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海南大戟乳汁脂溶性成分GC-MS分析



全 文 :·贮藏保鲜加工· 北方园艺2015(05):138~140
第一作者简介:田新民(1983-),男,博士,助理研究员,研究方向为
种质资源。E-mail:tianxm06@lzu.edu.cn.
基金项目:海南省自然科学基金资助项目(312023);农业部品种
资源保护资助项目(0313034)。
收稿日期:2014-11-19
DOI:10.11937/bfyy.201505040
海南大戟乳汁脂溶性成分GC-MS分析
田 新 民,李 洪 立,何   云,洪 青 梅,胡 文 斌
(中国热带农业科学院 热带作物品种资源研究所,海南 儋州571737)
  摘 要:以海南大戟乳汁为试材,采用冷浸法提取海南大戟乳汁脂溶性成分,利用气相色谱-质
谱(GC-MS)联用技术检测其化学成分,分离共得到24个化合物,鉴定了其中的19个化合物,5个
化合物未定。结果表明:海南大戟乳汁主要脂溶性成分为环阿屯醇、24-亚甲基环木菠萝烷醇、紫
薇乙缩醛以及未定化合物1和未定化合物2。
关键词:海南大戟;脂溶性成分;GC-MS分析
中图分类号:R 284.1 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2015)05-0138-03
  大戟属(Euphorbia)许多物种是重要的药用植物,如
飞扬草、小飞扬、甘遂、泽漆等,其用药经验在世界各地
均有报道,常常用作通便、利尿药物,可用于治疗水肿、
结核、牛皮癣、疥疮、无名肿毒等疾患[1]。近年来研究表
明,该属植物还具有抗肿瘤、抗病毒、皮肤刺激等活性,
尤其在抗肿瘤方面,体现出了巨大的优势[2-3]。该属植
物所具有的多种活性与其化学成分密切相关,大戟属植
物化学成分十分复杂,主要含有二萜酯类、三萜类、甾醇
类、黄酮类和酚性成分。
    
  海南大戟(E.hainanensis)隶属大戟科大戟属,是我
国海南岛特有木本植物物种,仅分布在昌江县俄贤岭保
护区的石灰岩山顶上,海拔高度960~1 100m,分布极为
狭窄,种群小,是极为珍稀的资源植物[4-6]。由于采样困
难等原因,目前对其相关研究尚鲜见报道,化学有效成
分的研究更是一片空白,海南大戟的主要成分及主要功
效都有待解决。化学成分的提取是研究和利用海南大
戟这一物种资源的前提和前期基础。现拟通过冷浸法
进行脂溶性成分的提取,然后通过气相色谱质谱联用仪
(GC-MS)进行分离和鉴定,系统研究其主要化学成分,
以期为资源的创新利用和新药物的研发提供基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试海南大戟(E.hainanensis)乳汁采自海南省昌
  
Study on the Antioxidant Activity of Polysaccharides and Flavonoids in
Different Strains of Polygonatum odoratum
LI Min1,XI Guang-sheng1,LUO Yi-yuan2,ZOU Li-li 1
(1.Colege of Traditional Chinese Medicine,Jilin Agricultural Science and Technology University,Jilin,Jilin 132101;2.Colege of Pharmacy,
Nanjing University of Chinese Medicine,Nangjing,Jiangsu 210023)
Abstract:With diferent strain and diferent age of Polygonatum ocloratumas test materials,in vitro antioxidant activities
of polysaccharides and flavones from diferent strains of Polygonatum odoratum were investigated by employing both
DPPH scavenging assay recovery ability with vitamin C as control.Using IC50as a comprehensive index to compare of
polysaccharides and flavonoids antioxidant capacity in vitro for diferent strains of Polygonatum odoratum.The results
showed that IC50value of biennia Polygonatum odoratum polysaccharide from diferent strains was 0.07mg/mL
(vitamin C was 0.05mg/mL),IC50value of flavonoids was 0.048mg/mL(rutin was 0.0062mg/mL)and the maximum
reduction capacity was 1.698,and biennial Polygonatumodoratumhad the minimum diference compared with control
materials.The antioxidant activities of biennial Polygonatum odoratumwas the best.
