全 文 ：中 国 药 科 大 学 学 报
J o u rn a l oC f h in a P h a r m a c e u ti
e a l U n iv e r s i ty9 9 1 8;2 0 (5 ):2 8 3一62 8 3
九里香糖蛋白成分终止孕兔妊娠及其机理
张宗禹 韦 松 飞 陈安兰2 侯小宁2 阂知大 “
(生理学教研室; ’ 植物化学教研室 )
摘 要 从九里香 M o ra ya脚 n ic o la la (L )J ac ks .茎皮中分离得到的糖蛋白成分给孕期2 1 一1 6 d的
孕免 iPl om g /k g或羊膜腔内注射 3m g /胚胎 , 3一 d5 后获得明显的终止妊娠效果 。 同时给黄体酮
l m g / k g 连续 d6 不能对抗其抗孕作用 . 组织学检查蜕膜组织有变性 、 坏死 , 炎细胞浸润 , 血窦癖血
和出血等情况 . 本品对 已孕和未孕小 鼠离体子宫收缩无 明显改变 。 在麻醉状态下 , 给孕兔
iv lo m g / k g 时 , 5一 6m in 后子宫呈张力增强性节律收缩 . 幼兔连续 d4 iP 20 m g / kg 不能对抗雌二醇
和黄体酮所致的内膜增生反应 . 治疗量 10m g / k g 卵巢内妊娠黄体未见有特殊变化 , 指示终止妊娠
不是抗黄体作用的结果 。 该糖蛋白既无雌激素样作用 , 又无抗 H C G 活性 。 在终止妊娠中可能是通
过对蜕膜损害和导致 P G 释放而起作用 。
关键词 九里香 ; 糖蛋白 ; 终止妊娠
九 里 香 M u r r a y a 胆 n ie u al t a (L . ) J a e k s .为
芸香科植物 , 文献记载外用其根或全植物能堕
胎 「’ 】。 我们对九里香各药 用部分做了药理实
验 , 发现茎皮部分活性最强 2l[ , 进而对其有效
成分进行提取 、 分离 , 筛选出其有效成分为糖
蛋白 。 关于九里香皮抗生育成分 的化学本质与
药理作用 , 校生物化学教研室于 1 9 87 年首先
报道 f3l 。 本文着重介绍该类物质终止孕兔妊娠
效果与其机理 。
实 验 材 料
药物 : 本校植化室提供的九里香糖蛋白成
分 , 其精品 为淡灰黄 色粉 末 , 分解 点 约为
27 0℃ , 水溶液呈棕黄色 , 在琼脂糖电泳板上
呈 一个斑 点 , 样 品真 空 干燥 4 h 含 糖 量 为
32 一 37 % (以 D什 )葡萄糖计 ) , 氨基酸反应为弱
阳性 。
动物 : 实验所用的兔 、 小鼠 、 狗 、 豚鼠均
为本校动物房提供 。
方 法 和 结 果
一 、 终止孕兔妊娠试验 14
1
.
2一 3 k g 的 健康雌兔 , 分笼 饲 养 Zw k
后 , 分别与雄兔交配 , 并以交配成功的当天作
为妊娠的 d1 。 将孕期 12 一 15 d 的孕兔 15 只按
表 1进行药物处理 , 给药组一次 iP 九里香糖
蛋 白 10 m g / k g , 其中一组兔在用药前 2d 加
用黄体酮 l m g / k g · d 连续 6 d 。 对照组 iP 等
体积 的生理盐水 。 在用药后的 d s 解剖观察 。
结果表明 : 胚胎萎缩 , 胚体变白并部分液化吸
收 , 胎盘紫黑而硬 , 周围有棕色稠液 。 肌注黄
体酮连续 6 d 未见有保胎作用 。 对照组兔胚胎
微红柔软 , 发育正常 (见表 1) .
