全 文 ：上海中医药杂志 2015 年第 49 卷第 7 期 SH． J． TCM Jul．，2015;Vol． 49 No． 7
DOI:10． 16305 / j． 1007-1334． 2015． 07． 025
飞龙掌血提取物的镇痛作用及相关机制研究
陆 怡，朱元章，郭晨旭，韩 聪，朱国福，潘颖宜
上海中医药大学中药学院(上海 201203)
【摘要】 目的 对飞龙掌血的镇痛作用及相关机制进行实验探讨，为进一步研究开发镇痛中药提供参考。方法 采用醋酸扭体法和
热板法考察飞龙掌血的提取物对于化学刺激和热刺激引起疼痛的镇痛效果;用酶联免疫法(ELISA 法)检测小鼠血清中 β 内啡肽
(β-EP)、前列腺素 E2(PGE2)、五羟色胺(5-HT)、一氧化氮(NO)的含量;用Western blotting法检测小鼠脑组织中 β-EP、PGE2 和阿片 μ
受体的蛋白表达。结果 飞龙掌血提取物能明显减少冰醋酸所致小鼠的扭体次数，且醇提物低于水提物(P ＜ 0． 01) ;飞龙掌血提取物
能提高小鼠热刺激痛阈值，醇提物与水提物之间无显著性差异(P ＞ 0． 05) ;飞龙掌血提取物能增加小鼠血清中的 β-EP 的含量、降低
PGE2 及 NO的含量，且醇提物更明显(P ＜ 0． 05) ，而 5-HT的含量无变化(P ＞ 0． 05) ;飞龙掌血的提取物还能上调小鼠脑组织中 β-EP
的蛋白，下调 PGE2 的的蛋白表达(P ＜ 0． 05)。结论 飞龙掌血具有镇痛作用，且醇提物效果优于水提物，高剂量组优于中、低剂量
组，其镇痛机制可能是与通过增加血清中 β-EP，降低 PGE2、NO的含量，上调脑组织中 β-EP的蛋白表达、下调 PGE2 的表达有关。
【关键词】 飞龙掌血;镇痛;镇痛机制
Analgesic effect of Toddalia Asiatica’s extract and its peripheral analgesic mechanism
LU Yi，ZHU Yuan-zhang，CUO Chen-xu，HAN Cong，ZHU Guo-fu，PAN Ying-yi
Shanghai University of Traditional Chinese Medicine
Abstract:Objective To study the analgesic effect of Toddalia Asiatica，and to provide reference for the research and development of analgesic traditional Chinese
medicine． Methods Analgesic effect of Toddalia Asiatica’s extract was investigated by methods of acetic acid writhing and hot plate，and the pain was induced
by chemical and heat stimulation． ELISA kit was used to detect the regulation of beta-endorphin(β-EP) ，5-hydroxytryptamine(5-HT) ，prostaglandin2(PGE2) ，
nitric oxide(NO)in the serum of the rats;western blot was used to detect β-EP，PGE2 and Opioid receptors μ in brain tissue of rats． Ｒesults The number of rats
writhing induced by acetic acid was decreased by the Toddalia Asiatica’s extract，and the ethanol extract was less than the water extract (P ＜ 0． 01)． The pain
threshold was remarkably improved by the Toddalia Asiatica’s extract，and there was no significantly difference between ethanol extract and water extract
