全 文 ：基金项目:解放军济南军区后勤科研计划项目(编号:CJN10L067)
通讯作者:石磊 Tel:(0371)23958759 E-mail:155SL@ 163． com
飞龙掌血对家兔血浆复钙时间的影响
石磊1 姬志强1 顾海鹏2 李月梅1 (1．解放军第 155 中心医院 河南开封 475003;2． 河南大学中药研究所)
摘 要 目的:初步研究飞龙血提取物的体外凝血活性。方法:分别对飞龙掌血水煎煮提取物、超声提取物和有机溶剂提取
物对家兔体外血浆复钙时间进行测定，考察了飞龙掌血不同方法提取物对家兔血浆覆盖时间的影响。结果:飞龙掌血超声提
取物可缩短家兔血浆复钙时间( P ＜ 0． 05) ;飞龙掌血乙酸乙酯、甲醇部位能显著缩短家兔血浆复钙时间( P ＜ 0． 01) ;而水煎煮
提取物可延长家兔血浆复钙时间( 0． 01 ＜ P ＜ 0． 05) 。结论:飞龙掌血超声提取物与飞龙掌血乙酸乙酯、甲醇部位具有潜在的
体外凝血活性。飞龙掌血水煎煮提取物具有潜在的体外抗凝血活性。
关键词 飞龙掌血;凝血; 血浆复钙时间
中图分类号:Ｒ285． 5 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2014)02-0194-03
Effect of Toddalia Asiatica on Plasma Ｒecalcification Time in Ｒabbits
Shi Lei1，Ji Zhiqiang1，Gu Haipeng2，Li Yuemei1(1． The 155th Central Hospital of PLA，Henan Kaifeng 475003，China;2． Institute
of Chinese Materia Medica of Henan University)
ABSTＲACT Objective:To preliminarily study on the procoagulant activity of Toddalia asiatica Lam． Methods:The plasma recal-
cification time affected by the water decoction extract，ultrasonic extract and organic solvent extract from T． asiatica were determined to
observe the effects of different extracts from T． asiatica on plasma recalcification time of rabbits． Ｒesults:The ultrasonic extract of T．
asiatica could reduce the plasma recalcification time (P ＜ 0． 05)，the ethyl acetate and methanol extract could significantly reduce the
plasma recalcification time (P ＜ 0． 01) ，while the water decoction extract prolonged the plasma recalcification time (0． 01 ＜ P ＜
0． 05)． Conclusion:The ultrasonic extract，ethyl acetate parts and methanol parts of T． asiatica have potential procoagulant activity，
while the water decoction extract of T． asiatica shows potential anticoagulant activity．
KEY WOＲDS Toddalia asiatica Lam．;Blood coagulation;Plasma recalcification time
飞龙掌血［Toddalia asiatica(Linn)Lam．］，又名
见血飞，为芸香科飞龙掌血属植物，味辛、微苦、性
寒，有小毒，具有祛风止痛、散瘀止血的功效，是贵州
苗族传统的活血化瘀、止痛止血的中草药［1］。
药理学研究表明，飞龙掌血水提取物具有镇痛
抗炎的作用［2］，可直接扩张血管［3］。化学研究表
明，飞龙掌血主要含香豆素类、生物碱类、萜类等成
分［4］。笔者前期的研究表明，飞龙掌血乙酸乙酯与
甲醇部位有良好的体内凝血活性［5］，本次研究旨在
