全 文 ：紫地榆对口腔致龋菌抑制作用的研究
李龙星 ,郭利军 ,蓝 海＊　(大理学院药学院 ,云南大理 671000)
摘要　[目的]研究中药紫地榆水提物对 2种常见致龋菌的抑菌活性。 [方法 ]采用琼脂稀释法测定紫地榆水提取物在体外厌氧环境对
变形链球菌、血链球菌的最低抑菌浓度(MIC)。 [结果 ]紫地榆水提取物对 2种试验菌株均有抑制作用 , 对变形链球菌的 MIC为 16
mg/ml,对血链球菌的 MIC为 8mg/ml。 [结论]紫地榆水提取物对牙周致病厌氧菌有较好的抑制作用。
关键词　紫地榆;变形链球菌;血链球菌
中图分类号　S567　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2010)36-20600-01
StudyontheBacteriostasisofGeraniumstrictipestotheOralCariogenicBacteria
LILong-xingetal　(DepartmentofPharmaceutical, DaliUniversity, Dali, Yunnan671000)
Abstract　[ Objective] ToinvestigateantibacterialactivityofGeraniumstrictipesagainsttwokindsofbacteriaincaries.[ Method] Theagar
dilutionmethodwasusedtodeterminetheminimalinhibitionconcentration(MIC)ofthewaterextractofGeraniumstrictipestoS.mutansand
S.sanguis.[ Result] Geraniumstrictipescaninhibitthegrowthofthetwobacteriatosomeextent.TheMICofwateracetateextractagainstS.
mutansandS.sanguiswas16, 8mg/ml.[ Conclusion] TheextractofGeraniumstrictipesisofcertaininhibitoryefectonbacteriaincaries.
Keywords　Geraniumstrictipes;S.mutans;S.sanguis
基金项目　大理州科学技术局资助项目(08DL102);云南省教育厅基金
资助项目(08C0194)。
作者简介　李龙星(1970-),男,云南剑川人 ,实验师 ,从事药物化学方
面的研究。 ＊通讯作者 , 教授 , E-mail:lanhai8696@ 126.
com。
收稿日期　2010-09-19
　　龋病是危害人类口腔健康的一大疾病 ,我国人群患龋率
为 40%,其中儿童的高达 80%。现代龋病病因学研究认为 ,
龋病的本质是菌群生态失衡性疾病。变形链球菌及血链球
菌是口腔的常驻菌 ,它们能发酵多种碳水化合物产酸 ,使菌
斑 pH值降到 5以下 ,从而导致牙齿硬组织的酸蚀脱矿 ,有机
物分解致龋损形成 [ 1] 。近年来 ,国内外许多学者致力于寻求
能有效维持口腔菌群生态平衡的药物。
紫地榆是牻牛儿科老鹳草植物的根 ,白族民间称隔山消
(GeraniumStrictipes),是云南省大理地区一种常见的中药材 ,
其根入药 ,在白族和彝族民间长期用作厌食症的治疗 ,同时
具有消炎 、止痢 、收敛的功效 [ 2] 。最近发现 ,紫地榆还有预防
龋齿的作用 [ 3] ,但紫地榆抑制口腔致龋病菌生长的适宜浓度
研究未见报道。五倍子(GalaChinensis)具有敛肺降火 、涩肠
止泻 、收湿敛疮等功效。用于肺虚久咳 、肺热痰嗽 、久泄久痢