2
. 取孕期 1 5一 1 6d 的孕兔 , 局麻下切开下
腹部暴露子宫角 , 羊膜腔内注人九里香糖蛋白
3 m g / 胚胎 , 缝合伤 口 , 3 d 后 解剖观察胚胎
坏死情况 。 在 6 只孕兔的 16 胚胎中羊膜内给
药发现胚胎 皆坏死 , 其形状 、 色泽 、 硬度均与
腹腔给药者相 同 。 其余 10 胚胎只注人等体积
的生理盐水 , 结果 9 胎发育正常 (见表 l) 。
二 、 对胚胎和卵巢黄体的影响
用上述终止妊娠和发育正常活胎子宫段及
其卵巢 , 分别用 10 % 福尔马林固定后 , 制成
石腊切片 , H 一 E 染色 。 经病理形态学观察 :
1 9 8 9年 3月 2 日收稿 ’ J一西中医学院进修教师 2 1 9 7 8届毕业生
报学 学大
`甲
国 药中2 84 2 0卷
注射过糖蛋白的孕兔胚胎 , 其蜕膜组织呈局灶
性片状坏死 、 变性 、 炎细胞浸润 、 血窦高度扩
张疲血及窦旁渗出性出血 , 血管内有成堆粒细
胞聚集 。 注射糖蛋白前后连续 6d 肌注黄休酮
的孕兔胚胎亦同样如此 . 只是在蜕膜旁子宫内
膜可见到明显的腺体增生 、 肥大 . 对照组孕兔
的组织学观察未见上述改变 。 给药组和对照组
的卵巢内所含妊娠黄体均无特殊变化 , 提示本
药主要损伤蜕膜组织而对黄体细胞无甚影响 。
T
a b 1
.
E fe
e t o f t e r m i n a t e P er g n a n e y e a u se d b y g ly e o P r o t e i n (G P ) se P a
r a te d fr o m M
u
r
a担 刀口刀 i e u la t a in r a b b i t s
D O阴
D ur g
E m b yr o n ie d e v e lo Pm e n t
m g / k g m g / e m b yr o
R o u t e R
a b b i t S
T o t a l
e 们比b yr o A li V e D e a d
R a t e O f d e a d
e m b r y o
,
%
C o n t r o l
G P
G aP
G P + P r o g e s t e r o n e
C o n t r o l
G P
l 0
l 0
10+ 1 x 6 b
l
3 7
3 l
2 6
l
l 6
3 22
l 0() 乃0 二
9 3
.
9 4 二
10 0 X()
` .
10
.
0 0
10 0 0 二
-月尹,J60
ù
O1口,、ù飞2-一巾.IPiacōal
a
^ n o th o r b a t e h n u m b e r
.
bM e d i e a t io n or u t e i s i m
. “
x n t r a 一a m n io t ie in 多e t io n . ” p < 0 . 0一 e o m p a r“ w i th e o n t r o l g r o u p .
三 、 对子宫肌的影响 选 8一 1 19 雌性幼 鼠 , 分为给药组 与对照
1
. 离体子宫 : 取孕期 6一d8 和未孕小 鼠子 组 , 皆间 日一次 s c H C G Z u / 只 , 同时给药
宫 , 按温血动物离体器官描记装置记录子宫活 组 iP 糖蛋 白 l m g / 只 。 对照组给生理盐水 ,
动曲线 , 浴皿液为洛氏液 , 恒温 37 ℃ , 观察 至 d lZ 取出子宫 , 去脂肪称子宫湿重 , 结果
用药前后子宫肌的收缩变化 , 当浴皿液含该糖 对照组幼鼠 8 只 , 平均子 宫重量为 14 .3 8 士
蛋 白 0 .2 0一O3 1m g / m l 时 , 对已孕和 未孕小 1 . 72 m g / ( 10 9 体重 ) , 而给药组幼鼠 9 只 , 平
鼠子宫均无明显影响 . 均子宫重 量为 15 . 16 士 1 . 42 m g / ( 1 09 体重 )o
2
. 在体子宫 : 将孕期 9一 1d0 的孕兔或正 两 组无显 著差 异 (P > .0 05 ) , 显示该糖蛋 白