考查飞龙掌血体提取物对家兔血浆复钙时间的影
响，以便更深入地研究其体外凝血活性，为更好地开
发和利用飞龙掌血植物资源，发挥其药理作用提供
理论依据。
1 仪器与材料
旋转蒸发仪(东京理化);电子天平 (瑞士 Mett-
ler-Toledo);CS-H1 型混合器(北京博励阳科技公
司)等。1． 5 ml道夫管;TGL-16 高速离心机(江苏金
坛中大仪器厂);100 微升和 1 000 微升移液器;秒表
计时器;竹签;LＲH-150 生化培养箱(上海一恒科技
有限公司);注射生理盐水(山东齐都药业有限公
司，批号:2012053107);38 g·L －1枸橼酸钠溶液;
2． 775 g·L －1氯化钙溶液;注射用灯盏花素(湖南恒
生制药有限公司，批号:20111205);维生素 K1 注射
液(上海现代哈森药业有限公司，批号:12062571)。
獭兔，雄性，体质量2． 5 kg，由河南大学中药研
究所提供(医动字 09-1-2 号)。飞龙掌血植物于
2008 年 9 月采集于贵州省都匀市，经都匀黔南民族
师范学院郭志友副教授鉴定为真品。
2 方法与结果
2． 1 样品与对照品的制备
飞龙掌血根1． 3 kg以甲醇冷浸 3 次，每次 7 d，
将滤液浓缩后，与 80 目硅胶拌样，分别以石油醚、乙
酸乙酯和甲醇洗脱，过滤浓缩后得到飞龙掌血石油
醚部位(113 g)、乙酸乙酯部位(150 g)和甲醇部位
(179 g)。飞龙掌血根 510 g 以水煎煮提取，将滤液
浓缩，得到飞龙掌血煎煮水提取物(55 g)。
用 3 支1． 5 ml道夫管分别称取石油醚部位浸膏
1，2，3 mg，各加生理盐水 1 ml，超声溶解后得飞龙掌
血石油醚部位样品(1，2，3 mg)，依同法得乙酸乙
酯、甲醇部位样品与煎煮水提取物样品。另用 3 支
491
www． zgys． org 研究论文
1． 5 ml道夫管分别称取飞龙掌血根粉末 10，20，30
mg，分别加 1 ml生理盐水后超声 20 min，得飞龙掌
血超声提取物样品。
取维生素 K1 注射液和注射用灯盏花素，加生理
盐水配制成 1 mg·L －1溶液作为凝血和抗凝血阳性
对照品。
2． 2 家兔体外血浆复钙时间的测定
取家兔耳缘静脉血3． 6 ml，加至含 38 g·L －1枸
橼酸钠 400 μl的 4 ml离心管中，混匀后以 1 000 r·
min －1的转速离心 15 min，取上清液备用。
取1． 5 ml道夫管，样品组中加入血浆与样品各
0． 1 ml;空白组加入血浆与生理盐水各0． 1 ml;阳性对
照组中加入血浆与阳性对照品各0． 1 ml，于 37℃温育
1 min后分别向每管中加入2． 775 g·L －1 CaCl2溶液
0． 1 ml计时，直到在道夫管中检测到纤维蛋白丝时停
止，各组重复 6次，求算术平均值与标准差，即为血浆
复钙时间。数值统计采用 SPSS 17． 0软件单因素方差
分析法(One-Way ANOVA)比较差异有无统计学意义。
2． 3 结果
飞龙掌血石油醚、乙酸乙酯与甲醇部位浸膏对家
兔血浆复钙时间的影响结果见表 1;飞龙掌血超声提
取物对家兔血浆复钙时间的影响结果见表 2;飞龙掌
血水煎煮提取物对家兔血浆复钙时间的影响结果见
表 3。
表 1 飞龙掌血有机溶剂提取物对家兔血浆复钙
时间的影响
组别 给药剂量(mg) 血浆复钙时间(s)
空白组 － 123． 33 ± 1． 03
维生素 K1 组 1 93． 10 ± 1． 72
灯盏花素组 1 176． 33 ± 1． 21
石油醚部位组 1 122． 83 ± 1． 72cd
2 122． 67 ± 1． 36cd
3 123． 17 ± 1． 94cd
乙酸乙酯部位组 1 107． 50 ± 1． 76abd
2 109． 16 ± 1． 72abd
3 108． 33 ± 2． 58abd
甲醇部位组 1 107． 50 ± 1． 51abd
2 108． 33 ± 1． 97abd
3 108． 16 ± 1． 72abd
注:与空白组比较，aP ＜ 0． 01;与维生素 K1 组比较，bP ＜ 0． 05，cP
＜ 0． 01;与灯盏花素组比较，dP ＜ 0． 01。
表 2 飞龙掌血超声提取物对家兔血浆复钙
时间的影响
组别 给药剂量(mg) 血浆复钙时间(s)
空白组 - 123． 83 ± 0． 98
维生素 K1 组 1 92． 83 ± 2． 14
灯盏花素组 1 176． 33 ± 1． 63
飞龙掌血超声提取物组 10 109． 83 ± 1． 47abc
20 110． 17 ± 2． 31abc
30 109． 67 ± 2． 33abc