Keywords:Polygonatum odoratum;polysaccharide;flavonoids;antioxidant activities;diferent strains
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北方园艺2015(05):138~140 ·贮藏保鲜加工·
江县俄贤岭自然保护区,地处北纬19°00.779′,东经109°
06.836′,海拔935m。无水乙醇保存备用,活体材料保存
于中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所南药
种质资源圃,由王清隆鉴定。
试剂:无水乙醇、甲醇、乙酸乙酯、石油醚。
仪器:旋转蒸发仪,HP6890/HP5975CGC-MS联用
仪(美国惠普公司)。色谱柱为 HP-5MS 5%Phenyl
Methyl Siloxane(30m×0.25mm×0.25μm)弹性石英
毛细管柱,柱温50℃(保留1min),以5℃/min升温至
280℃,保持2min;气化室温度为250℃;载气为高纯He
(99.999%);柱前压7.62psi,载气流量1.0mL/min;进
样量1μL;分流比40∶1。离子源为EI源;离子源温度
为230℃;四级杆温度150℃;电子能量70eV;发射电流
34.6μA;倍增器电压1 871V;接口温度280℃;质量范
围30~550amu。
1.2 试验方法
1.2.1 脂溶性成分提取 首先从野外收集海南大戟乳
汁5mL,为防止发生氧化和成分降解,将乳汁放入无水
乙醇中保存。将获得的材料在无水乙醇中浸泡2d,然
后进行旋转蒸馏,蒸馏温度38℃,压力1.5mbar,转数
360r/min,待样品蒸干后,加无水乙醇溶解;继续浸泡
1d后进行2次蒸馏,蒸馏温度36℃,压力2mbar,转速
380r/min,待样品蒸干后,加无水乙醇溶解,浸泡1d;进行
第3次蒸馏,蒸馏温度40℃,压力3mbar,转速390r/min,
待样品蒸干后得到浸膏。用水或含一定浓度离子的水
溶液沉淀得上清液。回收静置过滤后的上清液减压回
收乙醇至无醇味。有机溶剂萃取,萃取所用有机溶剂为
乙酸乙酯和石油醚。将萃取液蒸干,加甲醇溶解,从蒸
馏瓶中洗脱下,密封保存,备用。
1.2.2 GC-MS分析 用HP6890/HP5975CGC-MS联
用仪进行分析,获得海南大戟脂溶性成分的总离子流
图,结合NIST05质谱图库和 WILEY质谱图库,同时结
合相关文献进行图谱分析,定性鉴定各个化学成分;依
据总离子流色谱峰的峰面积进行定量分析,求出各化学
成分的相对百分含量。
2 结果与分析
通过GC-MS分离,共分离得到24种脂溶性化合
物,其中,乙酸乙酯萃取物中分离得到16个,石油醚萃取
物中分离得到15个,有7个化合物为共有成分,5个化
合物尚未鉴定出来。
2.1 乙酸乙酯萃取物GC-MS分析
由图1、表1可知,海南大戟乳汁的乙酸乙酯萃取
物,共分离得到16个化合物,鉴定14个,占色谱总馏分
出峰面积的71.145%。海南大戟乳汁中脂溶性成分(>
5%)以环阿屯醇(Cycloartenol)、24-亚甲基环木菠萝烷醇
(24-methylene cycloartanol)、未定1和未定2为主,其中,
环阿屯醇的含量为39.933%,24-亚甲基环木菠萝烷醇的
含量为21.532%。未定1的含量为15.113%,未定2的
含量为13.742%。
图1 海南大戟乳汁乙酸乙酯萃取物脂溶性成分总离子流
Fig.1 Total ion chromatorgraphy of Euphorbia hainanensis
latex ethyl acetate extraction extraction
表1 海南大戟乳汁乙酸乙酯萃取物中的
脂溶性成分
  Table 1 Liposoluble constituents of ethyl acetate extraction of
Euphorbia hainanensis latex
峰号 保留时间/min 化合物 分子式 相对分子量 含量/%
1  17.74 酞酸二甲酯 C10H10O4 194  0.764
2  18.89  2,4-二叔丁基苯酚 C14H22O  206  0.234
3  21.92 β?姜黄酮 C15H22O  218  0.231
4  25.48 异丁基邻苯二甲酸酯 C16H22O4 278  0.931
5  26.34 棕榈酸甲酯 C17H34O2 270  0.850
6  27.08 邻苯二甲酸二丁酯 C16H22O4 278  0.968
7  27.42 棕榈酸乙酯 C18H36O2 284  0.344
8  29.13 油酸甲酯 C19H36O2 296  2.494
9  29.22 甲基-11-十八碳烯酸(油酸)C19H36O2 296  0.301
10  29.52 硬脂酸甲酯 C19H38O2 298  0.682
11  30.06 亚油酸乙酯 C20H36O2 308  0.112
12  30.13 油酸乙酯 C20H38O2 310  0.262
13  45.17 未定1  15.113
14  45.51 环阿屯醇 C30H50O  426  39.933
15  45.98 未定2  13.742
16  46.97  24-亚甲基环木菠萝烷醇 C31H52O  440  21.532
图2 海南大戟乳汁石油醚萃取物脂溶性成分总离子流
Fig.2 Total ion chromatorgraphy of Euphorbia hainanensis
latex petroleum ether extraction
2.2 石油醚萃取物GC-MS分析
由图2、表2可知,海南大戟乳汁的石油醚萃取物共
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·贮藏保鲜加工· 北方园艺2015(05):138~140
分离得到15个化合物,鉴定10个,占色谱总馏分出峰面