等 [ 4] 。五倍子具有抗炎活性 ,对口腔致龋菌具有抑制作
用 [ 5] 。笔者以五倍子作阳性对照 ,研究紫地榆水提物对主要
致龋菌———变形链球菌 、血链球菌的抑制作用 ,寻找紫地榆
水提物对变形链球菌 、血链球菌抑制作用的适宜浓度。
1　材料与方法
1.1　试验材料　供试药材样品购于云南大理集盛堂大药房 ,
经大理学院药学院生药学马晓匡教授鉴定为紫地榆和五倍子。
供试菌株选用变形链球菌(S.mutans,变链)ATCC25175,血链
球菌(S.sanguis,血链)ATCC10556,由四川大学口腔医学院
口腔生物工程重点实验室提供 。TPY琼脂培养基(北京奥博
欣生物技术有限公司),厌氧袋(GENbagbioMérieu·xsa)。主
要仪器:SW-CJ-2FD型双人单面净化工作台(苏州净化设备
有限公司),隔水式恒温培养箱(上海一恒科技有限公司),
YXQ-LS-50SⅡ型立式压力蒸汽灭菌器(上海博讯实业有限公
司医疗设备厂), R-210旋转蒸发仪(瑞士步祺), LD5-10低速
离心机(北京医用离心机厂)。
1.2　试验方法
1.2.1　样品的制备。分别称取紫地榆和五倍子 2种药材各
50g,粉碎后以 500 ml蒸馏水浸提 3次 ,每次浸提时间 12 h,
其间超声提取 3次 ,各 1h。用纱布过滤后 ,静置 ,离心沉淀。
离心液在 60 ℃下减压浓缩至 50ml,备用。
1.2.2　试验菌液制备。将复苏后的供试菌种分别接种于
TPY琼脂培养基上 ,置 37 ℃恒温培养箱中厌氧袋培养 ,待
用;挑取琼脂平板上形态相同的菌落 ,用灭菌生理盐水校正
菌液浓度 ,使其相当于 0.5麦氏比浊标准 ,再用肉汤稀释 10
倍至含菌量约 107 cfu/ml,备用 。
1.2.3　含药 TPY培养基制备。将上述紫地榆和五倍子水提
物按照对倍稀释法溶于 TPY培养基中 ,使其生药终浓度达到
32.00、16.00、8.00、4.00、2.00、1.00、0.50、0.25 mg/ml。
1.2.4　最低抑菌浓度(MIC)测定 [ 6] 。将上述制备好的菌液
用移液器吸取 1 ～ 2 μl接种于含不同浓度药的 TPY琼脂培
养基表面 , 37℃下厌氧袋培养 48h。观察不同细菌在不同浓
度的药物平板上的生长情况 ,使细菌不生长的最低浓度即为
药物对该菌的 MIC。
2　结果与分析　
试验得出 ,紫地榆和五倍子对变形链球菌的 MIC值分别
为 16.00、4.00 mg/ml,紫地榆和五倍子对血链球菌的 MIC值
分别为 8.00、4.00 mg/ml。由表 1可知 ,紫地榆和五倍子水
提物对致龋菌都有较好的抑制作用 ,但五倍子的 MIC值相应
地低于紫地榆 ,即五倍子的抑菌效果优于紫地榆 ,原因可能
是五倍子中没食子酸含量高于紫地榆 [ 7-8] 。
3　讨论　
变形链球菌和血链球菌是龋病的主要病原菌 ,因此 ,对
变形链球菌和血链球菌的抑制作用为防龋药物研究的重要
指标之一。紫地榆中含有水解性没食子鞣酸 [ 7] ,研究证实 ,
没食子酸能抑制细菌产生水不溶性胞外多糖的关键酶 ———
葡糖基转移酶(GTF)的活性 ,从而在菌斑形成的早期即可有
效地减少粘附在牙齿表面的细菌数量。该试验结果显示 ,紫
地榆对变形链球菌和血链球菌均有抑制作用 , MIC值分别为
16.00、8.00 mg/ml。研究表明 ,紫地榆能有效抑制变形链球
(下转第 20613页)
责任编辑　李菲菲　责任校对　卢瑶安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(36):20600, 20613
2.2.3　试食蜂胶桑叶复合片对糖尿病病人血脂的影响。由
表 3可知 ,试验组试食蜂胶桑叶复合片后胆固醇及甘油三酯
水平均极显著下降(P<0.01);与对照组比较 ,食用蜂胶桑叶