(P ＞ 0． 05)． The extract could increase the content of β-EP as well as reduce the content of PGE2 and NO in the serum，and the ethanol extract has more
remarkably effect(P ＜ 0． 05) ;The extract also can increase the content of β-EP as well as reduce the expression of PGE2 in brain tissue(P ＜ 0． 05)． Conclusion
Toddalia Asiatica has analgesic effect，and ethanol extract was better than water extract，high dose group was better than low dose group． The analgesic
mechanism maybe has the relationship with increasing β-EP，decreasing the content of PGE2 and NO，and the up-regulation of the expression of β-EP and the
down-regulation of the expression of PGE2 ．
Keywords:Toddalia Asiatica Lam;analgesic effect;analgesic mechanism
［基金项目］上海市教委科研创新项目(11YS77) ;上海市教委博
士点基金项目(K120309)
［作者简介］陆怡，女，硕士生，主要从事中药及复方的药效学研
究工作
［通讯作者］潘颖宜，副教授，硕士生导师;E-mail:pyy16@ 126．
com。朱国福，教授，博士生导师;E-mail:gfz1998@ 163． com
飞龙掌血是一味收载于苗族、土家族等少数民族
药物志中的常用民族药［1］，有祛风止痛、散瘀止血、解
毒消肿之功［2］，临床多用于治疗外伤性肿痛、瘀血等。
飞龙掌血药液外敷，具有治疗外伤性肿痛的功效。研
究证明，飞龙掌血根皮部分的镇痛作用超过或相当于
杜冷丁［3］;飞龙掌血生物总碱制剂［4］以及水提液、醇提
液均具有抗炎和镇痛作用。为了进一步评价飞龙掌血
的镇痛作用，本研究采用扭体法和热板法来观察飞龙
掌血体内的镇痛作用，并采用酶联免疫吸附法(ELISA)
及 Western blotting等方法对扭体实验中动物血清及脑
组织中的 β内啡肽(β-EP)、前列腺素 E2(PGE2)、五羟
色胺(5-HT)、一氧化氮(NO)等进行检测，以探讨其相
关的作用机制，从而为进一步研究开发镇痛中药提供
实验参考。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 动物 清洁级 KM 小鼠，224 只，体质量 18 ～
22 g，斯莱克公司提供。动物合格证号:SCXK(沪)
2012-0002。适应性饲养 2 天，给药前后，全价颗粒饲料
喂养，自由饮水，昼夜明暗交替时间 12 h /12 h;室温:
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25 ℃;湿度:40%。
1． 1． 2 药物与试剂 飞龙掌血为芸香科植物飞龙掌
血 Toddalia Asiatica Lam．的干燥根，购于安徽亳州市四
芝堂药业有限责任公司，经上海中医药大学生药教研
室李西林教授鉴定。
飞龙掌血水提物的制备:称取一定量的飞龙掌血
饮片煎煮 2 次，提取药液并浓缩至 1 g /ml，备用。
飞龙掌血醇提物的制备:称取一定量的飞龙掌血
饮片，用 8 倍量 75%乙醇回流 2 次，挥干后溶于蒸馏水
中，得到浓度为 1 g /ml浓缩液，备用。
阿司匹林(批号:12091006) ，南京白敬宇制药有限
责任公司;布洛芬(批号:130305) ，太极西南药业股份
