全 文 ：檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
表 3 香青藤肉桂酸苯乙酯含量测定
No． 肉桂酸苯乙酯 /mg·g － 1 No． 肉桂酸苯乙酯 /mg·g － 1
1 1. 002 5
2 0. 951 8
3 0. 670 8
4 0. 629 1
5 0. 693 7
6 0. 776 4
7 0. 976 0
8 0. 897 2
9 0. 702 9
10 0. 955 3
11 0. 744 0
12 0. 880 8
4 月含量较高，11，12 月份较低，与文献报道春、秋 2
季采挖报道一致。肉桂酸苯乙酯含量随采收月份不
规则的变化可能与香青藤为根茎入药，受雨水、温度
等影响较大，具体因素有待进一步研究。
从香青藤药材乙酸乙酯部位分离鉴定了肉桂酸
苯乙酯等 4 个化合物［5］，香青藤为根茎入药，抗炎祛
风湿与其挥发性成分紧密相关，肉桂酸苯乙酯为香
青藤挥发油化学成分之一［4］，作为香青藤不同采收
期的考察指标，可为规范化种植提供参考依据。
由于采集样品均为野生变家种的种植药材，对
其确切的生长年限未进行考查，可考虑规范化种植
后再对香青藤最佳采收期进行深入的研究［6］，并得
出更为准确、可靠的结论。
［参考文献］
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［责任编辑 邹晓翠］
［收稿日期］ 20121119(012)
［基金项目］ 广西高校科学技术研究项目(2013YB287)
［第一作者］ 陈君，硕士，讲师，从事中药、民族药的有效成分与质量标准研究，Tel:13737239915，E-mail:lzyzchenjun @ 163. com
［通讯作者］ * 韦建华，Tel:13977166476，E-mail:Weijianhua607 @ tom． com
HPLC测定地倒地铃中金圣草黄素的含量
陈君1，李耀华2，李晓龙2，韦建华2*
( 1. 广西科技大学，广西 柳州 545006; 2. 广西中医药大学，南宁 530001)
［摘要］ 目的:建立高效液相色谱法测定倒地铃中金圣草黄素含量的方法。方法:高效液相色谱法，GL Inertsil ODS-3 C18
柱(4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，流动相乙腈-0. 1%磷酸(35∶ 65) ，流速 1. 0 mL·min －1，检测波长 348 nm，柱温为常温。结果:金圣
草黄素在 0. 0134 ～ 0. 268 μg内呈良好的线性关系(r = 0. 999 97) ，平均加样回收率为 99. 74%，ＲSD 2. 1%。结论:该方法操作
简便，结果准确，重复性良好，可作为测定倒地铃中金圣草黄素含量的方法。
［关键词］ 倒地铃;金圣草黄素;高效液相色谱法
［中图分类号］ Ｒ284． 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2013)12-0138-03
［doi］ 10． 11653 /syfj2013120138
Determination of Content of Chrysoeriol in
Cardiospermum halicacabum by HPLC
CHEN Jun1，LI Yao-hua2，LI Xiao-long2，WEI Jian-hua2*
(1. Guangxi University of Science and Technology，Liuzhou 545006，China;
·831·
第 19 卷第 12 期
2013 年 6 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 12
Jun．，2013
2. Guangxi University of Traditional Chinese Medicine，Nanning 530001，China)
［Abstract］ Objective:To establish the quantitative analysis method for determination of the content of
chrysoeriol in Cardiospermum halicacabum by HPLC． Method:High perforamce liquid chromatogrphy was
employed using Inertsil ODS-3C18Column (4. 6 mm × 250 mm，5 μm)and mobile phase comprising acetonitrile-