常兔乌拉坦麻醉后 , 在下腹部作一切 口 , 选择 l m g / 只时无对抗 H c G 的作用 。
一侧子宫角一段固定于子宫固定管上 , 并将此 六 、 雌激素样作用检查 l4,5 】
段子宫中间穿线吊起与描记装置相连 。 记录用 8一 1 19雌性幼鼠 13 只分成两组 , 给药组
药前后的收缩曲线 。 当 iv 该糖蛋白 10 m g / k g s 只 i p 糖蛋白 l m g / 只 , 对照组 5 只 ip 生理
5一 6m in 后 , 已孕和未孕子宫 皆呈现张力增强 盐水 , 皆间 日一次给药 , dl Z 取 出子 宫去脂
性节律收缩 , 已孕子宫的收缩幅度大于未孕子 肪 , 称其湿重 。 结果给药组和对照组子宫平均
宫 . 重量分别为 .6 0 士 0 . 3 8m g / ( 10 9 体重 )与 .5 6 士
四 、 对黄休酮作用的影响 14, 5] o . 3 2m g / ( 1鲍 休 重 ) , 两 组 无 显 著 差 异
取 .0 50 一 .0 7 5k g 的幼兔 4 只 , 均分为两 (P > .0 05 ) 。 提示该糖蛋 白无雌激素样作用 。
组 , dl 一6 均 sc 苯 甲酸雌二醇 5拜g / 只 , 七 、 毒性测定
d7 一 1 1 sc 黄体酮 l m g / 只 。 给药组在 d7 一 1 1 . L D S。 取 2鲍 左右的小鼠 50 只 , 随机
i p 九里香糖蛋 白 20 m g / k g, 对照组 iP 生理 分五组 , iP 九里香糖蛋 白后观察 3d , 按机率
盐水 。 dl Z 取出子宫制成切片 , 观察内膜腺体 单位法计算 L D S。 为 1 . 1 2 59 / k g 。
增生反应 。 结果在 20 m g / k g 剂量时 , 兔子宫 2 . 亚急性毒性试验 选择健康狗 6 只 ,
内膜呈分裂状突人宫腔 , 腺体增生 , 与对照组 均分为给药组和对照组 , 给药组每 日 i v 九里
差别不明显 。 据此推断治疗量 IOm g / 只的糖 香糖蛋白 10 m g / k g , 连续 d5 , 对照组则注射
蛋白终止妊娠作用不是对抗黄休酮的作用 。 等体积的生理盐水 。 用药前 、 后分别进行尿常
五 、 对 H C G 作用的影响l4,5 ]
5 期 张宗禹等 : 九里香糖蛋白成分终止孕兔妊娠及其机理 28 5
规 、 血象 (红 、 白细 胞 总数 , 白细胞分类 ) 、
肝 、 肾功能测定 , 至停药后 d 4 将狗解剖 , 取
心 、 肝 、 肺 、 肾 、 小肠 、 肾上腺制成组织切片
进行病理学检查 。 据各项检查结果表明 : 用药
前后血象 、 尿常规及肾功能皆无明显改变 , 肝
功能检查 ( S G P T )除用药组一只狗上升 49 单位
外 , 其余均在正常值范围内 , 重要脏器的病理
学检查 , 均未发现有异常改变 。 另外本品无溶
血作用 , 抗原性测定亦未发现有明显地过敏性
反应 .
八 、 联合用药拮抗副反应试验
该糖蛋白曾羊膜腔内给药试用于临床中期
引产获得成功 , 但有发热 、 寒战副作用 。 为
此 , 在兔体上加用其它药物 以克服此缺陷 。 将
一批兔饲养 Zw k , 每 4 d 测温一 次 , Zw k 后 ,
选取兔温基本稳定者 18 只 , 按体温相近者均
分为 6 组 , 固定箱内静止 hl 后 , 每 h 测温 1
次 , 两次测温基本一致 , 既分别按组给予待试
拮抗升温药物 , 给生理盐水为对照组 , 继而各
组皆 iv 糖蛋白 I Om g / k g , 并每 h 测温一次 ,
观测 hs . 室温变化为 16 士 1℃ 。 结果氯丙嚓
各剂量组阻止兔温上升最明显 , im 2 . sm g / k g
既能阻止兔温上升 。 可的松 25 m g / k g 对糖蛋
白引起的升温有缓解作用 . 复方氨基 比林针剂
l m l/ k g 在开始 h2 呈现缓和升温作用 , 继而
兔温持续上升 , 次 日晨全部兔体温恢复至原水
平 。
讨 论
从九里香提得的糖蛋白成分 , 经孕兔试验
确证有终止妊娠效果 。 其机理如下 : 1 .孕兔子