有限公司;0． 6%醋酸(新鲜配制，批号:20130705) ，国
药集团化学试剂有限公司;PGE2 试剂盒、5-HT 试剂盒
及 β-EP试剂盒，上海西唐生物科技有限公司;NO试剂
盒，南 京 建 成 科 技 有 限 公 司;β-内 啡 肽 抗 体
(β-endorphin antibody，sc-18264) ，圣克鲁斯 Santa Cruz
Biotechnology，Inc 生物技术公司;阿片 μ 受体抗体
(Anti-Mu Opioid Ｒeceptor antibody，ab10275) ，艾博抗
(abcam) ;前列腺素 E2 受体 2 抗体(EP2Antibody，sc-
20675) ，圣克鲁斯 Santa Cruz Biotechnology，Inc 生物技
术公司。
1． 1． 3 仪器 YLS-6B 型智能热板仪，济南益延科技
发展有限公司;98-1-B型电子调温电热套，天津市泰斯
特仪器有限公司;高效液相色谱仪(Waters e26951)、
Western blotting电泳仪及转膜仪，美国 Bio-Ｒad。
1． 2 研究方法
1． 2． 1 飞龙掌血提取物对醋酸所致小鼠扭体反应的
影响 18 ～ 22 g的 KM小鼠 96 只，随机分为 8 组，每组
12 只，雌雄各半。分别为生理盐水组(阳性组)、水提
取物 3 个剂量组(1 g /kg、4 g /kg、6 g /kg)、乙醇提取物
3 个剂量组(1 g /kg、4 g /kg、6 g /kg) ，以及阳性对照阿
司匹林组(阳性组) (0． 1 g /kg)［5］。
各给药组小鼠分别灌胃给予每 10 g体质量 0． 2 ml
相应药物，阴性对照组灌胃给予同容积 0． 9% NaCl 溶
液。连续灌胃 5 天。末次给药后，于腹腔注射 0． 6%醋
酸 0． 2 ml，记录开始出现扭体反应的时间(潜伏期)和
20 min内的扭体次数［6］。
1． 2． 2 飞龙掌血提取物对热板所致小鼠疼痛反应的
影响 18 ～ 22 g 的 KM 雌性小鼠 128 只，随机分为
8 组，每组 16 只。分别为生理盐水组、水提取物 3 个剂
量组(1 g /kg、4 g /kg、6 g /kg)、乙醇提取物 3 个剂量组
(1 g /kg、4 g /kg、6 g /kg) ，以及阳性对照布洛芬组
(0． 039 g /kg)［7］。
调节智能热板仪使温度控制在(55 ± 0． 5)℃，预热
10 min;将小鼠放在热板上，用秒表记录自小鼠放在热
板上至出现舔后足所需时间(s)作为该鼠的痛阈值。
测定 2 次(间隔大于 5 min) ，凡小于 5 s 或者大于 30 s
出现舔后足者，以及喜跳跃者一律弃去不用［8］。
分组后重新测量小鼠痛阈值，取 2 次平均值作为
该鼠给药前的痛阈值。各给药组小鼠分别灌胃给予每
10 g体质量 0． 2 ml相应药物，阴性对照组灌胃同容积
0． 9% NaCl 溶液，并于给药后 0． 5 h、2． 0 h、3． 5 h、
5． 0 h、6． 5 h测定其痛阈值［9］。
1． 2． 3 飞龙掌血提取物对血清中 β-EP、5-HT、PGE2 及
NO的影响 扭体实验结束后，采用摘眼球法取小鼠血
液，3 500 r /min离心 20 min，各组血清稀释 5 倍后，分
成 4 份，分别用于检测 β-EP、PGE2、5-HT以及 NO的含
量［10-13］，均采用试剂盒说明书方法检测。
1． 2． 4 飞龙掌血提取物对脑组织中 β-EP、PGE2、阿片
μ受体的影响 扭体实验结束后脱颈处死小鼠，剪开
小鼠头部皮肤及头骨，取出全脑，称取 0． 1 g 脑组织于
1 ml 裂解液中匀浆，12 000 r /min 离心后取上清，用
BCA蛋白试剂盒测蛋白浓度。取同一上样量后加入
5 ×上样缓冲液，95 ℃ 金属浴煮 10 min。配 10%分离
胶及 5%浓缩胶，将制备好的分离胶和浓缩胶放入电泳
槽，充满电泳液，电泳(85 V，30 min;130 V，1 h) ;先将
胶、PVDF 膜和滤纸在预冷的 transfer buffer 中浸泡
10 min左右，然后按照“三明治”法将胶、PVDF 膜和滤
纸放置好，在转膜槽中加入转膜液(转膜条件:240 mA，
