全 文 ： 中国现代应用药学 2011 年 7 月第 28 卷第 7 期 Chin JMAP, 2011 July, Vol.28 No.7 ·671·
HPLC同时测定飞扬草中没食子酸和槲皮苷的含量

蓝晓玉，钟保恒(广西柳州食品药品检验所，广西 柳州 545001)

摘要：目的 建立飞扬草中没食子酸和槲皮苷的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法，ZORBAX SB-Aq(4.6 mm×
250 mm，5 μm)色谱柱，柱温 30 ℃；流动相为甲醇-乙腈-0.2%磷酸溶液，采用梯度方式洗脱；流速 1.0 mL·min−1；检测
波长随时间变换。结果 没食子酸和槲皮苷在 2.328~58.20 μg·mL−1和 6.804~170.1 μg·mL−1内呈良好的线性关系，r 分别
为 0.999 5和 0.999 8；平均回收率为 100.26%和 96.29%，RSD分别为 0.64%和 0.69%(n=9)。结论 该方法快速，简便，
准确，为飞扬草药材及其制剂的质量控制提供参考。
关键词：高效液相色谱法；飞扬草；槲皮苷；没食子酸；含量测定
中图分类号：R284.1;R917.101 文献标志码：B 文章编号：1007-7693(2011)07-0671-03

Determination of Gallic Acid and Quercitrin in Euphorbia Hirta L. by HPLC

LAN Xiaoyu, ZHONG Baoheng(Guangxi Liuzhou Institute for Drug Control, Liuzhou 545001, China)

ABSTRACT：OBJECTIVE To establish an HPLC method for the determination of gallic acid and quercitrin in Euphorbia
hirta L. METHODS Using ZORBAX SB-Aq(4.6 mm×250 mm, 5 μm)column, at 30 ;℃ methanol-acetonitrile-0.2%
phosphoric acid solution was used as the mobile phase, with gradient elution. The flow rate was 1.0 mL·min−1. The detection
wavelength was changed by time. RESULTS The gallic acid and quercitrin had a good linearity relationship between
2.328−58.20 μg·mL−1 and 6.804−170.1 μg·mL−1, with r=0.999 5 and 0.999 8. The average recovery rate were 100.26% and
96.29%, with RSD of 0.64% and 0.69%(n=9). CONCLUSION The method is simple, rapid and accurate, suitable for the quality
control of Euphorbia hirta L.
KEY WORDS：HPLC; Euphorbia hirta L.; quercitrin; gallic acid; content determination

