全 文 ：表 3　溶石颗粒剂对结石模型大鼠肾 OPNmRNA表达的影响
(n=8, x±s)
Tab3　EffectsofRongShiGranuleonRT-PCRanalysisofthe
expressionlevalofosteopontinintheratkidney(n=8, x±s)
组　别 OPN/GAPDH净面积
未处理组 0.341 0±0.153 51)
一周溶石颗粒剂 /g· kg-1 17.4 0.398 5±0.163 82)3)
11.6 0.717 1±0.200 01)2)4)
5.8 0.860 6±0.184 51)
造模一周组 1.157 9±0.368 4 1)
二周溶石颗粒剂 /g· kg-1 17.4 0.588 0±0.108 91)4)5)6)
11.6 0.784 9±0.270 71)5)
5.8 0.933 2±0.292 41)
造模二周组 1.188 8±0.263 11)
三周溶石颗粒剂 /g· kg-1 17.4 0.676 0±0.174 41)4)7)8)
11.6 0.942 2±0.227 21)7)
5.8 1.152 2±0.154 31)8)9)10)
造模三周组 1.397 5±0.343 4 1)9)
注:与未处理组比较 , 1)P<0.01;与造模一周组比较 , 2)P<0.01;与
一周溶石颗粒剂 5.8g· kg-1组比较 , 3)P<0.01;与一周溶石颗粒剂
17.4 g· kg-1组比较 , 4)P<0.05;与造模二周组比较 , 5)P<0.01;与
二周溶石颗粒剂 5.8g· kg-1组比较 , 6)P<0.01;与造模三周组比
较 , 7)P<0.01;与三周溶石颗粒剂 11.6 g· kg-1组比较 , 8)P<0.05;
与三周溶石颗粒剂 17.4 g· kg-1组比较 , 9)P<0.01;与一周溶石颗
粒剂 5.8 g· kg-1组比较 , 10)P<0.05
Note:1)P<0.01, vssolventcontrolgroup;2)P<0.01, vsmodelgroups
(Day7);3)P<0.01, vsRongShiGranule5.8 g· kg-1 groups(Day
7);4)P<0.05, vsRongShiGranule17.4g· kg-1 groups(Day7);5)P
<0.01, vsmodelgroups(Day14);6)P<0.01, vsRongShiGranule5.8
g· kg-1 groups(Day14);7)P<0.01, vsmodelgroups(Day21);8)P<
0.05, vsRongShiGranule11.6g· kg-1 groups(Day21);9)P<0.01,
vsRongShiGranule17.4 g· kg-1 groups(Day21);10)P<0.05, vs
RongShiGranule5.8g· kg-1 groups(Day7)
低湿肾组织中草酸和钙含量及结晶面积比。提示溶石颗粒
剂可有效地抑制乙二醇诱石过程所引起的肾损害 , 在体内有
保护肾组织细胞的作用 , 表现为肾组织细胞器结构稳定 , 肾
小管腔内渗出物减少 ,肾中草酸钙结晶程度和小管上皮损伤
程度的减轻等。因此推测溶石颗粒剂通过减轻草酸钙结晶
对肾小管上皮损伤的程度 , 从而减少 OPN黏附于受损的上
皮细胞表面的机会 ,减少晶体成核的位点。
REFERENCES
[ 1] DepartmentofPharmacologyofShanghaiMedicalColege.Hand-
bookofClinicaltraditionalChinesemedicine(中药临床手册)
[M].Shanghai:ShanghaiPeoplesPublishingHouse, 1977:169.
[ 2] WANGYS.Handbookofpharmacologyandapplicationoftradi-
tionalChinesemedicine(中药药理与应用)[ M] .Shanghai:
ShanghaiPeoplesPublishingHouse, 1983:698.
[ 3] HUANGP, HUANGWH, WANGGF, etal.EfectsofRongShi
granuleonrenalstoneformationinraturolithiasismodel[ J].
