全 文 ：大理学院学报
JOURNAL OF DALI UNIVERSITY
第13卷 第10期 2014年10月
Vol.13 No.10 Oct. 2014
［DOI］10. 3969 / j. issn. 1672-2345. 2014. 10. 004
紫地榆（Geranium strictipes R. Kunth）为牻牛儿
苗科老鹳草属植物，药用其根，秋季采挖，洗净切片
晒干。为白族、彝族民间常用中草药，民间又称隔
山消〔1〕。在云南省主要分布于中甸、丽江、大理、昆
明等地。该药在《大理中药资源志》《中药大辞典》
《全国中草药汇编》等书中均有收载，功能主治为清
热利湿，活血止血，痢疾，消化不良，慢性胃炎，月
经不调，鼻衄；外用跌打损伤。民间主要用于治疗
厌食、肠炎、红白痢疾、消化不良等疾病〔2〕。有报道
其化学成分有没食子酸〔3-4〕、原儿茶酸〔3〕、鞣花酸〔5〕、
β-1，4，6-三-O-没食子酰基-葡萄糖、β-1，6-二-
O-没食子酰基-葡萄糖、五倍子酸甲酯、（+）-儿茶
素、3，4-二羟基苯甲酸〔4〕，且主要研究也集中于其化
学成分方面的研究。本试验对紫地榆提取物进行
抗菌活性实验研究，旨在为紫地榆的进一步研究和
开发利用提供实验理论依据。
1 材料
1.1 药材 药材购于云南省大理市大理集盛大药
房，经大理学院药学与化学学院马晓匡教授鉴定为
牻牛儿苗科老鹳草属植物（Geranium strictipes R.
Kunth）。
1.2 菌株 金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、大肠
紫地榆提取物体外抗菌活性研究
耿 玲 1，陈俊雅 2，李洪文 3，王 涛 1，施贵荣 2，李 辉 2*
（1.大理学院基础医学院，云南大理 671000；2.大理学院药学与化学学院，云南大理 671000；
3.楚雄医药高等专科学校，云南楚雄 675000）
［摘要］目的：从紫地榆乙酸乙酯部位分离得到不同组分，并对其进行体外抗菌活性研究。方法：通过大孔树脂柱对紫地榆乙
酸乙酯部位分离，分别用水和不同浓度的乙醇进行梯度洗脱，不同极性提取物用常量试管稀释法对13株常见病原菌和10株耐
甲氧西林金黄色葡萄球菌进行抑菌作用研究。结果：水部位提取物对标准菌株无明显抑菌活性；50%乙醇提取物对13株常见
病原菌和10株临床分离的MRSA均有不同程度的抑菌作用。结论：紫地榆50%乙醇提取物在体外有不同程度的抑菌活性。
［关键词］紫地榆；体外抗菌活性；最低抑菌浓度；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
［中图分类号］R962 ［文献标志码］A ［文章编号］1672-2345（2014）10-0014-04
The Antibacterial Activity of Extracts from Geranium strictipes R. Kunth in Vitro
GENG Ling1, CHEN Junya2, LI Hongwen3, WANG Tao1, SHI Guirong2, LI Hui2*
（1. Pre-clinical College, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China; 2. College of Pharmacy and Chemistry, Dali University, Dali,
Yunnan 671000, China; 3. Chuxiong Pharmaceutical College, Chuxiong, Yunnan 675000, China）
〔Abstract〕Objective: To study the antibacterial activity in vitro of different extracts isolated from the part of ethyl acetate extracted
from Geranium strictipes R. Kunth. Methods: The ethyl acetate extracts were eluted by H2O and the different concentration of the
ethanol through the macro- porous resin column, then the antibacterial effects of different extracts on the 13 common pathogenic
bacteria and MRSA were conducted by the method of constant tube dilution. Results: Water extract had no obviously antibacterial
activity on the standard bacterial strains. 50% ethanol extracts had a certain antibacterial activity at different degree on 13 common
pathogenic bacteria and 10 MRSA. Conclusion: The 50% ethanol extracts from Geranium strictipes R. Kunth have significant
antibacterial effect in vitro.