注:与空白组比较，aP ＜ 0． 05;与维生素 K1 组比较，bP ＜ 0． 01;与
灯盏花素组比较，cP ＜ 0． 01。
表 3 飞龙掌血水煎煮提取物对家兔血浆复钙
时间的影响
组别 给药剂量(mg) 血浆复钙时间(s)
空白组 - 122． 66 ± 1． 03
灯盏花素组 1 175． 33 ± 1． 37
维生素 K1 组 1 91． 83 ± 1． 16
飞龙掌血水煎煮提取物组 1 142． 17 ± 2． 23abc
2 141． 83 ± 2． 32abc
3 143． 17 ± 1． 94abc
注:与空白组比较，aP ＜ 0． 05;与维生素 K1 组比较，bP ＜ 0． 01;与
灯盏花素组比较，cP ＜ 0． 01。
3 讨论
血浆复钙时间是在去 Ca2 +血浆中，重新加入适
量的钙，内源性凝血过程得以恢复所需要的时间，是
内源性凝血系统的筛选指标之一［6］。
表 1 显示，与空白组比较，飞龙掌血石油醚部位
对家兔体外凝血几乎无影响(P ＞ 0． 05);而乙酸乙
酯和甲醇部位均可显极著缩短家兔血浆复钙时间
(P ＜ 0． 01)。说明飞龙掌血乙酸乙酯和甲醇部位具
有潜在的体外凝血作用，但是其对家兔血浆覆盖时
间的作用弱于维生素 K1(P ＜ 0． 05)。
表 2 显示，与空白组比较，飞龙掌血超声提取物
可缩短家兔血浆复钙时间(P ＜ 0． 05)，具有一定的
凝血作用，但是其作用弱于维生素 K1(P ＜ 0． 01)。
表 3 显示，与空白组比较，飞龙掌血水煎煮提取物可
延长家兔血浆复钙时间(P ＜ 0． 05)，具有一定的抗
凝血作用。但是其活性低于灯盏花素组(P ＜
0． 01)。
实验结果显示，水煎煮提取物的药理作用与有
机溶剂提取物和超声水提取物的药理作用截然相
反。而从实验过程来看，只有水煎煮提取过程中有
加热的环节。说明加热过程有可能促使飞龙掌血提
取物的化学成分发生改变。笔者前期的研究表明乙
酸乙酯部位的主要成分是香豆素和生物碱类化合
物［7］，提示乙酸乙酯部位中的香豆素和生物碱则有
可能是飞龙掌血中作用于凝血系统的化合物。现代
药理学已经证实，香豆素类化合物具有抗凝血作用。
在本次实验中，加热过程有可能直接使水煎煮提取
物中香豆素类化合物含量增加，或者使生物碱类化
合物减少而间接导致香豆素类化合物含量增加。另
外，加热过程还有可能使提取物中新的化学成分产
生，导致水煎煮提取物延长家兔血浆复钙时间。
参 考 文 献
1 贵州省药品监督管理局． 贵州省中药材、民族药材质量标准［S］．
贵阳:贵州科技出版社，2003． 62-63
2 王秋静，路航，吕文伟，等． 飞龙掌血水提取物镇痛抗炎作用的
实验研究［J］． 中国实验方剂学杂志，2007，13(5):35-37
591
中国药师 2014 年第 17 卷第 2 期 China Pharmacist 2014，Vol． 17 No． 2
基金项目:黑龙江省自然科学基金项目(编号:D201038)
通讯作者:韩华 Tel:(0451)87266871 E-mail:
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hh7551@ 163． com
3 任先达． 飞龙掌血水提取物的扩血管作用及原理初探［J］． 暨南
大学学报，1990，11(2):29-35
4 石磊，李东，康文艺． 飞龙掌血化学成分和药理作用研究进展
［J］． 中国药房，2011，22(7):666-668
5 石磊，李昌勤，廉婷婷，等． 见血飞对小鼠出血时间和凝血时间
的影响［J］． 中国药房，2010，21(47):4424-4425
6 楼彩霞，庞宗然，张婉，等． 止血中药及复方的实验研究与作用
机制探讨［J］． 辽宁中医药大学学报，2009，11(10):59-61
7 石磊，姬志强，张振巍，等． 飞龙掌血乙酸乙酯部位化学成分研
究［J］． 中国药师，2013，16(9):1293-1295
(2013-09-27 收稿 2013-11-17 修回)
不同致敏原诱发过敏性鼻炎模型的比较
董培良1 殷鑫2 张天宇2 曲娜2 韩华2 (1．黑龙江中医药大学中医药研究院 哈尔滨 150040;2．黑龙江中医药
大学药学院)
摘 要 目的:不同致敏原诱发豚鼠过敏性鼻炎模型的比较。方法:分别以卵蛋白( OVA) 、2，4-二异氰酸甲苯酯( TDI) 和互
隔交链孢霉作为致敏原诱发豚鼠制备过敏性鼻炎模型，以行为学观察、血清生化水平和组织学观察，考察不同模型组与人类
过敏性鼻炎的符合度。结果:OVA组与空白组比较，打喷嚏次数、抓鼻次数、血清透明质酸( HA) 及 IgE差异有统计学意义( P