积的86.49%,有7个化合物在乙酸乙酯萃取物中被检
测到。海南大戟乳汁石油醚萃取物主要脂溶性成分(>
5%)为紫薇乙缩醛、环阿屯醇、24-亚甲基环木菠萝烷醇、
未定1和未定2,其中,紫薇乙缩醛含量为57.216%,环
阿屯醇含量为15.304%;24-亚甲基环木菠萝烷醇的含量
为6.803,未定1的含量为6.143%,未定2的含量为
5.084%。 
表2 海南大戟乳汁石油醚萃取物中的
脂溶性成分
  Table 2 Liposoluble constituents of petroleum ether extraction of
Euphorbia hainanensis latex
峰号 保留时间/min 化合物 分子式 相对分子量 含量/%
1  9.52  1,1-二丁氧基乙烷 C10H22O2 174  0.459
2  11.31 未定3  1.102
3  13.27 紫薇乙缩醛 C12H26O2 202  57.216
4  19.02 未定4  0.528
5  21.19 未定5  0.653
6  26.34 棕榈酸甲酯 C17H34O2 270  0.243
7  27.08 邻苯二甲酸二丁酯 C16H22O4 278  0.250
8  29.52 硬脂酸甲酯 C19H38O2 298  0.227
9  30.40 棕榈酸丁酯 C20H40O2 312  0.217
10  32.91 油酸丁酯 C22H42O2 338  2.543
11  33.24 硬脂酸丁酯 C22H44O2 340  0.169
12  45.17 未定1  6.143
13  45.51 环阿屯醇 C30H50O  426  15.304
14  45.98 未定2  5.084
15  46.97  24-亚甲基环木菠萝烷醇 C31H52O  440  6.803
3 讨论
通过GC-MS检测,海南大戟乳汁脂溶性成分共分
离到24种化合物,其中19种化合物已被鉴定,5种化合
物未定。未定化合物1和未定化合物2在乙酸乙酯和
石油醚萃取物中分别被检测到,保留时间都为45.17h
和45.98h,因此其是完全相同的2种化合物。海南大戟
乳汁脂溶性成分含量较大的为紫薇乙缩醛、环阿屯醇、
24-亚甲基环木菠萝烷醇、未定1和未定2。环阿屯醇是
甾醇类化合物的前体物质,而甾醇是植物体内构成细胞
膜的成分之一,也是多种激素、维生素D及甾族化合物
合成的前体,可以推测海南大戟含有大量的甾醇类化合
物;24-亚甲基环木菠萝烷醇最早由Wiliams从葡萄柚的
果皮中分离得到,国内已经从金毛狗脊和油桐叶中分离
到该物质[7-8],化学活性研究结果表明,该物质具有很好
的抗氧化活性[9];未定成分1和未定成分2的含量都比
较高,但其化学结构还不确定,很有必要对其进行进一
步的分离和鉴定,彻底研究其化学结构和生物活性。
参考文献
[1] 南京中医药大学.中华本草[M].上海:上海科技出版社,2006.
[2] 张蓓蓓,戴源,廖志新.大戟属植物的化学成分及药理活性研究进展
[J].东南大学学报,2010,29(1):99-106.
[3] 史海明,闵知大,屠鹏飞,等.中国大戟属植物中二萜成分的化学及
生物活性[J].化学进展,2008(20):375-385.
[4] 李秉滔,邱华兴,马金双,等.中国植物志大戟科[M].北京:科学出版
杜,1994:67-68.
[5] 邢福武,吴德邻,李泽贤,等.海南岛特有植物的研究[J].热带亚热带
植物学报,1995,3(1):1-12.
[6] 张荣京,秦新生,陈红锋,等.海南俄贤岭石灰岩山地海南大戟灌丛
群落研究[J].广西植物,2007,27(5):725-729.
[7] 吴琦,杨秀伟,杨世海,等.金毛狗脊的化学成分研究[J].天然产物研
究与开发,2007(19):240-243,302.
[8] 王兆玉,陈飞龙,梁文丰,等.小油桐叶石油醚萃取物的GC-MS分析
[J].中药材,2009,32(7):1077-1079.
[9] 曾佑玲,吉庆发,易琼,等.向日葵叶抗氧化成分24-亚甲基环木菠萝
烷醇的分离提取[J].中兽医医药杂志,2010(2):40-41.
The GC-MS Analysis of Fat-solubale Components for Euphorbia hainanensis Latex
TIAN Xin-min,LI Hong-li,HE Yun,HONG Qing-mei,HU Wen-bin
(Tropical Crops Genetic Resources Research Institute,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences,Danzhou,Hainan 571737)
Abstract:The liposoluble constituents were extracted by cold-soak extraction,and GC-MS was used to analyze their
chemical composition.The analysis results showed that 24compounds were extracted from the latex of Euphorbia
hainanensis and 19compounds were identified.Of these compounds,Lageracetal,Cycloartenol,24-methylene cycloartanol,
undentified 1and undentified 2were the main components which accounted for more than 5%of the total constituens.
Keywords:Euphorbia hainanensis;liposoluble constituents;GC-MS analysis
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