ChinJModApplPharm(中国现代应用药学), 2003, 20(4):
271-273.
[ 4] HUANGP, HUANGWH, KONGFZ, etal.Pharmacodynamics
testsofLitholyticgranuleontheanti-inflammatory、 analgesicand
diureticactions[ J] .ChinJModApplPharm(中国现代应用药
学), 2004, 21(2):106-108.
[ 5] MinistryofHealthP.R.China.BureauofDrugAdministration＆
Policy, ColectionsofNewDrug(WesternMedicine)Pre-clinical
ResearchGuidelines(Pharmacy, Pharmacology, Toxicology),新
药(西药)临床前研究指导原则汇编(药学 、药理学 、毒理学)
[M].Beijing:PeoplesMedicalPublishingHouse, 1993:101.
[ 6] CHANGLS, FENGT, LIJX, etal.EfectsofvitaminD3 and
vitaminK3 onexperimentalurolithiasisinrats[ J] .ChinJUrol
(中华泌尿外科杂志), 2001, 22(1):20-22.
[ 7] KHANSR, JOHNSONJM, PECKAB, etal.Expressionofos-
teopontininratkidneys:inductionduringethyleneglycolinduced
calciumoxalatenephrolithiasis[ J].JAm UrolAssoc, Inc.
2002, 168(3):1173-1181.
[ 8] HOYERJR, OTVOSLJr, URGEL, etal.Osteopontininurinary
stoneformation[ J] .AnnNYAcadSci, 1995, 760:257-265.
[ 9] RIESERJ, MANDELNS, WIESSNERJH, etal.Cellpolarity
andcalciumoxalatecrystaladherencetoculturedcolectingduct
cells[ J].AmJPhysiol, 1992, 262(2):F177-184.
收稿日期:2006-04-14
作者简介:李勇文 ,男 ,硕士 ,讲师　　Tel:13878169054　　E-mail:LiYongWen99@Yahoo.com.cn
含蝉翼藤大鼠血清的免疫调节作用
李勇文 1 ,李丽 1 ,梁荣感 1 ,徐庆 1 ,张士军 2(1.桂林医学院基础医学院 ,广西桂林 541001;2.广西医科大学药理教研室 ,南宁 530021)
摘要:目的　探讨蝉翼藤(CYT)对小鼠细胞免疫功能的调节作用。方法　以昆明小鼠为研究对象 ,以 Wista大鼠含药血清为
药物 , 通过体外给药来测定脾淋巴细胞转化率。结果　蝉翼藤可以增强正常小鼠的免疫功能 ,拮抗环胞素 A引起的免疫功能
低下和免疫正向调节作用。结论　蝉翼藤是一种有效的免疫增强剂 ,对免疫正向调节维持机体的正常免疫功能起重要作用。
关键词:蝉翼藤;淋巴细胞转化;正向调节
·452· ChinJMAP, 2007December, Vol.24No.6　　　　　　　　　　　　　　　中国现代应用药学杂志 2007年 12月第 24卷第 6期
DOI :10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2007.06.005
中图分类号:R967;R931.6　　　文献标识码:A　　　文章编号:1007-7693(2007)06-0452-03
StudiesonImmune-RegulatingEfectsofRatsSerumContainingSecuridacainappendiculata
LIYong-wen1 , LILi1 , LIANGRong-gan1 , XUQing1 , ZHANGShi-jun2(1.TheColegeofBasicMedicalSciences, Guilin
MedicalColege, Guilin541001, China;2.DepartmentofPharmacology, GuangxiMedicalUniversity, Nanning530021, China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　Toinvestinatetheup-regulatingeffectsofSecuridacainappendiculataHassktocelular-immunityin
Mice.METHODS　DeterminingthespleenlymphocytetransformationrateinmicewiththeserumcontainingCYTofWistarratsinap-
pendiculataHassk.RESULTS　SecuridacainappendiculataHasskimprovedtheimmunefunctioninhealthymice, inhibitedtheim-
mune-deficiencycausedbyCyclophosphamideandhasup-regulatedefectsonthecell-immunity.CONCLUSION　Securidacainap-
pendiculataHasskisakindofefectiveimmunopotentiator, itplaysanimportantroleinup-regulatinnthecell-immunityandholdingthe
formalimmunefunction.