〔Key words〕Geranium strictipes R. Kunth; in vitro antibacterial activity; minimum inhibitory concentration; Methicillin resistant
Staphylococcus aureus
14
总第130期 第13卷耿 玲，陈俊雅，李洪文，等 紫地榆提取物体外抗菌活性研究
埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌H901、甲型副伤寒
沙门菌、肖氏沙门菌、铜绿假单胞菌、枯草杆菌、变
形杆菌、白假丝酵母菌。标准菌株金黄色葡萄球菌
（ATCC 25923），大肠埃希菌（ATCC 25922）。上述
菌株由本室保存。10株耐甲氧西林金黄色葡萄球
菌（MRSA）从云南省大理州人民医院住院病人和门
诊病人身上获取，并且经过菌落形态、革兰染色特
点、胶乳凝集试验和VITEK-32全自动微生物分析
仪GPI鉴定卡做菌株鉴定，确定所得菌株确实为耐
药株。
1.3 培养基 水解酪蛋白琼脂（简称：MH琼脂，杭
州天和微生物试剂有限公司，批号：120201）；水解
酪蛋白液体培养基（简称：MH肉汤，杭州天和微生
物试剂有限公司，批号：110513）；沙保罗氏琼脂（杭
州天和微生物试剂有限公司，批号：130528）；改良
液体沙氏培养基（杭州天和微生物试剂有限公司，
批号：120806）。
1.4 试剂 乙酸乙酯（工业级）；乙醇（工业级）。
1.5 仪器 SW-CJ-2FD 型双人单面净化工作台
（苏州净化设备有限公司）；隔水式恒温培养箱（上
海一恒科技有限公司）；YXQ-LS-50S11型立式压力
蒸汽灭菌器（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；
FD-1C-80冷冻干燥机（北京博医康实验仪器有限
公司）；R-210 旋转蒸发仪（瑞士 BUCHI）；VITEK-
32全自动微生物分析仪（法国生物梅里埃公司）。
2 方法
2.1 受试药物的制备 取紫地榆粗粉，用85%乙醇
提取3次，合并提取液浓缩至膏状后分别用氯仿、乙
酸乙酯萃取收集并浓缩至浸膏，备用。取大孔吸附
树脂（D101）以乙醇湿法装柱，用95%乙醇冲柱至混
合液澄清后再用蒸馏水冲柱至无醇味〔6〕。取乙酸乙
酯萃取浸膏 40 g溶于 300 mL蒸馏水中超声使其充
分溶解，通过已经处理好的树脂柱，并静置吸附过
夜使其充分饱和，然后用水和不同浓度的乙醇（20%
乙醇、50%乙醇、95%乙醇）洗脱，收集洗脱液浓缩后
冷冻干燥，备用。临用前用适当溶剂配制成所需浓
度即可。
2.2 最低抑菌浓度（MIC）的测定 采用常量试管
稀释法〔7-9〕测定紫地榆提取物对所试菌株的最低抑
菌浓度（Minimum inhibitory concentration，MIC）。
2.2.1 药物稀释 取无菌试管14支，每管加入MH
肉汤 2 mL，在第 1管中加入提取物（50 mg/mL）2
mL，混匀后从第 1管吸取 2 mL至第 2管，同样混匀
后从第 2管吸取 2 mL至第 3管，依次对倍稀释至第
11管，并从第 11管中吸取 2 mL弃去〔10〕。第 11、12、
13、14管分别为药物不加菌液对照、MH肉汤对照、
菌液对照和溶剂对照。各管中抗菌药物的终浓度
依次为 25、12.5、6.25、3.13、1.56、0.78、0.39、0.195、
0.098、0.049 mg/mL。
2.2.2 菌液制备 从MH琼脂培养基上挑取3~5个
菌落，用3~5 mL生理盐水调浓度至0.5麦氏单位，再
用MH肉汤 1：10稀释，使含菌量达到 107 CFU/mL，
稀释后的菌液在15 min内接种〔11-14〕。
2.2.3 接种 用微量加样器取0.1 mL检测菌液，除
第11、12、14管外，依次从低浓度到高浓度加到各试
管中。然后置于37 ℃恒温培养箱中培养18~20 h后
观察结果。
2.2.4 结果判断 由于药物颜色较深，影响最低抑
菌浓度（MIC）的观察，故培养后用微量加样器取出
100 μL溶液密集划线转种于MH琼脂平板、沙氏琼
脂平板上，继续培养24 h后，观察有无细菌生长，无
细菌生长或者细菌数小于5个的最低药物浓度为该
药物的最低抑菌浓度（MIC）。
3 结果
3.1 紫地榆乙酸乙酯部位水提取物对标准菌株的
MIC测定 紫地榆乙酸乙酯部位水提取物对两株标
准菌株在所测范围内无抑菌作用。见表1。
表1 水提取物对标准菌株的MIC的测定结果
菌种
ATCC25923
ATCC25922
药物稀释后浓度/（mg/mL）
25
＋
＋
12.5
＋
＋
6.25
＋
＋
3.13
＋
＋
1.56
＋
＋
0.78
＋
＋
0.39
＋
＋
0.195
＋
＋
0.098
＋
＋
0.049
＋
＋
注：“＋”表示有细菌生长。
15
大理学院学报总第130期 医学
3.2 紫地榆乙酸乙酯部位50%乙醇提取物对13株
临床常见病原菌的MIC测定 紫地榆乙酸乙酯部
位50%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球
菌、大肠埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌、甲型副
伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、铜绿假单胞菌、枯草杆