1． 5 h) ;TBST洗膜 2 次，每次 5 min，用 5%牛奶(TBST
配制)封闭 1． 5 h;TBST洗膜 3 次，每次 10 min，孵育一
抗，4 ℃过夜，一抗用 3%的 BSA 配制(稀释于 TBST
中) ;TBST洗膜 3 次，每次 10 min，孵育二抗，1． 5 h，二
抗稀释于 3% TBST 中;TBST 洗膜 3 次，每次 10 min，
ECL化学发光试剂进行曝光。此法分别用于检测脑组
织中 β-EP、PGE2 及阿片 μ受体的含量。
1． 3 统计学方法 采用 SPSS 18． 0 统计软件包进行数
据分析。计量资料以 x ± s 表示，各组之间的统计学处
理选用秩和检验。以 P ＜ 0． 05 为差异有统计学意义。
2 结果
2． 1 对醋酸所致小鼠扭体反应的影响 各给药组的
小鼠扭体次数较阴性组明显减少;在剂量相同的情况
下，醇提物各组的扭体次数明显少于相应的水提物组;
抑制百分率的结果显示，醇提物的抑制百分率明显高
于水提物，且醇低组和醇高组以及阳性组的抑制率均
超过 50%。见表 1。
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水提物的 3 个剂量组之间比较，水中组的扭体次
数少于水低组，水高组的扭体次数均少于水低组和水
中组，而水高组的扭体次数较水中组明显减少
(P ＜ 0． 05)。在醇提物中，醇低组扭体次数小于醇中组
(P ＜ 0． 05) ;醇高组扭体次数分别小于醇低和醇中组，
与醇中组比较差异有统计学意义(P ＜ 0． 01)。醇低
组的潜伏时间长于阴性组，而阳性组则更长。见
表 1。
表 1 各组对醋酸所致小鼠扭体反应的影响(n = 12，x ± s)
组别 剂量(g /kg) 潜伏时间(s) 扭体反应次数(次) 抑制率(%)
阴性组 － 250． 00 ± 69． 98 35． 08 ± 16． 92 0． 00
水低组 1 263． 25 ± 98． 56 27． 33 ± 14． 59＊＊ 22． 08
水中组 4 258． 75 ± 74． 22 26． 67 ± 5． 93＊＊ 23． 98
水高组 6 302． 75 ± 152． 60 24． 00 ± 10． 30＊＊▲ 31． 58
醇低组 1 386． 50 ± 183． 20* 15． 33 ± 5． 85＊＊# 56． 29
醇中组 4 263． 08 ± 34． 52 17． 83 ± 5． 10＊＊△▼ 49． 16
醇高组 6 327． 42 ± 180． 76 13． 67 ± 2． 93＊＊▽□ 61． 04
阳性组 0． 1 409． 67 ± 66． 28＊＊ 12． 25 ± 5． 01＊＊ 65． 08
注:与阴性组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;醇低组与水低组比较，# P ＜ 0． 01;醇中组与水中组比较，△P ＜ 0． 01;醇高组与水高组比较，▽ P ＜ 0． 01;水
高组与水中组比较，▲P ＜ 0． 05;醇中组与醇低组比较，▼ P ＜ 0． 05;醇高组与醇中组比较，□P ＜ 0． 01
2． 2 对热板所致小鼠疼痛反应的影响 给药后，实验
组各时间点小鼠的痛阈值与给药前比较，均有不同程
度升高，其中 0． 5 h 时，醇中组差异有统计学意义
(P ＜ 0． 05) ;2 h时，除了水低组外其余各组均显著升高
(P ＜ 0． 01) ;3． 5 h、5 h及 6． 5 h 时，各组痛阈值均明显
升高(P ＜ 0． 01)。见表 2。
给药组各时间点的痛阈值与阴性组比较，结果显
示:0． 5 h 时，醇高组及阳性组明显升高(P ＜ 0． 05) ;
3． 5 h 时，水高组及醇高组均显著提高(P ＜ 0． 05，
P ＜ 0． 01) ;5． 0 h时，水低组、水中组及醇中组的痛阈值
均有提高(P ＜ 0． 05) ，而水高组、醇高组及阳性组的升
高更为明显(P ＜ 0． 01) ;6． 5 h时，水提物 3 个剂量组均
升高(P ＜ 0． 05) ，且醇中组、醇高组及阳性组升高更显
著(P ＜ 0． 01)。各时间点水提物 3 个剂量组之间的痛
阈值差异无统计学意义;2． 0 h、5． 0 h及 6． 5 h 时，醇提