宫胚胎病理形态学观察 , 蜕膜有严重损害 。 由
于蜕膜细胞源于基质细胞 , 对胎仔有滋养和保
护作用 , 还有促黄体作用 6jI 。 它的崩溃可致母
体和胎仔间物质交换关系障碍和黄体激素下降
从而终止妊娠 。 2 .该糖蛋白对小 鼠离体子宫无
明显影响 , 但对兔在体子宫呈张力增强性节律
收缩 , 结合在拮抗副反应试验中 , 当兔注射该
糖蛋 白后皆有陆续排稀便现象 , 提示该糖蛋白
有促使释放内源性兴奋平滑肌的物质 。 也是参
与终止妊娠 的因素 。 1 9 6 7 年 K iar m 报道当蜕
膜发生退变坏死时 , P G 合成增加并游离出来
发动引产门 。 随后大量文献报道认为蜕膜细胞
破坏 , 能使细胞内溶酶体发生崩解 , 从而放出
大量 的磷醋酶 A Z , 使花生四烯酸增高 。 在
P G 合成酶 的参与下合成 P G I91 。 它 的释放诱
发宫缩 。 这在我国天花粉蛋白和芫花砧的引产
研究中得到确证 18, 0] 。 九里香糖蛋白成分终止
妊娠可能是由于蜕膜组织受损导致 P G 合成增
加 , 并释放引起子宫肌收缩的综合作用 。
本品临床试用有发热 、 寒战等副作用 。 这
与以蜕膜细胞退变为主机理的芫花砧副反应相
似 , 据其临床引产分析认为 : 此系胎盘内引起
严重 的化学炎症所致 【`01 , 用 肾上腺皮质激素
有明显缓解作用 , 这与本文内用可的松缓解兔
温升高结果相一致 。 用氯丙嗦 2 . s m g / k g , 可
完全阻止该糖蛋白的升温 , 但对子宫肌呈抑制
作用 。
致 谢 南京八一医院朱庸 、 南京妇幼保健医院
病理室 、 南京药物研究所强求精 、 南京生化研究所陈
亨贵及本校后德辉 、 李玲 、 陈琳等同志曾给予大力协
助 .
参 考 文 献
林启寿 . 中草药成分化学 . 北京 : 科学出版社 , 1 9 7 7 : 7 91
陈琼华 , 王淑如 , 张宗禹等 . 九里香的抗生育作用 . 中国
药科大学学报 1 9 8 7 ; 一8 (3 ) : 2一3一 5
王淑如 , 吴梧桐 , 陈琼华 . 九里香皮抗生育物质的分离 、
效价与毒性 . 中国药科大学学报 l蝇 7 ; 18 ( 3) : 183 一 6
中国医学科学院药物研究所 . 中草药有效成分的研究 . 第
二分册 , 北京 : 人民出版社 , 1 9 7 2 : 14一6 2 , 1一9一 2 3
B i g g s M H
,
B ig g s M
.
B i o ch e m ic a l e o n tar e e 洲勿月 .
A e d e m ie p r e s s I n e
.
( L o n d o n ) 19 7 6 : 2 2 7一 4 5 , 2 8 1一 9 1
袁其晓 , 高德伟 , 李春忠等 . 大鼠蜕膜组织的促黄体作用 .
生殖 与避孕 19 8 3 ; 3 (4 ) : 2 5铭
K a r im 5 M M
,
F il s h ie G M
.
T h e r a P e u t ie a b o r t io n u s in g
p r o s t a g l a n d in 一 F 2 . L a n c e t 1 97 0 ; l : 15 7
朱岩平 , 蔡仕萍 , 天花粉蛋白引产和内源前列腺素的关系
2 8 6中 国 药 科 大 学 学 报 2 0卷
的初步研究 . 动物学报 1 97 6; 2碑 ): 1 8于`
9梁耀光 . 芫花制剂中期妊娠引产 5 6例胎盘的形态观察 . 中
华妇产科杂志 一 97 9: 1 4 (4 ): 2 9卜 2
1 0上海市芫花菇临床协作组 芫花菇中期引产 2 01例临床分
杯 中华妇产科杂志 1 97 4 ; 9(4 ): 287一夕
S TU D YO N T ER MI NA TI O O NF R P G E NA NC YI NR I A B B TS A D NI TS MC E H
-
A NI S M Y BGL YC O PR O T EI NF R O M万 U 尺R A Y诫 尸诬 N五叮U 乙 A TA(L , ) J A C K S .