＜0． 001或0． 01) 。结论:OVA诱发过敏性鼻炎模型既在症状上符合过敏性鼻炎的典型症状，又在病理改变上与过敏性鼻炎
相符合。
关键词 过敏性鼻炎;模型; 致敏原
中图分类号:Ｒ965． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2014)02-0196-03
Comparison of Allergic Ｒhinitic Models Induced by Various Allergens
Dong Peiliang1，Yin Xin2，Zhang Tianyu2，Qu Na2，Han Hua2(1． Institute of Traditional Chinese Medicine，Heilongjiang University
of Chinese Medicine，Harbin 150040，China;2． College of Pharmacy，Heilongjiang University of Chinese Medicine)
ABSTＲACT Objective:To compare the models of guinea pig allergic rhinitis induced by different allergens． Methods:Ovalbumin
(OVA)，2，4-tolylene diisocyanate (TDI)and alternariaalternata was respectively used as the allergens to establish the model of guinea
pigs allergic rhinitis． The conformity of the models and human allergic rhinitis was studied through the behavioral indices，such as the
times of nose itches，nasal discharge flow，histological properties and serum HA and IgE indices． Ｒesults:The times of sneezing and
scratching nose，serum HA and IgE in OVA group was significantly different from those in the control group (P ＜ 0． 001 or P ＜ 0． 01)．
Conclusion:The models of allergic rhinitis induced by OVA are the same as allergic rhinitis in typical symptoms and pathological
changes．
KEY WOＲDS Allergic rhinitis;Models;Allergen
过敏性鼻炎(allergic rhinitic，AＲ)是机体对外
界过敏原，如粉尘、空气、螨虫、油烟、皮毛等过敏性
增高而表现的以鼻粘膜病变为主的疾病。其属于
IgE介导的Ⅰ型变态反应，以发作性鼻痒、鼻塞、喷
嚏及流清涕为主要的症状，是危害人们健康的常见
病、多发病。动物模型是研究人类疾病的重要工具，
建立一种既能反映过敏性鼻炎典型症状，又能反映
相应的病理改变的动物模型，是十分必要的［1］。本
文通过对不同致敏原诱发过敏性鼻炎动物模型的探
讨，为抗过敏性鼻炎药物的研究提供依据。
1 材料与方法
1． 1 动物
SPF级豚鼠，雌雄各半，体质量(220 ± 20)g，合
格证号 SYXK(黑)20020018 号，由黑龙江中医药大
学实验动物中心提供。
1． 2 试药
卵蛋 白 (OVA，上 海 化 学 试 剂 厂，批 号:
20071006);氢氧化铝(天津市四通化工厂，批号:
20091109);2，4-二异氰酸甲苯酯(TDI，上海化学试
剂厂，批号:20081103);互隔交链孢霉(协和医科大
学，W/V 为 1 ∶ 10，蛋白氮含量 5775PNU·ml －1);
FCA(Sigma 公司，批号:20091218);戊巴比妥钠
(Sigma 公司，批号:XS-20081118-00600);IgEELISA
试剂盒(天津千叶生物技术有限公司，批号:
000421);HAELISA 试剂盒(美国 Ｒapidbio 公司，批
号:12280517)。
1． 3 仪器
XT-2000iv全自动血液分析仪(北京松上技术有
691
www． zgys． org 研究论文