物中醇高组的痛阈值均高于醇低组，且差异有统计学
意义(P ＜ 0． 05，P ＜ 0． 01) ，从而呈现一定的量效关系。
见表 2。
表 2 各组对热板所致小鼠疼痛反应的影响(n = 16，x ± s)
组别
剂量
(g /kg)
给药前平均
痛阈值(s)
给药后平均痛阈值(s)
0． 5 h 2． 0 h 3． 5 h 5． 0 h 6． 5 h
阴性组 － 12． 59 ± 3． 67 13． 00 ± 5． 18 20． 10 ± 8． 15＊＊ 22． 20 ± 14． 64＊＊ 22． 81 ± 9． 96＊＊ 23． 20 ± 8． 80＊＊
水低组 1 14． 09 ± 5． 72 14． 90 ± 12． 32 19． 58 ± 11． 02 33． 91 ± 19． 30＊＊ 36． 42 ± 17． 58＊＊# 35． 93 ± 14． 82＊＊#
水中组 4 14． 18 ± 4． 33 16． 13 ± 9． 02 29． 15 ± 19． 19＊＊ 28． 54 ± 16． 57＊＊ 33． 81 ± 15． 83＊＊# 38． 77 ± 17． 61＊＊#
水高组 6 13． 76 ± 3． 64 16． 10 ± 7． 88 26． 27 ± 12． 30＊＊ 36． 10 ± 16． 80＊＊## 39． 62 ± 16． 72＊＊## 37． 10 ± 18． 76＊＊#
醇低组 1 13． 11 ± 3． 44 19． 82 ± 14． 36 21． 72 ± 13． 52＊＊ 29． 03 ± 17． 17＊＊ 30． 99 ± 15． 15＊＊ 31． 45 ± 14． 94＊＊
醇中组 4 12． 55 ± 5． 09 15． 36 ± 5． 39* 22． 65 ± 14． 76＊＊ 25． 04 ± 15． 14＊＊ 36． 72 ± 18． 14＊＊# 40． 71 ± 18． 01＊＊##
醇高组 6 15． 52 ± 4． 13 19． 15 ± 11． 52# 27． 47 ± 14． 21＊＊△ 36． 79 ± 18． 83＊＊# 47． 73 ± 14． 94＊＊##△△ 45． 29 ± 14． 68＊＊##△
阳性组 0． 039 15． 72 ± 5． 47 18． 91 ± 7． 80# 27． 27 ± 11． 73＊＊ 33． 05 ± 19． 40＊＊ 41． 24 ± 16． 73＊＊## 42． 32 ± 15． 58＊＊##
注:各时间点与给药前比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;与阴性组同一时间点比较，# P ＜ 0． 05，## P ＜ 0． 01;醇高与醇低同一时间点比较 ，△P ＜ 0． 05，
△△P ＜ 0． 01
2． 3 对血清中 β-EP、PGE2、5-HT及 NO的影响 飞龙
掌血的提取物能增加小鼠血清中 β-EP的含量，且随着
剂量的升高，β-EP的含量也相应增加，醇高组、阳性组
与阴性组比较有显著性差异(P ＜ 0． 05)。而水提物的
各剂量组与醇提物的低、中剂量组中 β-EP含量虽有所
上升，但较阴性组差异均无统计意义(P ＞ 0． 05)。见
表 3。
飞龙掌血的提取物能降低小鼠血清中 PGE2 的含
量，醇高组效果优于阳性组，与阴性组比较有显著性差
异(P ＜ 0． 05)。而水提物的各剂量组与醇提物的低、中
剂量组中 PGE2 含量虽有所下降，但较阴性组差异均无
统计意义(P ＞ 0． 05)。见表 3。
飞龙掌血提取物能降低小鼠血清中 5-HT 的含量，
但均降低不明显，较阴性组差异均无统计意义
(P ＞ 0． 05)。见表 3。
飞龙掌血的提取物能降低小鼠血清中 NO的含量，
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且随着剂量的增加，NO的含量也相应减少，水中组、水
高组、醇低组、醇中组、醇高组、阳性组与阴性组比较差
异均有显著性差异(P ＜ 0． 05) ，且醇低组、醇中组及醇
高组差异显著(P ＜ 0． 01)。见表 3。
表 3 各组小鼠血清中 β-EP、PGE2、5-HT、NO含量比较(n = 10，x ± s)
