全 文 :江西林业科技 20 04年第 4期
收稿日期:2003-03-01
基金项目:2003年度江西省林业科学院院长基金资助。
作者简介:戴小英(1971-)女 ,江西临川人 ,助理工程师 ,主要从事植物组培等试验研究工作。
铺地锦组培快速繁殖研究
戴小英1 ,温强1 ,周莉荫2 ,龚斌1 ,杨光耀2 ,江香梅*1
(1.江西省林业科学院 ,江西南昌 330032;2.江西农业大学 ,江西南昌 330045)
摘要:铺地锦的组培快繁及其优化条件的筛选试验结果表明:以基本培养基 MS 诱导外植体 , 在附加激素 6-
BA0.1~ 0.5mg/ L(单位下同)+NAA0.1 的培养基上进行增殖 , 并在1/2MS+NAA0.1的生根培养基上生根为较理想的
组培繁殖条件。
关键词:铺地锦;组织培养;快速繁殖
分类号:Q813.12:S793.9 文献标识码:A 文章编号:1006-2505(2004)04-0022-02
铺地锦(Melastoma dodecandrum Lour)是野牡丹科野牡丹
属植物 , 又称地稔 、山地稔 、地脚稔 、地蒲根 、地樱子 、地枇杷
等[ 1] ,主产于我国南方地区 , 为多年生披散状或匍匐状亚灌
木[ 2] 。它植株低矮 ,能形成平整 、致密的地被层 , 同时叶 、花 、
果终年都呈现变化不定的颜色 , 坛状球型果从结实到成熟呈
现绿—红—紫—黑的颜色变化 ,尤其成熟时果实像黑珍珠般
点缀于绿叶丛中 ,花盛开时花朵铺成一片 ,远望一片粉红;鲜
果可食用 ,亦可酿酒 , 且营养价值颇高;种子所含油中亚油酸
含量高达 84%, 具有降血脂 、预防动脉硬化等功能 。铺地锦
的根及全株均能入药 , 有解毒消肿 、清热燥湿 、祛瘀利湿 、涩
肠止痢 、舒筋止血 、补血安胎之功效 ,捣碎外用可治疮 、痈 、疽
等[ 3 , 4] 。目前该植物以野生为主 , 常规繁殖多采用萌蘖及播
种 ,但大多生长不良 , 尚未形成规模化生产。本研究旨在优
化筛选铺地锦组培条件 ,建立其快繁体系。
1 试验材料
选取健壮野生铺地锦的幼嫩茎段作为外植体。
2 培养条件
1)培养基:①MS;②MS+6-BA0.1-0.5mg/ L(单位下同)
+NAA0.1;③MS+NAA0.05;④MS+NAA0.1;⑤MS+NAA0.2;
⑥1/2MS;⑦1/2MS+NAA0.05;⑧1/ 2MS+NAA0.1;
以上培养基均加糖 30g/L , 卡拉胶 6.5g/ L , pH值 5.6。
2)培养温度:25℃左右。
3)光照条件:光照强度 1500 1x , 光照时间 10h/ d。
3 无菌系的建立及组培条件的优化
3.1 无菌系的建立
将野外采回的铺地锦剪去叶和老枝 , 取幼嫩茎段 , 用柔
毛刷或毛笔在加有适量洗洁精的水液中刷洗外植体表面 , 清
水洗去洗涤剂后流水冲洗 0.5 ~ 1h ,置超净工作台上 ,无菌水
冲洗 2~ 3 次 , 75%酒精灭菌 30s , 再用 0.1%的 HgCl2 浸泡灭
菌 3~ 5min(依外植体老化程度不同而异), 无菌水冲洗 5~ 6
遍后将外植体迅速接入培养基①和②中 , 每瓶接种 1 个外植
体。4 ~ 10d后 , 外植体上即可长出顶芽或腋芽 , 未受污染的
顶芽或腋芽即为试验所获得的无菌材料。
3.2 细胞分裂素浓度对不定芽诱导时间的影响
本试验采用②号培养基的 5种 6-BA 浓度:0.1 , 0.2 , 0.3 ,
0.4和 0.5进行了芽诱导试验 ,并用①号培养基作对照。试验
结果表明 , 6-BA 浓度为 0.5 时 ,诱导 4d 后即从黄绿色的愈伤
组织上长出腋芽 , 6-BA 浓度为 0(即①号培养基)时 ,则需要
10d 左右。可见 6-BA 浓度对不定芽诱导所需时间有较大影
响 , 6-BA浓度越高 ,诱导所需时间越少。
3.3 增殖培养
铺地锦的分化发生方式主要有芽—芽和芽—愈伤—芽
等方式。将所获得的无菌材料继代到②号培养基上进行增
殖培养。试验结果表明 , 5 种 6-BA 浓度的培养基均能使铺
地锦达到快速增殖的目的。但同时也发现 , 在不定芽诱导阶
段由②号培养基诱导的无菌系 , 分化系数大 , 最大可达 8 ~
10。但分化芽弱小 , 叶片和茎杆细小 , 形成有效苗的比例仅
30%左右 ,且靠近培养基基部的叶片易发黄枯烂 , 这种状况
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DOI :10.16259/j.cnki.36-1342/s.2004.04.008
在降低 6-BA浓度后继续继代 10 次以上均无明显改善。反
之 ,以 MS 为诱导培养基建立的无菌系 ,在分化培养过程中叶
片宽大 ,茎干粗壮 , 分化系数3 ~ 4 左右 , 但分化芽产生有效苗
的比例可达 95%以上。说明诱导时 6-BA浓度对铺地锦的
进一步增殖 、分化和生长具有持久的作用效能 。
对本试验所采用的诱导和分化条件进行筛选 , 认为以
MS为诱导培养基建立无菌系 , 在附加 6-BA0.2 和 NAA0.1
的培养基上进行增殖培养 ,是一种较理想的组合条件。
3.4 根的诱导和植株再生