0. 1% phosphoric acid (35∶ 65)at a floe rate of 1. 0 mL·min －1 and detecting wavelength of 348 nm，the column
temperature was room temoerature． Ｒesult:Chrysoeriol was linear in the range of 0. 0134-0. 268 μg (r =0. 999 97)
and the average recovery of chrysoeriol was 99. 74% with ＲSD 2. 1% ． Conclusion:The method is simple，
accurate，reproducible，which can be used for determination of the content of chrysoeriol in C． halicacabum．
［Key words］ Cardiospermum halicacabum;chrysoeriol;HPLC
倒地铃是无患子科植物倒地铃的全草或果实。
主要分布广东、广西、福建、台湾等西南各地，具有清
热利湿，凉血解毒的功效，主治黄疸，淋证，湿疹，疔
疮肿毒，毒蛇咬伤，跌打损伤等症［1-2］。本课题前期
研究表明，倒地铃乙醇总提取物具有良好的降血糖
作用［3］;韦建华等［4］对倒地铃化学成分研究，从中
分离了 11 个化合物，分别鉴定为正二十七烷、β-香
树脂醇棕榈酸酯、β-胡萝卜苷、3β-赤杨醇、β-香树脂
醇、β-谷甾醇、棕榈酸、蒲公英赛醇、豆甾醇、金圣草
黄素、豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷;Liu［5］报道金圣草
黄素能抑制苯并芘的代谢，在质量浓度为 10 mg·
L －1时对苯并芘的代谢及活化为最终致癌的 DNA加
合物存在很高的抑制作用;陈君等［6］对广西不同产
地倒地铃总黄酮的含量进行测定，结果发现柳州倒
地铃中总黄酮的含量最高;但是对倒地铃中的金圣
草黄素含量尚未有文献报道，故对其进行研究，为其
制定相关的质量标准和分析提供参考依据。
1 仪器与试药
Agilent 1100 型高效液相色谱仪(美国安捷伦公
司) ，BP211D 型电子分析天平(德国赛多利斯) ，
KQ5200B型超声波仪器(昆山市超声仪有限公司) ;
LG16-W型高速微量离心机(北京京立离心机厂)。
乙腈(分析纯，国药集团化学试剂有限公司) ，磷酸
(分析纯，国药集团化学试剂有限公司) ，水为超
纯水。
倒地铃于 2010 年 7 － 10 月分别采自广西南宁
市、北海市、柳州市，经广西中医药大学廖月葵高级
实验师鉴定为无患子科植物倒地铃 Cardiospermum
halicacabum L．的全草。金圣草黄素对照品(自制，
纯度 ＞ 98%)。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱为 GL Intertsil ODS-3 C18柱
(4. 6 mm ×250 mm，5 μm) ，流动相乙腈-0. 1%磷酸
(35∶ 65) ，流速 1. 0 mL·min －1，检测波长 348 nm，进
样量 10 μL，柱温为常温。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取金圣草黄素对
照品 3. 35 mg，置于 25 mL棕色量瓶中，加适量色谱
甲醇使其溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得 0. 134 g·
L －1的对照品储备溶液。
2. 3 供试品的制备 取倒地铃粉末约 1 g，精密称
定，置于 50 mL 具塞锥形瓶中，精密加入 70%乙醇
10 mL，称定总质量，超声提取 45 min，放冷至室温，
再称定质量，补足损失的质量，摇匀，滤过，取上清液
于 10 000 r·min －1离心 10 min，备用。
2. 4 标准曲线及线性范围考察 精密吸取金圣草
黄素的对照品溶液(0. 134 g·L －1)0. 1，0. 2，0. 4，
0. 8，1，2 mL分别置于 10 mL量瓶中，色谱甲醇稀释
至刻度，摇匀，进样 10 μL，按照上述的色谱条件测
定峰面积，以对照品进样量为横坐标，测得的峰面积
为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程 Y =
4 421. 6X + 2. 820 5，r = 0. 999 9(n = 6)。结果表明，
