全 文 :第33卷 第4期 农 业 科 学 研 究 2012年12月
Vol.33No.4 Journal of Agricultural Sciences Dec.2012
文章编号:1673-0747(2012)04-0031-03
钩腺大戟根中脂溶性成分GC-MS分析
郭生虎1,王敬东1,马洪爱1,郝凤霞2
(宁夏农林科学院 农业生物技术中心,宁夏 银川 750002; 2.宁夏大学 能源化工重点实验室,宁夏 银川 750021)
摘 要:采用冷浸法提取钩腺大戟根中脂溶性成分,利用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术检测其化学成分,共分
离得到30个化学成分,鉴定了其中的28个,占色谱总馏分出峰面积的98.42%.其中不饱和脂肪酸酯类含量最多,
达到71.09%,其次为挥发油,占14.84%,酸类占2.2%;烷烃类占0.44%.结果表明,钩腺大戟根中主要脂溶性成
分为α-亚麻酸甲酯(21.56%)、棕榈酸乙酯(15.20%)、9,12-十八碳二烯酸乙酯(14.00%)、苾澄茄油烯醇(7.84%)
和大香叶烯D-4-醇(7.07%).
关键词:钩腺大戟根;脂溶性成分;GC-MS
中图分类号:R284 文献标志码:A
收稿日期:2012-10-20
基金项目:宁夏自治区科技攻关项目“新型高效植物源杀虫剂的研制与产品开发”
作者简介:郭生虎(1973—),男,宁夏中卫人,硕士,副研究员,主要从事植物资源开发与利用研究.
钩腺大戟 (Euphorbia sieboldiana Morr.et
Decne)为 大 戟 科 (Euphorbiaceae)大 戟 属
(Euphorbia)多年生草本植物,主要分布于宁夏、黑
龙江、吉林、辽宁、河北、湖南等地,宁夏主产于泾源、
西吉、固原及六盘山地区,多生于山坡、草地或路
边[1],其茎、根部富含白色乳汁,其干燥根作狼毒入
药,具有散结、杀虫的功效,民间常用于治疗水肿、破
积逐水、止咳、催吐、杀虫解毒[2].目前对钩腺大戟化
学成分的研究不多,尤其是有关脂肪酸成分研究少
有报道,近年来,大戟属植物作为能源植物受到了极
大的关注,如续随子[3]、麻疯树[4]、绿玉树[5]和蓖
麻[6]等大戟科植物已作为生物柴油的原料被研究和
应用,笔者采用冷浸法、索氏提取及柱层析法提取钩
腺大戟根中的脂溶性成分,利用气相色谱-质谱
(GC-MS)联用技术对钩腺大戟根中脂溶性成分进
行鉴定,旨在为钩腺大戟资源的进一步开发利用提
供参考依据.
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 研究对象 钩腺大戟(Euphorbia sieboldiana
Morr.et Decne),2010年采自宁夏六盘山林区(海拔
1 300m左右),标本保存于宁夏农林科学院农业生
物技术重点实验室,由宁夏大学生命科学院郑国琦
副教授鉴定.取其根,自然风干、粉碎、过40目筛,密
封保存备用.
1.1.2 主要试剂 甲醇,石油醚(沸程30~60℃),
乙酸乙酯,无水硫酸钠均为分析纯,购自西安化学试
剂厂.
1.1.3 主要仪器 GC-MS-QP2010型气相色谱-质
谱联用仪(日本岛津公司)
1.2 方法
1.2.1 脂溶性成分提取 称取钩腺大戟根粉
1.0kg,室温下用甲醇浸泡提取3次,分别为5、3、
2d,合并浸提液,用旋转蒸发仪浓缩制得甲醇浸膏.
将浸膏用硅胶(60~100目)拌样,挥去溶剂后装入
索氏提取器,加入石油醚进行回流提取,得到石油醚
提取物127.6g,将石油醚提取物进行硅胶柱层析
(200~300目),以V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=99∶
1~90∶1梯度洗脱,收集洗脱液,回收溶剂,得到桔黄
色油状物7.83g,得率为1.39%,取油状物5mL,加
少量 MgSO4 干燥、过滤,自然挥发石油醚和乙酸乙
酯后备用.
1.2.2 气相色谱-质谱(GC-MS)联用分析条件
GC条件:色谱柱为 DB-5MS石英毛细管色谱柱
(30m×0.25mm×0.25μm)(日本岛津),载气为高
纯度氦气,柱内载气流量为0.83mL/min,程序升
温,从80℃(8min)升温到200℃;再以3℃/min升
温到280℃,保持5min,进样量为0.1μL.质谱条
件:电离方式为EI离子源,电离电压70eV,接口温
度250℃,离子源温度200℃,溶剂延迟2.5min,扫
描范围 35~450amu.溶剂为环己烷,进样量
0.1μL.
1.2.3 油脂类成分定性、定量分析 用 GC-MS-
QP2010型气相色谱-质谱联用仪进行分析,获得钩
腺大戟脂溶性成分的总离子流图(图1)通过 GC-
MS Solution数据处理系统检索NIST谱库,结合相
关文献进行谱图分析,定性鉴定各个化学成分;依据
总离子流色谱峰的峰面积,按面积归一法进行定量
分析[7],求出各化学成分的相对百分含量.按照上述
试验条件进样,得到钩腺大戟油脂类化合物的总离
子流图(图1).