Z h a n g Z o n g y u
,
W
e
i S o n g
,
C h e n A n l a n
, x o u H ia o n i n g a n d M in Z h id a
D e胆 r zm e n z o f P hys io l o gy
T h e e feT
e t o f g ly e o p r o t e in i s o l a t e d fr o m M
o r a担 脚 n ic : ` aI r a ( L . ) o n d a y s 1 2一 16 o f p er g n a n t r a b b i t s w a s s h o w n t o
et mr in a t
e p邝 g n a n e y . w h e n th e g l y e o p r o t e in w a s ig v e n t o th e se e x p e ir m e n t a l a n im a ls fo r 1 0 m g / k g b y i p o r 3
m g / e m b卿 o n b y in tr a 一 a m n i o t ie in多e it o n , ht e o b v io u s a b o rt io n e fl 乞c t s w e邝 o b t a i n e d 3一5 d a y s a ft e r t r e a t m e n t T h e
曲 t iP er g n a n e y e fl七c t e o u ld n o t b e a n t a g o n iez d b y s im u lat n e o u s a d m in i s t r a t i o n o f P r o g e s t e r o n o s u e c e s iv e ly fo r 6 d a y s . B y
hi st ol
o g ie a l o b s e vr a t i o n
, 一h e d e g e n e ar t io n , n ec r o s i s , in n l tr a U o n o f le u e o 卿 t e s , b lo o d s t a s is o f s i n u s o id a n d h o m o r l l a g e
we er fo
u n d i n d e e id u a l t i s s u e
.
T h e g l y e o p r o t e in d id n o t in fl u e n e e th
e e o n t r a e t io n o f is o la ted
n o n 一P er g n a n t a n d p cr g n a n t
u t e r u s in m ice
s i g n iif e a n t ! y
.
W h il
e t h e e o m p o n e n t 15 g iv e n iv t o p er g n
a n t ar b b i t s u n d e r a n e s t h e s i a a t a d o s e o f 1 0 m g / k g
,
in e r e a s ed hr y th m i
e a l e o n t r a e t i o n o f u t e ir n e m y o m
e t r ie u m w
a s o b s o r v e d T h e g ly
e o p r o t e i
n o r 2 0 m g / k g g iv e n t o j
u v e n i le
ar b b it s fo r 4 d a y s e o u ld n o t in h i b i t ht e e n d o m e t r ia l h y P e r P la s ia cr s P o n s e in d u e ed b y
e s t r a d i
o l a n d P r o g e s t e or n e
.
A t th e
ht er a讲 u t ic d o 弧 o f 1 0 m g / k g n o 5 1助 i n e a n t e h a n g e s w e r e o b s e vr e d o n ht e c o r p u , la t e u m o f 郎 s t a t i o n I t w a s in d ie a t e d
ht a t a n t ip
r e g n a n e y e脆 e t o f g ]y e o p or et i n w a s n o t邝 la tde t o p r o g e s t e r o n e a dn gl y e o p r o et i n h a d n e i比 e r e s t r o g e n一 l ik e a e t iv -
it y
n o r a n t i一 H C G ac t io n
.
O u r 化 s u lst s u g g韶 t t h a t g ly e o P r o t e i n P r o b a b ly p r o d u e e s a n t i P r e g n a n e y e f f( 二e t b y d e s tur e t io n o f
de
c i d u a l t i s s u e a n d r e le a s e o f P G
.
K e Y w o rd s M
u r ar 夕a 脚 n ic 左 al ra ; G l y e o p or t e in ; T emr i n a t i o n o f p er g n a n e y
之门 r 心嘴 之冷 之卜气 . 占嘴 之卜勺 之厂宁 砚卜宁 召心 之砂会 之洲夕 之碑宁 吞宁 心尹宁 心夕 各 ? 之卜公 之户? ` 乌宁 召 r宁 心卜宁 舀弓护 、乡兮 砚尹户 之 户宁 之汾 占乍 之布 ` 之 户了 占 分 之而
《药学进展 》 1 9 9 0 年征订启事
《药学进展 》 系综合性药学情报 刊物 , 报道药学领域各学科的最新进展 、 研究成果及新技
术 、 新经验 ; 推荐有开发价值的新药 。 设有药学研究 、 新药世界 、 药学论坛 、 药师之友 、 科技市
场 、 企业之窗 、 标题信息等主要栏 目 。 本刊经 国家科委批准为公开发行刊物 。 国内统一刊号 :
c N 32 一 1 109
, 经邮局发行 , 邮发代号 : 28 一 1 1 2 , 欢迎广大药学工作者向当地邮局订阅 ! 若因故
漏订可向本刊编辑部征订 , 邮政编码 2 10 0 0 9 , 地址 : 南京中国药科大学期刊编辑部 。 订价 : 全
年 4 元 。