金圣草黄素进样量在 0. 0134 ～ 0. 268 μg 含量与峰
面积呈良好的线性关系。
2. 5 精密度试验 精 密 吸 取 对 照 品 溶 液
(0. 134 L·g －1)0. 4 mL 置 10 mL 量瓶中，色谱甲醇
稀释至刻度，摇匀即得。按照相同的色谱条件测定，
进样 10 μL，连续进样 6 次，记录色谱峰面积，结果
ＲSD 0. 96%，表明仪器的精密度良好。
2. 6 稳定性试验 取同一供试品溶液(柳州产
地) ，按供试品溶液制备方法制备 6 份，分别在时间
为 0，2，4，8，12，24 h各进样 1 次，记录色谱峰面积，
结果 ＲSD 0. 73%，表明供试品溶液在 24 h内稳定。
2. 7 重复性试验 取柳州产地的倒地铃粉末，按供
试品溶液制备方法制备 6 份供试品溶液，分别进样，
测定，结果金圣草黄素平均质量分数为0. 022 58
mg·g －1，ＲSD 1. 7%。结果表明该方法重复性良好。
·931·
陈君，等:HPLC法测定地倒地铃中金圣草黄素的含量
2. 8 加样回收率试验 取已知含量的倒地铃(柳
州产地)约 0. 5 g 共 6 份，精密称定，分别精密加入
稀释后的金圣草黄素对照品(0. 001 34 g·L －1)
10 mL，按供试品溶液制备方法制备 6 份供试品溶
液，分别取所制备的溶液 10 μL，按上述色谱条件进
行测定，记录色谱峰面积，并计算回收率。结果金圣
草黄素的平均回收率为 99. 74%，ＲSD2. 1%，测定
结果见表 1。
表 1 金圣草黄素加样回收率测定结果
No．
取样量
/ g
原有量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均
回收率
/%
ＲSD
/%
1 0. 503 2 0. 011 36 0. 013 4 0. 024 59 98. 57
2 0. 500 4 0. 011 30 0. 013 4 0. 025 01 102. 34
3 0. 506 1 0. 011 43 0. 013 4 0. 024 45 97. 17
99. 74 2. 1
4 0. 500 2 0. 011 30 0. 013 4 0. 024 90 101. 46
5 0. 505 6 0. 011 42 0. 013 4 0. 024 90 100. 6
6 0. 503 6 0. 011 37 0. 013 4 0. 024 54 98. 32
2. 9 样品含量测定 取不同批号的倒地铃粉末，分
别按 2. 3 方法制备供试品溶液，每批平行制备 3 份，
分别精密吸取对照品溶液和供试液 10 μL，记录色
谱峰峰面积，计算金圣草黄素的含量，结果见图 1，
表 2。
A．对照品;B. 样品;1．金圣草黄素
图 1 倒地铃药材 HPLC
3 讨论
3. 1 检测波长的选择 对金圣草黄素对照品溶液
进行紫外扫描，结果在 210，348 nm 有 2 个吸收峰。
其中 210 nm处有末端吸收干扰，所以选 348 nm 为
金圣草黄素测定波长。
表 2 不同批号倒地铃金圣草黄素含量考察(n = 3)
批号 No． 含量 /mg·g － 1 平均含量 /mg·g － 1 ＲSD /%
柳州产地 1 0. 023 56 0. 023 53 1. 82
2 0. 023 10
3 0. 023 95
南宁产地 1 0. 074 94 0. 074 50 0. 75
2 0. 074 41
3 0. 075 54
北海产地 1 0. 124 9 0. 125 3 0. 34
2 0. 125 3
3 0. 125 8
3. 2 流动相的选择 采用乙腈-0. 1%磷酸不同比
例洗脱系统，在一定的时间内将它们全部洗脱下来，
适当增加流动相中乙腈的比例，分析时间缩短至
10 min内全部出峰，并具有良好的分离度。结果选
用乙腈-0. 1%磷酸溶液(35∶ 65)时，金圣草黄素成分
的分离效果较好。
3. 3 样品提取条件的优化 对供试品溶液的提取
溶剂(甲醇、70%甲醇、50%甲醇、95%乙醇、70%乙
醇、50%乙醇)及超声提取时间(15，30，45，60 min)
进行了比较研究。结果表明 70%乙醇提取 45 min
所得的含量最高。
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［责任编辑 邹晓翠］
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第 19 卷第 12 期
2013 年 6 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 12
Jun．，2013