalflavonoidsin
Hibiscustrionum.
Keywords:spectrophotometry;Hibiscustrionum;totalflavone;determination
收稿日期:2007-02-15 *通讯作者
作者简介:胡开峰(1980—),男(汉族),硕士研究生,主要从事食品天然产物研究工作。
分析检测
221
DOI:10.13684/j.cnki.spkj.2007.09.074
No.9.2007
1.3 仪器
S24分光光度计,RE-52旋转蒸发器,SHZ-D循环
水式真空泵,LAC164分析天平(精确至 0.0001g),
HH-S型水浴锅。
2 方法与结果
2.1 总黄酮含量测定的方法
利用黄酮类化合物与铝盐反应生成红色络合物,
以芦丁为对照品,采用分光光度法测定野西瓜苗根、
茎、叶、果实中总黄酮的含量。
2.2 最大吸收波长的选择
以乙醇为溶剂,以亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化
钠为显色剂,分别对野西瓜苗根、茎、叶、果实及标
准品芦丁于波长 340~800nm范围内测定吸收曲线,
扫描间隔10nm。结果表明5部分均在500nm处有最
大吸收,故选择500nm为测定波长。
2.3 标准溶液的制备
精确称取 120℃干燥恒质量的芦丁对照品
0.0315g,用 30%乙醇溶解,并完全移入 100mL容量
瓶中定容至刻度线,配成0.315mg/mL芦丁溶液。
2.4 标准曲线的绘制
精密吸取芦丁标准溶液 0、1.0、2.0、3.0、4.0、
5.0、6.0mL于7支25mL容量瓶中,用 30%乙醇补至
12.5mL,加入5%的亚硝酸钠0.7mL,摇匀,放置5min
后加入10%的硝酸铝0.7mL,6min后加入4%氢氧化钠
5mL,混匀,用30%乙醇稀释至刻度,10min后于波长
500nm处比色测定,试剂为空白参比[5]。以吸光度(A)为
纵坐标,溶液浓度(C)为横坐标作图,得回归方程A=
8.31C+0.006,r=0.9983。
2.5 样品溶液的制备
准确称取野西瓜苗不同季节不同的药用部位5g,
置于索氏提取器中,首先用石油醚(30~60沸程)脱脂,
直到样品无颜色为止。然后用正交实验方法得到的
最佳提取条件进行回流提取,条件为 45%乙醇在
60℃下,以料液比 1∶30,回流提取 2h,趁热过滤,
同样方法提取2次,合并滤液。再用旋转蒸发仪浓缩
提取液,直到提取液近干为止,即为所得总黄酮,用
30%乙醇定容 50mL容量瓶中即为总黄酮提取液。
2.6 样品总黄酮含量的测定
精确吸取样品溶液 1mL置于 25mL容量瓶中,
按照标准曲线绘制项下操作,每个样品按照该法平
行测定 5份,取其平均值。测定吸光度(A),代入回
归方程,计算野西瓜苗根、茎、叶、果实中总黄酮的
含量,计算公式如下,结果见表1和图1。
总黄酮含量(%)=[(C×50×25)/(5×1000)]×100
式中:C为根据所测定的溶液的吸光度值,代
入回归方程计算出相应的总黄酮含量。
2.7 稳定性实验
精确称取野西瓜苗茎粉末 5g,按样品制备的方
法放置不同时间测定其吸光度,每隔 20min测定一
次。结果表明,80min内样品的吸光度稳定,RSD为
3.36%。实验结果见表2。
2.8 精密度实验
精密称取野西瓜苗茎粉末 5g,按样品制备的方
法操作,在 500nm处测定,连续测定 5次,以吸光
度值计算RSD为2.59%。结果见表3。
2.9 回收率的测定
采用加样回收法,精密称取 5g已知含量野西瓜
苗茎粉末 5份,分别加入对照品适量,按样品的制
备方法操作,在 500nm处测定吸光度,平均回收率
为97.67%,RSD为2.02%。实验结果见表4。
3 讨论
野西瓜苗不同部位中以叶子总黄酮含量最高,
根、茎、果实次之,含量相差不大。同时,不同时期
野西瓜苗总黄酮含量以 8月最高,7月含量也较高,
6月和9月次之,10月最低,但果实中相反,含量较
高。总体来看,总黄酮含量随着月份增加逐渐升高,
7、8月达到最高,随后又呈现下降趋势,建议入药采
时间/min 0 20 40 60 80 RSD/%
吸光度 0.160 0.158 0.1540.147 0.161 3.36
表2 稳定性实验结果(n=5)
表3 精密度实验结果(n=5)
编号 1 2 3 4 5 RSD/%
吸光度 0.171 0.171 0.180 0.177 0.180 2.59
部位
月份
6月 7月 8月 9月 10月
根 0.32 0.43 0.57 0.48 0.46
茎 0.44 0.51 0.39 0.35 0.36
叶 1.16 1.94 1.98 1.18 0.70
种子 - - - 0.40 0.62
表1 野西瓜苗不同时期不同药用部位总黄酮含量测定结果(n=5)
图1 野西瓜苗不同时期不同部位总黄酮含量结果