KEYWORDS:SecuridacainappendiculataHassk;lymphocytetransformation;up-regulation
　　蝉翼藤(SecuridacainappendiculataHassk.)为远志科 、远
志族蝉翼藤属攀援灌木 , 分布于印度 、缅甸 、越南 、印度尼西
亚和马来西亚 , 我国产于广东 、海南 、广西和云南 [ 1] 。其药理
作用尚未见报道。为了进一步探讨其免疫调节作用的机制 ,
笔者对蝉翼藤(CYT)增强正常小鼠的免疫功能 ,拮抗环胞素
A引起的免疫功能低下和免疫正向调节作用进行了实验研
究 , 旨在为临床应用提供依据。 目前 , 在中药血清药理学实
验中 , 多选用大鼠 、家兔 、豚鼠等正常动物来制备含药血清 ,
制备血清的动物应与获取离体器官 、组织 、细胞的动物相一
致 , 从而缩小或避免动物血清之间 , 以及动物血清和人血清
之间在理化 、生物等特性上的差异 , 减少因种属差异而造成
的免疫反应 , 提高实验结果的可靠性。 大鼠能够采集到足够
的血清满足本实验需要 ,因此我们选用大鼠来制备含药血清。
1　材料和方法
1.1　动物
昆明小鼠体重 19 ～ 20 g, 雄性 , 购自广西医科大学实验
动物中心(许可证号:桂动许字 2000第 001号)。
1.2　试剂
RBMI1640细胞培养液:美国 Gibco公司 , Cat№ 13200 -
035;刀豆蛋白(ConA):瑞士 Fluka公司;环胞素 A(CysA)
100μg· mL-1:华北制药集团;无菌 Hanks液:圣东生物科技
发展公司;四甲基偶氮唑盐:Sigma公司;盐酸:天津化学试剂
三厂;异丙醇:天津天新精细化工开发中心;胎牛血清:美国
Gibco公司 , Cat№ 16000-036;生理盐水:天津市氨凌药业有
限公司;乙醇:天津化学试剂有限公司。
1.3　仪器
超净工作台:上海浦东跃欣科学仪器厂 , SZX型;倒置显
微镜:南京江南光电集团股份有限公司 , XD-101型;CO2孵
箱:美国 ThermoForma公司 , Model311;细胞计数板:上海医
用光学仪器厂一分厂;离心机:上海安亭科学仪器厂 , TDL-
5;96孔培养板:加拿大 JET公司;酶标仪:BIO-RAD公司 ,
Model450。
1.4　方法 [ 2-4]
1.4.1　含药血清的制备　采用血清药理学方法进行实验 ,
制备含药血清的方法如下:三月龄 Wistar大鼠 40只 , 雌雄各
半 , 体重(250±30)g, 随机分为 4组 , 每组 10只。 ①无药空
白血清对照组:等量的生理盐水;②CYT大剂量组:10.0 g·
kg-1· d-1;③CYT中剂量组:5.0 g· kg-1· d-1;④CYT小剂
量组:2.5 g· kg-1· d-1。各组动物在同样条件下饲养 , 均以
每日 2次 , 早晚各 1次空腹灌胃连续给药 7 d。 于末次灌胃
(灌胃前禁食不禁水 12h)后 2 h, 乙醚吸入麻醉 ,腹主动脉抽
血 , 低速离心分离血清 ,并将同组动物的血清混合。经 56 ℃
30 min灭活处理 ,经 0.45 μm的微孔滤膜 , 再经 0.22 μm微
孔滤膜过滤除菌后 ,置 -20℃冰箱保存备用。
1.4.2　小鼠脾细胞的收集　通过算出细胞总数 ,计算所需
加入 RPMI1640(10% FCS)体积 ,以调整到需要浓度。
1.4.3　ConA溶液的配制　20μg· mL-1。
1.4.4　加 96孔培养板　向 96孔培养板中分别加入 ConA
(每孔 50 μL)、药物血清(每孔 50 μL)、环抱素 A(每孔 10
μL)、脾细胞悬液(每孔 100 μL)及无酚红的 RP-MI1640