组别 剂量(g /kg) β-EP(ng /L) PGE2(ng /L) 5-HT(μg /L) NO(μmol /L)
阴性组 － 1 863． 750 ± 920． 622 1 141． 902 ± 888． 484 16． 306 ± 21． 054 2． 765 ± 1． 452
水低组 1 1 553． 125 ± 518． 457 724． 976 ± 303． 369 9． 711 ± 0． 837 1． 809 ± 0． 165
水中组 4 1 698． 125 ± 634． 569 970． 683 ± 396． 984 10． 476 ± 1． 274 1． 741 ± 0． 568*
水高组 6 1 870． 000 ± 511． 535 812． 049 ± 434． 797 10． 065 ± 1． 485 1． 638 ± 0． 387*
醇低组 1 2 104． 375 ± 876． 167 764． 634 ± 248． 158 10． 793 ± 1． 850 1． 399 ± 0． 194＊＊
醇中组 4 1 918． 125 ± 680． 055 843． 659 ± 313． 222 12． 062 ± 2． 628 1． 024 ± 0． 394＊＊
醇高组 6 2 816． 875 ± 867． 490* 658． 244 ± 220． 203* 10． 560 ± 1． 260 1． 229 ± 0． 461＊＊
阳性组 0． 1 3 507． 500 ± 1 531． 065＊＊ 752． 195 ± 293． 593 10． 084 ± 1． 264 1． 570 ± 1． 045＊＊
注:与阴性组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
2． 4 对脑组织中 β-EP、PGE2、阿片 μ受体的影响 飞
龙掌血的水提物的低剂量组不能上调脑组织中 β-EP
的蛋白表达，中剂量组和高剂量组均能上调脑组织中
β-EP的蛋白表达，高剂量组尤为明显，与阴性组比较
差异有统计学意义(P ＜ 0． 05) ;醇提物的低、中、高剂量
组均可以上调脑组织中 β-EP的蛋白表达，差异有统计
学意义(P ＜ 0． 05)。飞龙掌血的提取物均能上调脑组
织中阿片 μ受体的蛋白表达，但与阴性组比较差异无
统计学意义(P ＞ 0． 05)。飞龙掌血的提取物均能下调
PGE2 的蛋白表达，与阴性组比较，水提物的中、高剂量
组及醇提物的中剂量组下调 PGE2 的蛋白表达明显
(P ＜ 0． 05) ，且醇提物高剂量组对 PGE2 蛋白表达的影
响尤为显著(P ＜ 0． 01)。飞龙掌血的水提物及醇提物
各剂量之间差异均无统计学意义(P ＞ 0． 05)。见图 1、
表 4。
图 1 各组小鼠脑组织中 β-EP、阿片 μ受体、
PGE2 的蛋白表达(n = 3)
表 4 各组小鼠脑组织中 β-EP、阿片 μ受体、PGE2 含量比较(n = 3，x ± s)
组别 剂量(g /kg) β-EP 阿片 μ受体 PGE2
阴性组 - 0． 721 0 ± 0． 136 4 0． 670 0 ± 0． 149 2 0． 629 8 ± 0． 053 1
水低组 1 0． 712 4 ± 0． 193 0 0． 792 5 ± 0． 200 1 0． 547 1 ± 0． 038 3
水中组 4 0． 822 3 ± 0． 196 2 0． 858 9 ± 0． 245 7 0． 482 6 ± 0． 100 7*
水高组 6 1． 073 4 ± 0． 053 6* 0． 828 8 ± 0． 109 8 0． 485 5 ± 0． 102 2*
醇低组 1 1． 071 5 ± 0． 120 3* 0． 784 4 ± 0． 049 4 0． 566 9 ± 0． 067 4
醇中组 4 1． 037 0 ± 0． 179 6* 0． 839 9 ± 0． 091 5 0． 510 0 ± 0． 056 8*
醇高组 6 1． 041 3 ± 0． 076 9* 0． 881 9 ± 0． 151 8 0． 473 0 ± 0． 020 5＊＊
阳性组 0． 1 1． 164 9 ± 0． 341 0＊＊ 0． 875 4 ± 0． 194 5 0． 504 0 ± 0． 070 4*