飞扬草收载于中国药典 2010 年版一部，为大
戟科植物飞扬草 Euphorbia hirta L.的干燥全草，性
辛、酸、凉；有小毒。归肺、膀胱、大肠经，具
有清热解毒，利湿止痒，通乳等功效，临床上用
于肺痈，乳痈，疔疮肿毒，牙疳，痢疾，泄泻，
热淋，血尿，湿疹，脚癣，皮肤瘙痒，产后少乳
等。主要成分为没食子酸和槲皮苷[1]。中国药典
2010 年版一部未收载其含量测定方法，同时测定
飞扬草中没食子酸及槲皮苷含量的方法亦未见文
献报道。本试验建立了高效液相色谱法同时测定
没食子酸及槲皮苷含量的方法，结果表明该方法
灵敏度高，专属性强，操作简便，可作为飞杨草
药材及其制剂的质量控制。
1 仪器与试药
岛津 LC2010A 高效液相色谱仪，紫外可见波
长检测器，LCsolution 色谱工作站；岛津 UV-2550
紫外可见分光光度计；梅特勒 XS205 电子分析天
平；超声波清洗器(AS7240BT，天津奥特赛恩斯仪
器有限公司)；没食子酸对照品(中国药品生物制品
检定所，批号：110831-200803，供含量测定用，
按含 C7H6O5 计为 90.1%)，槲皮苷对照品(中国药
品生物制品检定所，批号：111538-200302，供含
量测定用)；乙腈(色谱纯，美国 Fisher)；甲醇(色
谱纯，美国 Fisher)；水为一级实验用水；飞扬草
药材采自广西柳江、武宣、象州、融水等地，原
植物经本所中药室李玲副主任中药师鉴定为大戟
科植物飞扬草 Euphorbia hirta L.的全草，药材除去
杂质，切断，晒干后置 60 ℃烘箱中干燥 24 h，粉
碎，过二号筛备用。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：ZORBAX SB-Aq(4.6 mm×250 mm，5
μm)，柱温 30 ℃；流动相为甲醇-乙腈-0.2%磷酸溶
液 0~7 min(10∶5∶85)，7.01~15 min(38∶10∶52)；
检测波长 0~7 min(273 nm)，7.01~15 min(256 nm)；
流速 1.0 mL·min−1；进样量 10 μL。在该条件下，
供试品中的槲皮苷与其他杂质峰均达到较好的分
离，供试品及对照品色谱图见图 1。
作者简介：蓝晓玉，女，主管药师 Tel: (0772)2825417 E-mail: 254290439@qq.com
DOI:10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2011.07.014
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图 1 高效液相色谱图
A−空白溶剂；B−对照品；C−供试品；1−没食子酸；2−槲皮苷
Fig 1 HPLC chromatograms
A−blank solvent; B−control; C−sample; 1−gallic acid; 2−quercitrin
2.2 线性关系考察
2.2.1 对照品贮备液的制备
2.2.1.1 没食子酸对照品贮备液 精密称取没食
子酸对照品 ( 使用前无需处理 )12.92 mg( 按含
C7H6O5 为 90.1%计)置 50 mL 量瓶中，加甲醇溶解
并定容至刻度，摇匀，即得。
2.2.1.2 槲皮苷对照品贮备液 精密称取槲皮苷
对照品(使用前置五氧化二磷减压干燥器中干燥
24 h) 22.68 mg 置 100 mL 量瓶中，加甲醇溶解并
定容至刻度，摇匀，即得。
2.2.2 对照品溶液的制备 分别精密量取没食子
酸对照品贮备液 0.2，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL
和槲皮苷对照品贮备液 0.6，3.0，6.0，9.0，12.0，
15.0 mL置同一 20 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，
摇匀，制成不同浓度的对照品溶液。
2.2.3 线性试验 精密吸取“2.2.2”项下对照品
溶液 10 μL 进样测定，以对照品峰面积为纵坐标，
以对照品溶液的浓度为横坐标，进行线性回归，
得 没 食 子 酸 和 槲 皮 苷 回 归 方 程 分 别 为 ：
Y=29 243 358X+20 523，r=0.999 5；Y=26 280 039X+
51 494，r=0.999 8。结果表明没食子酸和槲皮苷在
2.328~58.20 μg·mL−1 和 6.804~170.1 μg·mL−1 内呈
良好的线性关系。
2.3 仪器精密度试验
分别精密吸取上述对照品溶液 10 μL，注入色
谱仪，连续进样 6 次，结果没食子酸和槲皮苷的
RSD 分别为 0.30%和 0.32%，表明仪器精密度良好。
2.4 稳定性试验
取本品粉末 1 g，精密称定，置 25 mL 量瓶中，
加入甲醇约 20 mL，超声处理 40 min，放冷，加甲
醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液用 0.45 μm 微孔
滤膜滤过，取此供试液进行测定，于 0，4，8，12，
24 h 分别精密吸取 10 μL 进行测定，记录没食子酸
和槲皮苷的峰面积，结果 RSD 分别为 0.57%和
0.92%，表明供试品溶液在 24 h 内稳定性良好。
2.5 重复性试验
分别取本品粉末 6 份，精密称定，置 25 mL 量
瓶中，按“2.4”项下方法制得供试液，取此溶液进
行测定，记录没食子酸和槲皮苷的峰面积，结果没
食子酸和槲皮苷的含量分别为 0.47 mg · g−1
(RSD=0.92%)和 1.66 mg·g−1(RSD=1.03%)，表明本
品含量测定方法的重复性良好。
2.6 回收率试验
精密称取 9 份已知含量的样品约 0.5 g，分别
精密加入没食子酸对照品贮备液 0.8，1.0，1.2 mL
和槲皮苷对照品贮备液 3.0，3.7，4.4 mL，置 25 mL
量瓶中，按“2.4”项下方法制得 3 个浓度的供试
液，取此溶液进行测定，计算回收率，结果见表 1。
表 1 加样回收率试验结果(n=9)
Tab 1 Results of recovery test(n=9)
组分 已知量/
mg
加入量/
mg
测得量/
mg
回收率/% 平均值/% RSD/%
没食子酸 0.235 5 0.186 2 0.420 9 99.57 100.26 0.64
0.236 2 0.186 2 0.422 3 99.95
0.235 7 0.186 2 0.421 7 99.89
0.235 9 0.232 8 0.469 5 100.34
0.235 8 0.232 8 0.468 3 99.87
0.237 2 0.232 8 0.469 1 99.61
0.236 8 0.279 4 0.518 1 100.68
0.236 6 0.279 4 0.519 0 101.07
0.237 0 0.279 4 0.520 2 101.36
槲皮苷 0.831 8 0.680 4 1.481 3 95.46 96.29 0.69
0.834 2 0.680 4 1.482 6 95.30
0.832 3 0.680 4 1.488 9 96.50
0.833 3 0.839 2 1.635 7 95.61
0.833 0 0.839 2 1.640 6 96.23
0.837 6 0.839 2 1.646 8 96.43
0.836 5 0.997 9 1.804 2 96.97
0.835 5 0.997 9 1.803 6 97.01
0.837 0 0.997 9 1.806 1 97.11
中国现代应用药学 2011 年 7 月第 28 卷第 7 期 Chin JMAP, 2011 July, Vol.28 No.7 ·673·
2.7 样品测定
取 4 个产地共 4 批飞扬草药材，按“2.5”项
下方法制得供试液并测定，结果见表 2。
表 2 样品测定结果(n=5)
Tab 2 Determination results of sample(n=5)
含量/mg·g−1 产地 没食子酸 RSD/% 槲皮苷 RSD/%
广西柳江 0.32 1.21 1.25 0.89
广西武宣 0.45 0.59 1.50 0.92
广西象州 0.37 1.05 1.26 1.10
广西融水 0.48 0.74 1.66 0.83
3 讨论
分别取没食子酸对照品储备液和槲皮苷对照
品储备在 200~400 nm波长内扫描，没食子酸在 273
nm，214 nm、槲皮苷在 256 nm，350 nm 的波长处
有吸收峰，排除边缘效应的干扰，没食子酸选择
273 nm、槲皮苷选择 256 nm 作为检测波长。根据
样品中各成分出峰的时间将波长转换设定为：0~7
min(273 nm)，7.01~15 min(256 nm)，达到同时测
定的目的。
笔者曾对方法中溶剂的选择、用量和超声提
取时间进行过考察[2]，甲醇作为提取溶剂、20~30
倍溶剂用量、连续超声40 min为最佳提取条件。
实验结果表明，建立的含量测定方法简便，
专属性高，测定结果准确，为飞扬草药材及其制
剂的质量控制提供了参考。
REFERENCES
[1] Ch.P(2010)VolⅠ(中国药典 2010 年版. 一部)[S]. 2010: 46.
[2] ZHONG B H. Determination of quercitrin in Euphorbia hirta
L by HPLC [J]. Mod Chin Med(中国现代中药), 2009, 11(8):
32-34.
收稿日期：2010-09-10