(10% FCS)(每孔 10 ～ 50 μL)。 A96孔板加好样后 , 放入到
CO2孵箱中 , 孵育 68 h。加入 MTT再孵育 4 h然后加入 1∶
300的盐酸异丙醇溶液 100μL, 混匀后 ,振摇。
1.4.5　测定　将 96孔培养板放到酶标仪内测定。
1.5　实验分组
①无药血清组:分为空白组 、ConA组 、ConA+CysA组;
②高剂量含药血清组:分为 ConA组 、ConA+CysA组;③中
剂量含药血清组:分为 ConA组 、ConA+CysA组;④低剂量含
药血清组:分为 ConA组 、ConA+CysA。
2　结果
采用 SPSS10.0统计软件进行方差分析。 所有实验数
据均用 x±s表示。
通过表 1结果可以看出 , 单加 ConA组比无药血清空白
组的 A值高 ,给药 ConA组要比空白血清 ConA组的 A值高 ,
高剂量含药血清组最为显著 , 说明该药可以增强免疫功能。
加入 CysA组相对比单加 ConA组的 A值低 , 但比无药血清
·453·中国现代应用药学杂志 2007年 12月第 24卷第 6期　　　　　　　　　　　　　　　ChinJMAP, 2007December, Vol.24No.6
表 1　含蝉翼藤大鼠血清对小鼠脾淋巴细胞转化的影响(n=8, x±s)
Tab1　TheeffectofCYT-containingserumatdiferentdilutiononthemicespleencellsproliferation(n=8, x±s)
　　　组　别 吸光度 A值 刺激指数 CysA抑制率
无药空白血清组 0.205 2±0.047 0
空白血清 +ConA组 0.303 6±0.068 01) 0.479 5±0.194 3
高剂量含药血清 +ConA 0.585 4±0.064 01) 1.852 8±0.312 5
中剂量含药血清 +ConA 0.459 7±0.052 31) 1.240 3±0.371 5
小剂量含药血清 +ConA 0.416 3±0.068 61) 1.028 8±0.312 1
空白血清 +ConA+CysA组 0.226 9±0.042 7 0.105 8±0.201 1 0.289 7±0.101 2
高剂量含药血清 +ConA+CysA 0.397 4±0.067 52) 0.936 6±0.423 6 0.232 6±0.101 5
中剂量含药血清 +ConA+CysA 0.299 7±0.037 12) 0.460 5±0.223 8 0.272 1±0.131 6
小剂量含药血清 +ConA+CysA 0.225 4±0.035 3 0.098 5±0.196 3 0.262 5±0.152 3
注:在 ConA组中 ,各组与无药空白血清组比较;在 ConA+CysA组中 ,各组与空白血清组比较 , 1)P<0.01, 2)P<0.05
Note:InthegroupesofConA, eachgroupcomparewiththeNon-medicine-blood-serumgrouprespectively;andinthegroupesofConA+CysA, each
groupcomparewiththeBlank-blood-serumgrouprespectively, 1)P<0.01, 2)P<0.05
空白组的 A值高 ,给药组比空白血清组的 A值高 , 说明该药
可以拮抗环抱素 A引起的免疫功能低下并具有免疫正向调
节作用。综上所述表明:①蝉翼藤可以增强正常小鼠的免疫
功能 , 拮抗环抱素 A引起的免疫功能低下和免疫正向调节作