注:上表中的数值均为目的蛋白条带的面积 ×平均灰度值 /(内参条带的面积 ×平均灰度值所得) ;与阴性组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
3 讨论
飞龙掌血作为一味常用的民族药，具有散瘀止血、
除湿解毒、消肿止痛的功效。本研究采用扭体法和热
板法分别研究飞龙掌血对由于化学刺激和热刺激引起
的疼痛的镇痛作用，并通过检测血清中镇痛及致痛物
质的含量来进一步探讨其镇痛机制。
扭体实验结果显示:飞龙掌血的水、醇提取物均能
减缓醋酸所致小鼠的疼痛，具有一定的镇痛作用;且各
醇提物组的扭体次数均明显少于相应剂量的水提物
组，各组的抑制率也均高于相应的水提物组，显示醇提
物的镇痛效果优于水提物;提取物各剂量组具有一定
的量效关系。一般而言，小鼠扭体的潜伏时间应与镇
痛效果成正比，即时间愈长则作用愈强。但本实验结
果表明，飞龙掌血提取物对潜伏时间的影响并不明显。
热板实验结果显示，在给药 2． 0 h 后，各组小鼠的
痛阈值较给药前均有显著的提高，其中醇高组、水高组
及阳性组尤为明显。给药后 6． 5 h内飞龙掌血水、醇提
取物均能缓解因热刺激引起的疼痛，并随着时间的推
移作用增强，而且高剂量的效果较好;给药 2 h后，用药
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上海中医药杂志 2015 年第 49 卷第 7 期 SH． J． TCM Jul．，2015;Vol． 49 No． 7
组的痛阈值升高才逐渐明显，表明飞龙掌血提取物的
镇痛作用起效比较慢;各时间点相同剂量的水提取物
与醇提取物的痛阈值均无显著性差异，提示飞龙掌血
的这两种提取物在热板镇痛效应方面无明显区别。
外源性前列腺素(PG)能够诱导痛觉过敏反应或
增加对触觉的敏感性。研究显示，PGE 和 PGI 有产生
痛觉过敏和致痛作用，PGE2 在这类化合物中致痛作用
最强［14］。实验中，飞龙掌血醇提物的高剂量组明显降
低了小鼠血清中 PGE2 的含量;而脑组织中 PGE2 含量
的检测显示，飞龙掌血水提物的中剂量组和高剂量组
以及醇提物的中剂量组均能下调 PGE2 的蛋白含量，醇
提物的高剂量组对 PGE2 蛋白含量的下调作用尤为明
显，提示其缓解腹腔注射醋酸引起的疼痛可能通过降
低 PGE2 的含量达到的。
β-EP是体内自己产生的一类具有类似吗啡作用
的内源性肽类物质，目前已有研究证实在外周受损组
织中，含有大量的阿片肽类镇痛物质，主要包括 β-EP
和脑啡肽。通过增加这些外周内源性镇痛物质的释
放，成为达到镇痛的一条有效途径［15-16］。血清中 β-EP
含量的检测结果显示，飞龙掌血醇提物的高剂量组能
升高血清中 β-EP 的含量;脑组织中 β-EP 的蛋白含量
检测也显示，水提物高剂量组和醇提物的各剂量组均
上调了 β-EP的蛋白表达，提示其镇痛作用是通过增加
血清和脑组织中 β-EP的含量来实现的。
NO作为一种细胞间信使扩散到靶部位，刺激细胞
内可溶性鸟苷环化酶，增加 cGMP 水平而调节各种细
胞内酶，包括蛋白激酶和磷酸二酯酶等导致痛觉过敏
的产生。NO作为一种气体分子信使，通过发挥其独特
的作用方式，参与外周神经信息传递，调制脊髓及脊髓
以上不同水平的痛觉［17-18］。用药组血清中 NO 的含量
明显下降，且醇提物作用优于水提物，提示飞龙掌血提
取物可能通过降低血清中 NO 的含量来达到镇痛的
效果。
综上所述，飞龙掌血的醇提物和水提物均能缓解
小鼠由于腹腔注射醋酸引起的疼痛，从而显示一定的
镇痛作用，且醇提物优于水提物;对小鼠因热刺激导致
的疼痛均也具有一定的改善作用，但水提物和醇提物
的镇痛效应无显著差别。其外周的镇痛机制可能是通
过增加血清中 β-EP，降低血清中 PGE2 和 NO的含量来
实现的;中枢的镇痛机制可能是通过上调脑组织中
β-EP的蛋白表达和下调脑组织中 PGE2 的蛋白表达完
成的。
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编辑:季春来
收稿日期:2015-03-05
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