样品含
量/mg
对照品加
入量/mg
测的总黄酮
含量/mg
回收
量/mg
回收
率/%
平均回
收率/%
RSD/
%
1 25.5 12.1 37.61 12.11100.08
2 25.5 13.2 38.51 13.01 98.56
3 25.5 11.4 36.71 11.21 98.33 97.672.02
4 25.5 14.0 38.81 13.31 95.10
5 25.5 17.0 41.87 16.37 96.29
表4 回收率实验结果(n=5)
6 7 8 9 10
月份
2
1.5
1
0.5
0


/%



种子
分析检测
222
No.9.2007
摘时期以7月和8月为好。
用分光光度法对野西瓜苗中总黄酮含量的测定,
简便、快速、准确,可作为检测野西瓜苗中总黄酮含
量的一种方法。
参考文献:
[1] 中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴[M].北京:科
学出版社,1983:818
[2] 江苏新医学院.中药大辞典[M].上海:上海科学技术出版
社,1977,2153
[3] 新疆维吾尔自治区革命委员会卫生局.新疆中草药[M].
新疆人民出版社,1975:344
[4] 王妍.野西瓜苗中 Ca及 6种微量元素的含量分析[J].中
国药学杂志,2004,39(11):877-878
[5] 蔡健.黄瓜叶中总黄酮含量的研究[J].食品科学,2005,26
(8):194-197
Applicationofpreservationofkyohograpeusing
naturalbiologicalmaterial
WANGJi-zhi,WANGWei-xiao,GAOLei-hong,LIJing-yin
(ColegeofScience,HebeiUniversityofScience&Technology,Shijiazhuang050018)
Abstract:Preparationanditsmainphysical-chemicalpropertyofcarboxymethylchitosanwerestudiedinthispaper.
Compoundpreservationsforkyohograpeweremadebyusingcarboxymethylchitosanasmainreagentandtea
polyphenolasauxiliaryandtheoptimalproportionwasdetermined.Resultsshowthatthecompoundwith2%
carboxymethylchitosanand0.02%teapolyphenolsappliedtokyohograpepreservationat0℃.After6months,the
stalkofgraperemainedgreenwithoutmildewandthegrapekeptoriginalcolor,fragrant,taste.Thelossrateofwater
isonly2.1%,therateofthreshingis3.8%,theconcentrationofthetitratableacidis0.4%~0.6%,theVCis3~4mg/100gand
reducingsuguarisabout14%~17%.Carboxymethylchitosanandcomefromnatrualorganism,sotheself-made
天然生物制剂在巨峰葡萄贮藏
保鲜中的应用研究
王继芝,王未肖,高磊红,李景引
(河北科技大学理学院分析化学教研室,石家庄 050018)
摘要:研究了天然生物制剂——羧甲基壳聚糖的制备及其主要理化性质,以及运用该制剂进行葡萄贮
藏保鲜技术,确定了巨峰葡萄保鲜最佳方案。研究表明:以浓度 2%的羧甲基壳聚糖为主剂,0.02%
茶多酚为助剂配成的复合保鲜剂应用于葡萄的保鲜,在0℃下保存6个月后,葡萄梗仍为绿色,无霉
变,基本上保持了葡萄的色、香、味;失水率为 2.1%,脱粒率 3.8%,可滴定酸含量保持在 0.4%~
0.6%,Vc含量3~4mg/100g,还原糖含量14%~17%。
关键词:羧甲基壳聚糖;葡萄;可滴定酸;失水率;脱粒率;Vc
中图分类号:TS255.3 文献标志码:A 文章编号:1005-9989(2007)09-0223-03
收稿日期:2007-02-16
基金项目:河北省资助项目。
作者简介:王继芝(1963—),副教授,河北献县人,研究方向为食品保鲜与分析。
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贮运保鲜
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