菌、变形杆菌、白假丝酵母菌；对标准菌株金黄色葡
萄球菌（ATCC 25923）、大肠埃希菌（ATCC 25922）
等菌株均有不同程度的抑菌作用，其中对金黄色葡
萄球菌、标准菌株金黄色葡萄球菌（ATCC 25923）、
白色葡萄球菌的抑菌作用较强，MIC分别为 1.56、
3.13、0.39 mg/mL，对枯草杆菌的抑菌作用次之，MIC
为6.25 mg/mL。见表2。
3.3 紫地榆乙酸乙酯部位50%乙醇提取物对10株
临床分离的MRSA的MIC测定 紫地榆乙酸乙酯部
位 50%乙醇提取物对临床分离的 10株耐甲氧西林
金黄色葡萄球菌（MRSA），均有不同程度的抑菌作
用，其中对编号为 2321的菌株抑菌效果最好，MIC
为 9.98 mg/mL，但其抑菌作用强度不及对临床常见
病原菌好。见表3。
4 讨论
本次抑菌实验所选菌株分别代表革兰氏阳性
菌、革兰氏阴性菌和真菌3类细菌，体外抑菌实验结
果表明提取物对革兰氏阳性菌有较强的抑菌作用，
对革兰氏阴性菌抑菌作用较弱，而对真菌的抑菌作
用不明显。
表3 50%乙醇提取物对MRSA的MIC的测定结果
菌种
2321
1134
2017
1924
0428
3027
1928
1618
1420
0213
MIC/（mg/mL, xˉ ±s）
9.98±7.97
17.91±10.88
18.42±10.60
12.64±0.19
14.64±11.43
15.17±10.86
22.06±7.66
19.91±8.19
16.11±10.00
21.17±8.80
菌种
金黄色葡萄球菌
ATCC 25923
大肠埃希菌
ATCC 25922
痢疾志贺菌
伤寒沙门菌H901
甲型副伤寒沙门菌
肖氏沙门菌
铜绿假单胞菌
白色葡萄球菌
变形杆菌
枯草杆菌
白假丝酵母菌
药物稀释后浓度/（mg/mL）
25
－
－
－
－
－
－
－
－
－
－
－
－
＋
12.5
－
－
＋
＋
－
－
－
＋
＋
－
－
－
＋
6.25
－
－
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
－
＋
－
＋
3.13
－
－
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
－
＋
＋
＋
1.56
－
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
－
＋
＋
＋
0.78
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
－
＋
＋
＋
0.39
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
－
＋
＋
＋
0.195
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
0.098
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
0.049
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
MIC
1.56
3.13
25.00
25.00
12.50
12.50
12.50
25.00
25.00
0.39
12.50
6.25
NO
注：“＋”表示有细菌生长，“－”表示无细菌生长，“NO”表示无抑菌作用。
表2 50%乙醇提取物对临床常见病原菌的MIC的测定结果
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总第130期 第13卷耿 玲，陈俊雅，李洪文，等 紫地榆提取物体外抗菌活性研究
本文对紫地榆乙酸乙酯部位进一步分离提取
纯化得到水提取物和不同浓度的乙醇提取物并进
行体外抑菌实验，结果发现水提物没有明显的抑菌
活性，这与预实验中用明胶沉淀法提取鞣质后剩余
部分的抑菌实验结果一致；而20%乙醇、50%乙醇和
95%乙醇部位均有一定的抑菌作用，其中 50%乙醇
部位的抑菌作用较好，从而我们推断可能是紫地榆
中的鞣质起到抑菌作用，但是否真是鞣质起抑菌作
用还有待下一步证实。
前期实验中我们还观察了紫地榆提取物和几
种抗生素联用后作用于10株MRSA，发现均可降低
抗生素对抗MRSA的MIC值，同时和某些抗生素具
有一定的协同作用。鉴于紫地榆总提物和各部位
提取物对葡萄球菌属均有较好的抑菌作用，所以我
们对10株MRSA进行单独抑菌实验活性研究，由表
3结果显示，紫地榆乙酸乙酯部位 50%乙醇提取物
对临床分离的 10株MRSA均有不同程度的抑菌作
用，其中对编号为 2321的菌株抑菌效果最好，MIC
值为 9.98 mg/mL，但是效果没有对临床常见病原菌
好。根据前期实验和本次实验可推断，紫地榆可和
抗生素联用来治疗临床上出现的耐药菌感染，它可
降低抗生素的用量，起协同作用。
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［收稿日期］2014-06-26 ［修回日期］2014-09-05
［作者简介］耿玲，助理实验师，主要从事病原微生物学研究.
*通信作者：李辉，教授.
（责任编辑 李 杨）
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