图1 钩腺大戟脂溶性成分的总离子流
2 结果与讨论
钩腺大戟采用面积归一法计算出各化合物的相
对含量,相应质谱图经计算机检索并结合参考文献,
共分离得到30个化合物,鉴定了28个(表1),占色
谱总馏分出峰面积的98.42%,由表1显示,钩腺大
戟根中的脂溶性成分主要以不饱和脂肪酸酯为主,
达71.09%,其 中 α-亚 麻 酸 甲 酯 含 量 最 高,达
21.56%,其次是棕榈酸乙酯达15.20%,挥发油占
14.84%,还有少量的烷烃类和烷酸类化合物.
表1 钩腺大戟根中脂溶性成分
峰号 保留时间/min 化合物名称 相对分子量 分子式 相似度 含量/%
1 4.001 临二甲苯 106 C8H10 93 1.25
2 4.121 百里香酚 150 C10H14O 94 3.11
3 4.466 对二甲苯 106 C8H10 93 1.44
4 14.074 反式石竹烯 204 C15H24 92 0.62
5 14.968 邻苯二甲酸二甲酯 194 C10H10O4 93 1.55
6 17.452 邻苯二甲酸二乙酯 222 C12H14O4 90 3.37
7 17.710 α-杜松醇alpha-Cadinol 222 C15H26O 91 0.52
8 22.083 乙基-(Z)-4-癸烯酸 310 C12H22O2 84 0.54
9 24.230 13z-十八烯酸甲酯 282 C18H34O2 84 0.88
10 24.656 棕榈酸乙酯 284 C18H36O2 94 15.20
11 28.449 9,12-十八碳二烯酸乙酯 308 C20H36O2 92 14.00
12 28.598 α-亚麻酸甲酯 292 C19H32O2 92 21.56
13 28.750 順式十八烯酸乙酯 310 C20H38O2 84 1.68
14 28.935 苾澄茄油烯醇Cubenol 222 C15H26O 85 7.84
15 29.059 大香叶烯D-4-醇 Germacrene D-4-ol 222 C15H26O 87 7.07
16 29.233 花生酸乙酯 340 C22H44O2 90 1.00
17 31.843 二十一烷烃 296 C21H44 87 0.44
18 34.676 正十二烷酸苯乙酯 304 C20H32O2 93 1.15
23 农 业 科 学 研 究 第33卷
续表
峰号 保留时间/min 化合物名称 相对分子量 分子式 相似度 含量/%
19 37.520 邻苯二酸二辛酯 390 C24H38O4 93 3.93
20 39.143 山嵛酸docosanoic acid 340 C22H44O2 84 0.55
21 40.390 月桂酸苯甲酯 290 C19H30O2 94 4.61
22 40.990 9-十八烯酸乙酯 310 C20H38O2 90 1.04
23 43.423 15-二十四烯酸甲酯 380 C25H48O2 82 0.49
24 43.991 棕榈酸甲酯 270 C17H34O2 86 0.63
25 44.368 α-bisabolol 222 C25H26O 91 0.83
26 44.736 正十二烷酸-2-苯乙酯 304 C20H32O2 88 2.28
27 45.625 9z,12z,15z-十八烯酸 278 C18H30O2 83 0.53
28 46.598 正十六烷酸n-Hexadecanoic acid 256 C16H32O2 80 0.58
29 49.342 未鉴定 0.70
30 9.383 未鉴定 0.61
大戟属植物中化学成分主要有萜类、黄酮类、生
物碱类、甾醇类和酯类等[8],笔者利用冷浸法结合索
氏提取法、和柱层析分离法对钩腺大戟根中脂溶性
成分进行了提取、分离,通过气相色谱-质谱联用技
术对油脂类化合物进行了检测鉴定,鉴定出不饱和
脂肪酯14种,占油脂类化合物的71.09%,挥发油
7种,占14.84%,油脂类化合物种类比较丰富[9],且
主要以不饱和脂肪酸为主,无论是脂溶性药用成分
的开发还是生物柴油[10]的开发方面都具有非常重
要的研究价值.
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The CTC-MS analysis of fat-soluble components of Euphorbia sieboldiana root
Guo Shenghu1,Wang Jingdong1,Ma Hongai1,Hao Fengxia2
(1.Agricultural Biotechnology Center,Ningxia Academy of Agriculture and Forestry Science,Yinchuan 750002,China;
2.Key Laboratory of Energy Sources andChemical Engineering,NingxiaUniversity,Yinchuan750021,China)
Abstract:The liposoluble constituents were extracted by cold-soak extraction,and GC-MS was used to
analyze their chemical composition,30compounds were extracted from the foot of Euphorbia sieboldiana,
28compounds were identified,amounting for 98.42% of total constituents.Most of them are the
unsaturated fatty acid-ester content up to 71.09%,the folowing is volatile oil 14.84%,acids 2.2%,
diolefine 0.44%.The consequences indicated that the major liposoluble constituents wereα-methyl
linolenate(21.56%),palmitoleic acid ethyl ester(15.20%),ethyl 9,12-Octadecadienoic acid ethyl ester
(14.00%),cubeb oil enol(7.84%)and Germacrene D-4-enol(7.07%).
Key words:foot of Euphorbia sieboldiana;liposoluble constituents;GC-MS
(责任编辑、校对 郑国琴)
33 第4期 郭生虎等:钩腺大戟根中脂溶性成分GC-MS分析