用。 ②蝉翼藤在给药大剂量组血清对淋巴的刺激指数最高 ,
CysA抑制率最低 , CYT高 、中 、低剂量组之间有一定的量效
依赖关系。其机制尚待进一步探究。
3　讨论
实验通过含药大鼠血清作为药物来观察蝉翼藤对小鼠
脾淋巴细胞转化率的影响.为进一步研究蝉翼藤对小鼠体内
免疫增强的机制 , 本实验通过采用环抱素 A免疫抑制剂加入
脾淋巴细胞中 , 建立免疫功能低下细胞模型来观察蝉翼藤对
免疫抑制淋巴细胞免疫功能的影响。实验证明:蝉翼藤能使
免疫功能低下的脾淋巴细胞数明显增加 , 同时淋巴细胞转化
率提高。由此可见 ,蝉翼藤可能是一种有效的免疫增强剂 ,
对免疫正向调节 、维持机体的正常免疫功能起重要作用。
REFERENCES
[ 1] KunmingInstituteofBotany, ChineseAcademyofSciences.Flora
ofYunNnan(云南植物志)[ M].Beijing:SciencePress, 1983:
261.
[ 2] MOSMANNT.Rapidcolorimetricassayforcelulargrowthand
survival:applicationtoproliferationandcytotoxicityassays[ J].
ImmunolMethods, 1983, 65(1-2):55-63.
[ 3] ZHENGYT, BENK.Useofassayforthedeterminationofcelvi-
abilityandproliferation[ J] .ImmunologyJ(免疫学杂志),
1992, 8(4):266.
[ 4] CUIXL, HEYZ, GAOYJ.Thenewthoughtonstudyofthe
Chinesetraditionalmedicalpharmacology-ChineseSerumPhar-
macology[J] .ChinJTraditMedSciTechnol(中国中医药科
技), 1997, 4(4):239.
收稿日期:2006-08-01
作者简介:王卫卫 ,女 ,药师　　Tel:(0631)8099026　　E-mail:74tiger26@163.com
氟替卡松致咽痒频咳 1例
王卫卫 1 ,王明华 2 ,于志良1(1.威海市文登中心医院 ,山东 文登 264400;2.文登整骨医院 ,山东 文登 264400)
中图分类号:R994.11;R977.1　　　文献标识码:B　　　文章编号:1007-7693(2007)06-0454-01
　　患者女 , 17岁 , 因阵发性鼻痒 、打喷嚏 、流清涕 1年于
2006年 10月 18日来我院就诊 , 诊断为 “变应性鼻炎(常年
性)”予氟替卡松(辅舒良 ,葛兰素史克生产 , 批号 SV0062)喷
鼻 1日 1次 ,每次每侧鼻腔各 2喷 ,用药后约 5 min患者即出
现咽痒 、频繁咳嗽 , 无咳痰及呼吸困难。胸片检查未见异常 ,
约 5 h后咽痒 、咳嗽自行消失 ,考虑为药物不良反应 , 嘱其停
药。 3d后患者为缓解鼻部症状再次使用该药 , 约 5 min后又
出现上述症状 ,停药后咳嗽症状消失。
讨论:辅舒良是治疗变应性鼻炎的最常用的类固醇类药
物 , 以往文献报告不良反应为鼻腔干燥 ,血性鼻分泌物 , 报告
对合并持续性咳嗽的患者有治疗作用 , 未曾提及诱发咽痒 、
干咳等反应 , 其如何产生上述症状尚不清楚 , 特在此提请同
仁注意和参考 。
收稿日期:2007-02-05
·454· ChinJMAP, 2007December, Vol.24No.6　　　　　　　　　　　　　　　中国现代应用药学杂志 2007年 12月第 24卷第 6期