将②号培养基中生长健壮的芽切下转入①、③~ ⑧号生
根培养基上诱导生根 , 以获得完整植株。试验结果表明 , 继
代后 15d左右 , 7 种生根培养基均能诱导铺地锦生根形成完
整植株。但生根率和生根同步性等方面有所不同(各培养基
生根统计情况见表 1)。在不加生长素 NAA 的①号和⑥号培
养基(即 1/2MS)上铺地锦大部分分株能产生完整根系 , 但不
同分株根系生长不同步 ,早的 15d就能长出较完整的根系 , 而
迟的则要 30d 左右 ,还有一部分分株不生根。但相对而言 , ⑥
号培养基的生根率和同步性方面又优于①号培养基。而在
上述两种培养基中添加 0.05 ~ 0.1mg/L浓度的 NAA , 则能较
大幅度地提高生根率 ,其生根同步性也明显提高 , 15~ 20d 内
生根的植株可达 80%以上。从经济 、生长等多方面比较 , 鉴
于⑧号培养基生根率高 ,根系生长整齐 , 同步性强 , 根系量也
多 ,因此 , 选择⑧号作为铺地锦生根较理想的培养基。
表 1 各培养基生根率统计
培 养 基 生 根 率 %
①MS 75
③MS+NAA0.05 82.5
④MS+NAA0.1 85.4
⑤MS+NAA0.2 73.8
⑥1/ 2MS 78.4
⑦1/ 2MS+NAA0.05 93.2
⑧1/ 2MS+NAA0.1 96.3
3.5 组培苗的移栽
在生根培养基中培养 25d 左右后 ,将生根小苗移到大棚炼
苗3 ~ 5d ,取出洗净根部培养基 ,移栽到已消毒的盛有腐殖土
和珍珠岩(3∶1)的营养杯或营养盆中 ,用薄膜保湿 15d 左右后 ,
由早晚时间揭去薄膜, 到白天逐渐减少薄膜覆盖的时间。约
一个月后 ,苗木根系基本扎牢 , 能靠自身根系吸收水分维持正
常生长。
4 研究意义及进展
铺地锦集观赏 、药用 、食用价值于一身 , 是一种具有巨大
潜在开发利用价值的优良园林绿化及药用植物。目前国内
外对该植物的研究主要开展了繁殖技术和有效药用成分的
分离 、提取等探索性研究 , 对它的药用价值与药用机理给予
了高度的关注。但该植物仍处于野生状态 , 尚未有规模培育
的人工资源和技术 , 限于资源的有限性和采集的困难性 , 其
功能尚未得到充分发挥和利用 , 这不能不说是一件憾事。因
此加快铺地锦的驯化栽培及快速繁殖技术研究 , 具有很重要
的意义和广阔的应用前景。本研究对铺地锦组培快繁技术
进行了较为深入的探讨 ,以期获得铺地锦的经济 、快速 、高效
的配套繁殖和栽培技术 ,促进其在医疗保健及现代园林方面
的推广应用。
参考文献:
[ 1] 中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴(第二册)[M] .北京:
科学出版社 , 1972.
[ 2] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(第五十三卷 ,第
一分册)[M] .北京:科学出版社, 1984.
[ 3] 夏汉平 ,刘世忠 ,敖惠修.介绍两种优良的“铺地”植物[ J] .中国园
林 , 2002, (4):78-80.
[ 4] 周添浓.地稔注射液对家兔血液的影响[ J] .广州中医药大学学报 ,
1995 ,(1):40-41.
[ 5] 马国华.林有润 ,简曙光 , 等.野牡丹和地稔的组织培养及植株再
生[ J] .植物生理学通讯, 2000 ,(3):233-234.
Tissue Culture and Rapid Propagation for
Melastoma dodecandrum
DAI Xiaoying1 ,WEN Qiang1 ,ZHOU Liyin2 ,GONG Bin1 ,YANG Guangyao2 ,JIANG Xiangmei1
(1.Jiangxi Academy of Forestry , Nanchang Jiangxi 330032 , China;
2.Jiangxi Agricultural University ,Nanchang Jiangxi 330045 ,China)
Abstract:The test s for the rapid propagation methods and the optimum conditions of Melastoma dodecandrum Lour tissue culture were made.The results demonstrate
that MS for explants inducement , MS+6-BA0.1-0.5mg/ L+NAA0.1mg/ L for reproduction and 1/ 2MS+NAA0.1mg/ L for striking roots are the fine culture
conditions.
Key words:Melastoma dodecandrum;Tissue culture condit ion;Rapid propagation
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