复合片后试验组胆固醇及甘油三酯水平显著降低 (P<
0.05);试验组高密度脂蛋白胆固醇含量在试食前后无显著
变化(P>0.05);与对照组比较亦无显著差异(P>0.05);对
照组试验前后胆固醇 、甘油三酯 、高密度脂蛋白胆固醇均无
显著变化(P>0.05)。
2.3　安全性观察　通过对试验组及对照组糖尿病人血 、尿 、
大便常规检查及肝肾功能检查 、腹部 B超 、心电图 、X线胸部
透视检查表明 , 2组血象及肝肾功能 、大小便各项检测指标均
在正常范围 ,试食期间也未见任何过敏及不良反应 ,说明蜂
胶桑叶复合片对机体健康无明显影响。
3　结论与讨论　
高血糖是 2型糖尿病最直观的表现 ,持续性高血糖会殃
及全身器官 、组织及细胞 ,是引起糖尿病慢性并发症的主要
因素。在糖尿病治疗过程中 ,控制血糖水平是治疗的首要目
标。鉴于目前糖尿病治疗药物存在远期疗效欠佳 、毒副作用
大 、费用昂贵等缺点 ,饮食疗法依然是防治糖尿病的主要方
法。对降血糖功能因子及功能食品的研究具有重要意义。
蜂胶和桑叶因含有独特营养成分及多种药理作用已受到人
们的广泛重视。蜂胶中所含的大量黄酮类物质通过对体内
水解酶系的抑制作用从而抑制餐后血糖的升高 [ 6-7] 。蜂胶
中的黄酮类 、咖啡酸酯类成分还可通过抗氧化及免疫调节功
能等对糖尿病及其并发症起到保护作用 [ 8] 。桑叶中含有大
量多羟基生物碱类 、黄酮类 、多糖类成分被认为与 α-糖苷酶
活性抑制作用密切相关 ,从而起到降血糖作用 [ 9-10] 。蜂胶与
桑叶提取物进行复合配伍在营养功效及调节血糖功能上有
较好的协同作用。
采用自身对照及组间对照法 ,选择符合试验条件的志愿
受试者服用受试物 35 d后 ,发现试食蜂胶桑叶复合片 35 d
后试验组病人口渴多饮 、多食易饥 、倦怠乏力等糖尿病临床
症状明显改善 ,症状积分显著降低 ,各临床症状改善率均达
50%以上;试验组病人空腹血糖 、餐后 2 h血糖 、尿糖 、胆固
醇 、甘油三酯含量较对照组及自身试食前均显著或极显著降
低 ,其中空腹血糖平均下降 10.58%,餐后 2h血糖下降率为
10.56%,均大于 10%,证实了蜂胶桑叶复合片具有明显的调
节糖脂代谢的功能。
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(上接第 20600页)
菌及血链球菌的生长 ,抑菌作用随其水提物浓度的增加而增
强 ,为进一步对紫地榆在防龋药物的开发应用方面奠定了一
定的基础。
表 1　样品对变形链球菌和血链球菌的抑菌作用
Table1　TheantibacterialeffectofsamplesonS.mutansandS.sanguis
药材Medicine 菌种Bacteria 浓度Concentration
32.00 16.00 8.00 4.00 2.00 1.00 0.50 0.25
紫地榆 Geraniumstrictipes 变形链球菌(S.mutans) - - + + + + + +
五倍子 Gallachinensis 变形链球菌(S.mutans) - - - - + + + +
紫地榆 Geraniumstrictipes 血链球菌(S.sanguis) - - - + + + + +
五倍子 Gallachinensis 血链球菌(S.sanguis) - - - - + + + +
　注:“ -”表示无细菌生长。
　Note:“ -” standsfornobacteria.
参考文献
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2061338卷 36期　　　　　　　　　　　　　　　　李雅晶等　蜂胶桑叶复合片对 2型糖尿病病人糖脂代谢的调节作用