戒毒康酊剂中氢溴酸东莨菪碱及总生物碱的含量测定

徐强，章曙丹，冯瑛(浙江省中药研究所，杭州 310023)

摘要：目的 测定中药戒毒康酊剂中氢溴酸东莨菪碱及总生物碱的含量。方法 采用 Diamonsil C18柱 (250 mm×4.6 mm,
5 μm)分离测定氢溴酸东莨菪碱，流动相：以甲醇-0.02 mol·L−1醋酸钠溶液(含 0.02%三乙胺和 0.3%四氢呋喃，用冰醋酸调
pH到 6.2)梯度洗脱；流速 1 mL·min−1；检测波长：206 nm。采用酸性染料比色法测定戒毒康中的总生物碱，0.2%溴百里
香酚兰溶液显色，420 nm处测得吸光度。结果 氢溴酸东莨菪碱在 1.0~5.0 μg内呈良好的线性关系(r=0.999 6)；平均回
收率为 98.8%，RSD为 2.29%(n=6)。总生物碱在 0.04~0.2 mg内呈良好的线性关系(r=0.999 8)；平均回收率为 97.6%，RSD
为 2.06%(n=6)。结论 本方法简便、快速、准确、专属性强，可作为戒毒康酊剂的检验方法。
关键词：氢溴酸东莨菪碱；高效液相色谱法；总生物碱
中图分类号：R943.3 文献标志码：B 文章编号：1007-7693(2011)07-0673-04

Determination of Scopolamine Hydrobromide and Total Alkaloid in Jiedukang Tincture

XU Qiang, ZHANG Shudan, FENG Ying(Zhejiang Research Institute of Traditional Chinese Medicine, Hangzhou 310023,
China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To establish an HPLC method for determination of contents of scopolamine hydrobromide and
total alkaloid in Jiedukang tincture. METHODS A Diamonsil C18 column(250 mm×4.6 mm, 5 μm) was used to isolate and
determine scopolamine hydrobromide. The mobile phase was methanol-0.02 mol·L−1 NaAc solution (with 0.02% triethylamine
and 0.3% tetrahydrofuran, adjusted to pH 6.2 by HAc). The flow rate was 1 mL·min−1. The detection wavelength was set at 206
nm. Total alkaloids in Jiedukang tincture were determined with acid dye colorimetry. 0.2% Bromothymol blue was used as the
dye reagent and the wavelength was set at 420 nm. RESULTS The linear range of scopolamine hydrobromide was 1.0−5.0 μg
with a good correlation (r=0.999 6). The average recoveries was 98.8% with RSD of 2.29%(n=6). The total alkaloids showed
good linearity within the range of 0.04−0.2 mg(r=0.999 8), the average recoveries was 97.6% with RSD of 2.06%(n=6).
CONCLUSION The method established is sensitive, accurate and can be used for determination of scopolamine hydrobromide
作者简介：徐强，男，高级工程师 Tel: (0571)85229644 E-mail: xuqer@163.com